맥주는 가장 대중적인 알코올 발효주이지만 퓨린(purine) 함량이 높아 고요산혈증 및 통풍 발생과 연관이 있다고 알려져 있다. 본 연구에서는 맥주 발효 온도를 달리함으로써 맥주의 퓨린 함량을 낮출 수 있는지 알아보았다. 맥주 제조의 주된 발효법인 상면 발효와 하면 발효에서 주로 사용되는 $20^{\circ}C$와 $10^{\circ}C$ 온도에서 맥주를 발효한 후, 각각에서 대표적 퓨린 화합물인 adenine, guanine 그리고 xanthine들의 함량을 high performance liquid chromatography 방법으로 측정하였다. 그 결과, $10^{\circ}C$ 발효 맥주가 $20^{\circ}C$ 발효 맥주에 비해 총 퓨린 함량이 낮았으며, 특히 adenine의 함량이 의미있게 낮아져 있음을 확인하였다.
Effects of various nitrogenous compounds on the peroxidative activity of Korean radish (Rophanus sativus L.) isoperoxidase $A_1$ were examined by using anilino substrates, such as dianisidine and phenylenediamine. We also used phenolic substrates such as guaiacol, chlorogenic acid, caffeic acid, ferulic acid and esculetin. The peroxidation of dianisidine was stimulated by adenine and imidazole as much as 5 fold and 11 fold, respectively at pH 8. Moreover, about 4.8 fold and 8 fold stimulation of phenylenediamine peroxidation occurred by adenine and imidazole, respectively at pH 8. The stimulation by adenine and imidazole did not occur at the acidic pH range. The peroxidations of phenolic substrates, such as guaiacol, chlorogenic acid, caffeic acid, ferulic acid and esculetin, were not boosted greatly by any of the nitrogenous compounds tested. Notably, ammonium salt, which has been known for the excellent booster of horseradish peroxidase, did not affect the peroxidation of the Korean radish isoperoxidase $A_1$. The kinetic studies of dianisidine peroxidation with imidazole, as a model of boosting reaction, showed that neither the affinity of imidazole against dianisidine, nor the activation energy of dianisidine peroxidation changed during the activity boosting of isoperoxidase $A_1$.
Intracellular adenosine deaminase (ADA) from Aspergillus oryzae was purified using ammonium sulfate fractionation, a DEAE-Sephadex A-50 anion exchange chromatography, an ultrafiltration using a PM 10 membrane and two times of Sephadex G-100 gel filtration chromatography. The enzyme was purified 151 fold with a 9% recovery. Purified enzyme gave a single protein band with a molecular weight of 105,000 delton. The enzyme was reasonably stable. The enzyme activity was kept even after 1 hr incubation at 55.deg.C, but decreased significantly at 60.deg.C. The pH optimum was found to be from 6.5 to 7.5. Among tested compounds, the substrate activity was found with adenosine, adenine arainofuranoside, formymcin A, 2'-deoxyadenosine, 3'-deoxyadenosine, 2', 3'-isopropylidene adenosine, 2,6-diaminopurine deoxyriboside, .betha.-nicotinamide adenine dinucleotide (reduced form), 6-chloropurine riboside, 2'-adenine monophosphate (AMP), 3'-AMP and 5'-AMP. The values of Km of adenosine and 2'-deoxyadenosine were calculated to be 500 and .$710\mu$m, respectively. ADA was sensitivite to $Zn^{2+}$, $^Cu{2+}$ and $Fe^{3+}$, p-chloromercuribenzoate and mersalyl acid inactivated the enzyme. The activity of enzyme was not changed when ADA was incubated with dithiothreititol, 2-mercaptoethanol, N-ethylmaleimide, iodoacetic acid and iodoacetamide.
