Xylophagous termites are capable of degrading lignocellulose by symbiotic gut microorganisms along with the host's indigenous enzymes. Therefore, the termite gut might be a potential niche to obtain natural yeasts with celluloytic, xylanolytic and ethanologenic traits required for bioethanol production from lignocellulosic biomass. In this study, we cultured 79 yeasts from three different termites viz. Coptotermes heimi, Odontotermes javanicus and Odontotermes obesus. After suitable screening methods, we identified 53 yeasts, which belonged to 10 genera and 16 different species of both ascomycetous and basidiomycetous yeasts. Most yeasts in the present study represent their first-ever isolation from the termite gut. Representative strains of identified yeasts were evaluated for their cellulolytic, xylanolytic, and ethanologenic abilities. None of the isolates showed cellulase activity; 22 showed xylanolytic activity, while six produced substantial quantities of ethanol. Among xylanolytic cultures, Pseudozyma hubeiensis STAG 1.7 and Hannaella pagnoccae STAG 1.14 produced 1.31 and 1.17 IU of xylanase. Among ethanologenic yeasts, the strains belonging to genera Candida and Kodamaea produced high amount of ethanol. Overall, highest ethanol level of 4.42 g/L was produced by Candida tropicalis TS32 using 1% glucose, which increased up to 22.92 g/L at 35 ℃, pH 4.5 with 5% glucose. Fermentation of rice straw hydrolysate gave 8.95 g/l of ethanol with a yield of 0.42 g/g using the strain TS32. Our study highlights the gut of wood-feeding termites as a potential source of diverse yeasts that would be useful in the production of xylanase and bioethanol.
In order to maximize the RNA accumulation and biomass production is Saccharomyces cerevisiae MTY62, a high-content RNA yeast strain, batch and fed-batch cultures were performed. Among the feeding modes of fed-batch cultures examined, the intermittent feeding mode R\`(IFB-lV), in which 50 ml of 40% molasses and 20% com steep liquor (CSL) solution was intermittently fed for 5 times, resulted in the cell concentration of 33.8 g- dry cell weight/1 and the RNA concentration of 5221 mg-/l, and RNA content of 153 mg-RNA/g-dry cell weight. The constant fed-batch with feeding mode III (CFB-III), in which the feeding rate of 40% molasses and 20% CSL solution was stepwisely decreased from 48 mph (9-13 h), to 24 mph (13-21 h), and to 18 ml/h (21∼ 48 h), gave the highest cell concentration of 42.7 g-dry ceil weigh71 and R7IA concentration of 5536 mg-RNA/1, which were about 2.4-fold and 1.9-fold increased levels, respectively, compared to the results of batch culture. However, the RNA con- tent of 130 mg-RNA/g-dry cell weight of the fed-batch was lower than that of the batch culture (171 mg-RNA/g-dry cell weight) and other fed-batch cultures. When the specific growth rates in the fed-batch cultures were increased, the RNA contents increased. This result indicates that the RNA content is adversely proportional to the cell concen- tration. However, at the same specific growth rate, the RNA content was maintained at higher level in the intermit- tent fed-batch than in the constant fed-batch culture.
We described production of bioactive compounds from fungi grown on Korean ginseng-steaming effluents (GSE) for develop high-value added nutraceuticals from Korean GSE. Hansenula anomala KCCM 11473, which grew well in Korean GSE had high RNA content, and its optimal autolysis conditions were established to produce 5'-ribonucleotides (13.9~28.5 mg/g of biomass) at $55^{\circ}C$ and pH 5.0 for 24 h. 5'-Phosphodiesterase and adenyl deaminase were not effective in increasing the yield of 5'-ribinucleatides, but the yield of IMP increased significantly only after the addition of 1.0% adenyl deaminase. Saccharomyces cerevisiae showed the highest growth in the GSE medium. 267.1 mg of S. cerevisiae biomass was produced from 1 g of GSE solid and medicinal ginsenoside-$Rg_3$ contents was determined with 0.033 mg. Mucor miehei KCTC 6011 produced approximately 120 mg of chitosan per g-dry mycelium in 84 h at $25^{\circ}C$ when grown in the GSE (pH 8.0) supplemented with 0.5% yeast extract and 0.002% $CuSO_4$. Chitosan produced by M. miehei KCTC 6011 have deacetylated approximately 56% and its viscosity and molecular weight of the chitosan were 80 cps and $1.07\times10^3$ kDa, respectively. The chitosan at 1.5 mg/ml inhibited 73.9% of the mycelium growth of Rhizotonia solani in 60 h.
