Objective : The aim of this study was to investigate the skin-whitening effect of Kakamseosiokyong-san Method : We investigated that the extracts of Kakamseosiokyong-san inhibit activity of tyrosinase, the enzyme which converts 3-(3,4-dihydroxyphenyl)alanine to dopachrom in the biosynthetic process of melanin. the UV absorbance of the extracts in the UV - A region and UV - B region was measured by UV scanning. the effect of extracts on cell viability and melanin production in cultured B16 mouse melanoma cells was measured, and cytoprotective effects of extracts on PC12 cells injured by hydrogen peroxide was measured by MTT assay Results: The extracts of Kakamseosiokyong-san inhibited activity of tyrosinase. The extracts not only showed inhibitory effects on melanin production in cultured B16 mouse melanoma cells, but also exhibited cytoprotective effects on PC12 cells injured by hydrogen peroxide, but did not showed an absorbance in the UV - A region and UV - B region. Conclusion: These results suggest that Kakamseosiokyong-san inhibit melanin biosynthesis which is involved in hyperpigmentation and could be used as a whitening agent for the skin.
제사공장에서 부산물로 나오는 번데기는 단백질의 함량이 높을 뿐 아니라 필수 아미노산 조성도 우수하여 영양적으로 좋은 단백질원으로 알려져 있다. 이에 번데기로 농축단백질을 조제해서 무수초산과 호박산으로 아실화시켜 아미노산조성 및 주사전자현미경에 의한 관찰을 대두농축단백질과 비교 검토하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 1. 번데기 농축단백질의 단백질 함량은 84.1%로서 대두농축단백질의 70.3%보다 높았다. 2. 번데기 농축단백질은 아미노산 조성에 있어서 대두농축단백질보다 필수 아미노산 함량이 높았으며 특히 대두에 부족한 methionine은 4.21(g/100g)로 매우 높았고, F.A.O.의 scoring pattern과 비교시 전체적으로 필수 아미노산이 함량이 높았다. 또한 번데기 농축단백질은 alanine, valine, phenylanine, isoleucine 등 지방족 아미노산의 함량이 높게 나타났다. 한편 변형번데기단백질에서는 아미노산의 함량에 약간의 손실을 가져왔으며 숙시닐화에서 더 큰 경향을 나타내었고 특히 lysine의 함량이 현저하게 감소되었다. 3. 주사전자현미경에 의한 관찰에서 탈지번데기분은 작고 입자가 많이 모여 하나의 agglomerate의 형태로 거칠고 세포성이 그대로 보존되어 있다. 기포의 생성이 많았으며 입자가 불균일(10~$20\mu{m}$)하였다. 번데기 농축단백질은 탈지번데기분보다 세포성이 많이 파괴되어 기포의 생성도 적어 입자의 표면적이 어느정도 넓고 부드러웠다. 또한 변형번데기농축단백질에서는 현저하게 세포성이 파괴되고 가 감소하여 좋은 조직을 형성하였으며 특히 숙시닐화한 단백질에서는 아주 부드럽고 좋은 조직을 나타내었다.
1. 한국에서 재배된 영지의 일반 성분을 분석한 결과, 수분 14.6 %, 회분 2.0 %, 조 지방 3.3 %, 조 단백 질 23.6 %, 조 섬유 59.0 %이었다. 9 종의 환원당 중 maltose가 9.2 mg/g으로써 가장 많았다. alanine을 비롯한 17 종의 유리 아미노산이 함유되어 있었다. 열수 추출액의 pH는 $4.1{\sim}4.2$ 이었다. 2. 주사 전자 현미경으로 2 종류의 재배 영지의 포자 표면의 미세 구조를 관찰하여 본 결과, 차이점이 없었으며 그 크기는 장경(長 徑) $6.3{\sim}7.1\;{\mu}m$, 단경(短徑) $3.5{\sim}4.3\;{\mu}m$, 두께 $2.0{\sim}2.5\;{\mu}m$이었다. 표면의 오목한 부분은 직경(直徑) $0.4{\sim}0.5\;{\mu}m$의 원형이다. 3. Sarcoma-180을 이식한 마우스에 대한 영지의 수명 연장 효과는 Fraction A가 131.7 %, Fraction B가 162.5 %, Fraction C가 141.7 %이었다. 4. Fraction B를 40 mg/kg의 용량으로 5 일간 마우스에 투여하였을 때, 지연형 과민만응이 대조군에 비하여 66.7 %로 회복되었다.
An Actinomycetes producing an anti-VRSA (vancomycin-resistant Staphylococcus aureus) substance was isolated from soil. The cultural, morphological, physiological and phylogenetic analyses of an isolated strain were investigated for identification. Cultural characteristics based on ISP (International Streptomyces Project) were as follows: white aerial mycelium, yellow reverse side, and good growth on various medium. Also, the isolate did not produce the soluble pigment. Morphological characteristics were showed cylindrical spore chain and smooth spore surface by SEM (Scanning Electron Microscope). Physiological characteristics were showed LL-type by DAP isomer analysis and detected glycine, glutamic acid and alanine. A phylogenetic analysis of the 16S rDNA provided a clue that the isolated strain was actually a member of the genus Streptomyces, because the determined sequence exhibited a higher homology with Streptomyces echinatus. The isolate was identified to be a genus of Streptomyces sp.. The optimal culture conditions for the maximum production of anti-VRSA substance by Streptomyces sp. were attained in a culture medium composed of $2.0\%$ (w/v) glucose, and $0.4\%$ (w/v) yeast extract. The anti-VRSA substance was highly produced after 5 days of culture. Optimal pH and temperature conditions for the production of anti-VRSA substance were pH 7.0 and $28^{\circ}C$, respectively.