ErmSF는 23S rRNA의 A2058 (E. coli numbering)에 methylation을 유발하여 macrolide-lincosamide-streptogramin B ($MLS_B$)계 항생제의 부착을 저해함으로써 항생제 활성을 억제하는 내성인자 단백질인 Erm 단백질들 중의 하나이다. Erm 단백질들 사이에서 공통적으로 나타나는 $^{222}FXPXPXVXS^{230}$ (ErmSF numbering) 서열은 Erm 단백질인 ErmC'와 DNA methyltransferase인 M. Taq I의 구조를 분석한 연구에서 타깃인 adenine과 직접적으로 상호작용하는 부위로 제안되거나 확인되었다. 따라서 이 부분 중 Erm 단백질 사이에서 잘 보존되어있지는 않지만 염기성인 잔기의 특성상 기질인 RNA와 상호작용이 예상되는 223, 227번 arginine을 alanine으로 위치 지정 치환한 변이 단백질을 이용하여 그 잔기의 효소 활성에서의 역할을 확인하였다. 두 변이 단백질은 생체 내에서 그 활성을 여전히 유지하고 있어서 항생제인 erythromycin에 대하여 내성을 나타내었으나 in vitro 상에서는 R223A 또는 R227A가 야생형 ErmSF에 비하여 약 50%, 88%의 활성을 각각 나타내어 효소 활성에서 각 잔기가 결정적이지는 않지만 중요한 역할을 수행하고 있음을 확인하였다.
As a part of an ongoing effort to discover inhibitors of the Hepatitis C Virus RNA replication, we describe here the first synthetic route of 1'($\alpha$),2'($\beta$)-C-dimethyl carbocyclic adenine analogue. The key intermediate cyclopentenyl alcohol 8($\alpha$) was prepared from aldehyde 4 using ring-closing metathesis (RCM) as a key reaction. Coupling of 8($\alpha$) with nucleosidic base via the regioselective Mitsunobu reaction followed by stereoselective dihydoxylation and deprotection afforded the target carbocyclic adenine analogue 12.
We developed a glucose sensor using glucose dehydrogenase flavin adenine dinucleotide (GDH-FAD). The structure of the three-layer glucose sensor was simplified, in which a single-layer design was used to lower the unit cost, and GDH-FAD was used to increase the measurement reliability. GDH-FAD has less impact on the 20 interfering substances that affect blood glucose measurement, such as galactose and maltose compared to glucose oxidase (GOD), and is not affected by the oxygen saturation; therefore, it is possible to measure both arterial or venous blood and thus less susceptibility to hematocrit. In this study, we developed a single-layer glucose sensor strip with low hematocrit effect using the GDH-FAD enzyme, and measured and evaluated the performance.
From the outer membrane portion of Gram-negative Klebsiella pneumoniae, the activity of 2-furaldehyde dehydrogenase depending upon beta-nicotinamide adenine dinucleotide was detected. Cytoplasmic membrane was preferentially extracted from crude membrane with $Mg^{2+}$ and Triton X-100, and then outer membrane was collected by ultracentrifugation. The crude enzyme was obtained by solubilization of outer membrane with lysozyme, ethylene diamine tetraacetate and Triton X-100. Thereafter 2-furaldehyde dehydrogenase was partially purified through column chromatography on QAE-Sephadex Q-50 and Sephadex G-150 and the enzyme activity was analyzed by means of high performance liquid chromatography. The optimal pH for the activity of the enzyme was about 9.5 and the optimal temperature was about $85^{\circ}C$. The partially purified enzyme retained tis activity at $85^{\circ}C$ for 5 hours. The optimal concentration of Triton X-100 for the activity of the enzyme was about 1.5% in the reaction mixture.
Novel 5'-deoxythreosyl purine phosphonic acid analogues containing a 2'-electropositive moiety such as fluorine atom, were designed and synthesized from commercially available 1,3-dihydroxy acetone. Condensation successfully proceeded from a glycosyl donor 6 under Vorbr$\ddot{u}$ggen conditions and cross-metathesis gave the desired phosphonate analogues 7a, 7b, 17a and 17b. The synthesized nucleoside phosphonic acid analogues 13, 16, 23, 26, 28 were subjected to antiviral screening against HIV-1. The bis(SATE) adenine analogue 28 exhibited significant in vitro activities against HIV-1.
항효모성물질인 Astradix-P의 항균력은 염기성 아미노산이 존재할 때 길항적으로 감소하였다. 금번에는 염기성물질 및 vitamin이 항생력에 어떠한 영향을 미치는가 조사한 결사 adenine 및 thiamine, riboflavin, pyridoxin cobalamin, nicotinic acid, folic acid, p-aminobenzoic acid, pantothenic acid, biotin, inositol등에 의해서는 전혀 영향을 받지 않았다
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[게시일 2004년 10월 1일]
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