A Pseudomonas fluorescens was selected from mushrooms and studied in both batch and fed-batch cultures in order to get maximal biomass concentration. P. fluorescens is an aerobic bacterium and antagonistic to Pseudomonas tolaasii which causes blotch disease on the mushroom cap. P fluarescens and P. tolaasii were identified by Gram staining, gelatin liquefaction, oxidase test, etc. and were characterized by pigment production, temperature sensitivity, salt tolerance and rapid pitting test, etc., Celts of P. fluorescens well in medium containing 30g/L of glucose, whereas the growth was inhibited at the glucose levels at higher than 30g/L. The highest values of specific growth rate and productivity were obtained when using 10g/1 of yeast extract. Optimum concentrations of $NH_4Cl$ and ${(NH_4Cl)}_2SO_4$ for culture were found to be 1.0g/L and 0.1g/L respectively. Optimum concentration of $MgSO_4{\cdot}7H_2O$ used as a sulfursource was 1.0g/L. It was also found that the cell concentrations reached the maximum level when grown on the medium containing 1.0g/L of $KH_2PO_4$ and 0.1g/L of $CaCl_2$. Also, the optimum culture conditions were $30^{\circ}C$ and pH 6.0. Cultivation of P. fluarescens at high dissolved oxygen (DO) concentration led to a decrease of bacterial productivity in batch culture. Maximum productivity was achieved at 40% DO concentration.
Takahashi, J.;Mwenya, B.;Santoso, B.;Sar, C.;Umetsu, K.;Kishimoto, T.;Nishizaki, K.;Kimura, K.;Hamamoto, O.
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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v.18
no.8
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pp.1199-1208
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2005
Abatement of greenhouse gas emitted from ruminants and promotion of biogas energy from animal effluent were comprehensively examined in each anaerobic fermentation reactor and animal experiments. Moreover, the energy conversion efficiency of biomass energy to power generation were evaluated with a gas engine generator or proton exchange membrane fuel cell (PEMFC). To mitigate safely rumen methanogenesis with nutritional manipulation the suppressing effects of some strains of lactic acid bacteria and yeast, bacteriocin, $\beta$1-4 galactooligosaccharide, plant extracts (Yucca schidigera and Quillaja saponarea), L-cysteine and/or nitrate on rumen methane emission were compared with antibiotics. For in vitro trials, cumulative methane production was evaluated using the continuous fermented gas qualification system inoculated with the strained rumen fluid from rumen fistulated Holstein cows. For in vivo, four sequential ventilated head cages equipped with a fully automated gas analyzing system were used to examine the manipulating effects of $\beta$1-4 galactooligosaccharide, lactic acid bacteria (Leuconostoc mesenteroides subsp. mesenteroides), yeast (Trichosporon serticeum), nisin and Yucca schidigera and/or nitrate on rumen methanogenesis. Furthermore, biogas energy recycled from animal effluent was evaluated with anaerobic bioreactors. Utilization of recycled energy as fuel for a co-generator and fuel cell was tested in the thermophilic biogas plant system. From the results of in vitro and in vivo trials, nitrate was shown to be a strong methane suppressor, although nitrate per se is hazardous. L-cysteine could remove this risk. $\beta$1-4 galactooligosaccharide, Candida kefyr, nisin, Yucca schidigera and Quillaja saponarea are thought to possibly control methanogenesis in the rumen. It is possible to simulate the available energy recycled through animal effluent from feed energy resources by making total energy balance sheets of the process from feed energy to recycled energy.
Kim, Hyun-Jung;Kim, Yoon-Hee;Cho, Moon-Jung;Shin, Keum;Lee, Dong-Heub;Kim, Tae-Jong;Kim, Yeong-Suk
Journal of the Korean Wood Science and Technology
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v.38
no.6
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pp.547-560
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2010
The optimum culture condition of Schizophyllum commune for the cellulase production and its enzymatic characteristics for saccharification of cellulosic biomass were analyzed. S. commune secrets ${\beta}$-1,4-xylosidase (BXL) and cellulases, including endo-${\beta}$-1,4-glucanase (EG), cellobiohydrolase (CBH), and ${\beta}$-glucosidase (BGL). The optimum reaction temperature for all cellulases was $50^{\circ}C$ and the thermostable range was $30{\sim}40^{\circ}C$C. The optimum reaction pH for all cellulases was 5.5 in a range of temperature from $0^{\circ}C$ to $55^{\circ}C$. The best nutritions for the cellulase production of S. commune among tested nutrients were 2% cellulose for the carbon source and corn steep liquor or peptone/yeast extract for the nitrogen source without vitamins. The environmental culture condition for the cellulase production was 5.5~6.0 for pH at $25{\sim}30^{\circ}C$. The enzyme activities of EG, BGL, CBH, and BXL were 3670.5, 631.9, 398.5, and 15.2 U/$m{\ell}$, respectively, after concentration forty times from the culture broth of S. commune which was grown at the optimized culture condition. Alternative filter paper unit assay showed 11 FPU/$m{\ell}$ enzyme activity. The saccharification tests using cellulase of S. commune showed the low saccharification rate on tested hardwoods but a high value of 50.5% on cellulose, respectively. The saccharification rate (50.5%) of cellulose by cellulase produced in this work is higher than 45.7% in the commercial enzyme (Celluclast 1.5L, 30 FPU/g, glucan).