Kim, Yun-Kyeong;Choi, In-Geol;Nam, Won-Woo;Yu, Yeon-Gyu
BMB Reports
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제33권6호
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pp.493-498
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2000
Aquifex pyrophilus, a hyperthermophilic bacterium, has a serine-type protease that is located at the cell wall fraction with a mature size of 43 kDa. Molecular cloning of the protease gene revealed that it has an ORF of 619 amino acids with homologous catalytic site of serine-type proteases [Choi, I.-G., Bang, W.-K., Kim, S.-H., Yu, G. Y., J. Biol. Chem. (1999), Vol. 274, pp. 881-888]. Constructs containing different regions of the protease gene, including a alanine-substituted mutant at the active site serine, were constructed, and the factors affecting the expression level of the cloned protease gene in E. coli were examined. The presence of the C-terminus hydrophobic region of the protease hindered over-expression in E. coli. Also, the proteolytic activity of the expressed protein appeared to toxic to E. coli. An inactive form that deleted both of the N-terminal signal sequence and the C-terminal polar residues was over-expressed in a soluble form, purified to homogeneity, and its thermostability examined. The purified protein showed three disulfide bonds and three free sulfhydryl group. The thermal denaturation temperature of the protein was measured around $90^{\circ}C$ using a differential scanning calorimeter and circular dichroism spectrometry. The disulfide bonds were hardly reduced in the presence of reducing agents, suggesting that these disulfide bonds were located inside of the protein surface.
배경: 흉부대동맥 수술에 사용하는 헤파린 우회도관의 국산화를 위해, 헤파린 표면처리기법 중 물리분산법을 이용하여 제작한 우회도관의 동물실험을 통해 혈전저항성 및 안정성을 증명하고자 하였다. 대상 및 방법: 성견 21마리(17.5∼25 kg)를 대상으로 하행흉부대동맥 우회모델을 만들었다. 사용한 우회도관의 종류에 따라 무처리 우회도관군(CONTROL; n=3), 무처리 우회도관 및 전신 헤파린 처치군(HEPARIN; n=6), Gott 헤파린 우회도관군(GOTT; n=6), 국산 헤파린 우회도관군(KIST; n=6)로 분류하였다. 관찰지표는 말초혈액검사, 혈액응고검사, 신장 및 간기능검사, 표면전자현미경 소견 등이었다. 각 지표는 우회도관의 원위부 대동맥 혈액에서 검사하여 우회 전과 우회 후 2시간 째의 군내 변화와군간 차이를 비교하였다. 결과: 모든 관찰지표의 우회 전 기초치는 군간에 차이가 없었다. 말초혈액검사 중 혈소판치는 HEPARIN군과 GOTT군에서 유의하게 높아졌으나(p<0.05) 군간 차이는 유의하지 않았다. 기타 혈구세포의 변화는 각 군에서 군내변화와 군간차이가 유의하지 않았다. Activated clotting time, activated partial thromboplastin time, thrombin time은 HEPARIN군에서 현저히 증가하였고(p<0.05) 군간차이도 유의하였다(p<0.005). Prothrombin time은 GOTT군에서 유의하게 증가하였으나(p<0.05) 군간차이는 없었다. Fibrinogen은 각 군에서 군내변화와 군간차이가 유의하지 않았다. Antithrombin III는 HEPARIN군과 KIST군에서 유의하게 감소하였고(p<0.05) 군간차이도 유의하였다(p<0.05). Protein C는 HEPARIN군에서 유의하게 감소하였으나(p<0.05) 군간차이는 없었다. Blood urea nitrogen은 HEPARIN군과 KIST군에서 유의하게 증가하였으나(p<0.05) 군간차이는 없었다. Creatinine, aspartate aminotransferase, alanine aminotransferase는 각 군에서 군내변화와 군간차이가 유의하지 않았다. 표면전자현미경 소견에서 혈소판 및 혈구세포 응집정도는 CONTROL군이 가장 심했고, HEPARIN군은 GOTT군이나 KIST군에 비해 많았다. 결론: 이상의 결과에서 전신 헤파린 처치(HEPARIN)는 출혈경향을 증가시키면서 이물질 표면의 응고반응을 효과적으로 차단하지 못하는 반면, 헤파린 표면처리된 우회도관(GOTT & KIST)의 경우는 출혈경향 없이 표면의 응고반응을 충분히 억제하였다. 또한 국산(KIST) 헤파린 우회도관은 상용화된 외국산(GOTT)과 동등한 항혈전 성능을 보였다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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