In this study, a facile two-step pretreatment method was investigated for producing fermentable sugars. Rice straw was pretreated using electron beam irradiation (EBI) and 4-methylmorpholine-N-oxide (NMMO) prior to enzymatic hydrolysis. In the first stage, the EBI on the rice straw was carried out at various doses (100, 300, 500 kGy) and then, irradiated rice straw was stirred with NMMO solution at 120°C for 1 h for the second stage. The pretreated rice straw was hydrolyzed by cellulase 1.5 L (70 FPU/ml) and Novozyme-188 (40 CbU/ml) at 50°C for 24, 48, and 72 h. A sugar yield of 83.8% was obtained from the pretreated rice straw after 72 h of enzymatic hydrolysis. Also, FTIR and XRD results indicate that the pretreatment of the rice straw was effective due to the synergic effects of the two-step pretreatment. In conclusion, rice straw might be a potential substrate for bioethanol production by yeast fermentation.
Degradation and glucose production from wood chips of white pine (Pinus strobus) and tulip tree (Liriodendron tulipifera) by several white rot fungi were investigated. The highest weight losses from 4 g of wood chips of P. strobus and L. tulipifera by the fungal degradation on yeast extract-malt extract-glucose agar medium were 38% of Irpex lacteus and 93.7% of Trametes versicolor MrP 1 after 90 days, respectively. When 4 g of wood chips of P. strobus and L. tulipifera biodegraded for 30 days were treated with cellulase, glucose was recovered at the highest values of 106 mg/g degraded wood by I. lacteus and 450 mg/g degraded wood by T. versicolor. The weight loss of 10 g of wood chip of L. tulipifera by T. versicolor on the nutrient non-added agar under the nonsterile conditions was 35% during 7 weeks of incubation, and the cumulative amount of glucose produced during this period was 239 mg without cellulase treatment. The activities of ligninolytic enzymes (lignin peroxidase, manganese peroxidase, and laccase) of fungi tested did not show a high correlation with degradation of the wood chips and subsequent glucose formation. These results suggest that the selection of proper wood species and fungal strain and optimization of glucose recovery are all necessary for the fungal pretreatment of woody biomass as a carbon substrate.
Park, Wan-Soo;Koo, Young-Jo;Shin, Dong-Hwa;Min, Byung-Yong
Korean Journal of Food Science and Technology
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v.15
no.1
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pp.56-61
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1983
Direct production of biomass from starch using amylolytic yeast, Sporobolomyces holsaticus FRI Y-5 was studied with varying the ratios between carbon and other nutrient sources in the medium. It was investigated under condition of constant C/P and C/S ratio to influence the initial concentration of starch $(S_o)$ and C/N ratio on its growth which is described as the specific growth rate $({\mu})$, cell yield (Y), the maximum concentration of cell $(X_m)$, and productivity (P). They were very dependent on both $S_o$ and C/N ratio. The form of the relationship between and ${\mu}$ and $S_o$ was observed to be similar to saturation kinetics at C/N = 100 but presented substrate inhibition at other C/N ratios. As $S_o$ was changed from 22.5 to 90 g/l, Y was observed to vary with C/N ratios but seemed to decrease as a wholes. $X_m$ was linearly related to $S_o$ at more than C/N = 50 but at less than C/N = 10 substrate inhibition was presented. P increased suddenly to $S_o$ = 45 g/l and then changed decreasingly at less than C/N = 50, but at more than C/N = 100 it changed increasingly. The effect of C/P ratio and C/S ratio on the yeast growth was also investigated at constant $S_o$ and C/N ratio. ${\mu}$ was dependent on C/P and C/S ratios, but Y, independent on them. But $X_m$ was reliant upon C/P ratio but not upon C/S ratio.
Several kinds of organic acids, alcohols, aromatic compounds and sugars as carbon sources were tested in order to produce the cell mass of Rhizopus oryzae which is used in part of food processing or organic acid fermentation. Sodium acetate among them was good enough for carbon source as well as glucose under the concentration of one percent. All nitrogenous substances tested such as ammonium, nitrate or organic nitrogen compounds were well used by this strain of Rhizopus oryzae as nitrogen source. Ammonium sulfate among inorganic nitrogen compounds was most utilized as a nitrogen source in glucose or acetate medium. This strain did not require any growth factors such as yeast extract. The following composition of medium was therefore determined in order to produce the cell mass of Rhizopus oryzae: Na-acetate 1 %, (NH$_4$)$_2$SO$_4$ 0.2%, $K_2$HPO$_4$ 0.05%, MgSO$_4$.7$H_2O$ 0.01%, NaCl 0.01% (PH 5.5). The cell wall of mycelium grown in above medium was lysed optimally at pH 6.5 and 5$0^{\circ}C$ by the action of Strepzyme 115-5. On producing protoplast from mycelium by enzymatic action, almost all of the mycelium was damaged after 4hrs of treatment.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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