• 한국동물학회지
• /
• 제20권1호
• /
• pp.9-18
• /
• 1977

RNA 분해효소에 저항하는 RNA 분자들이 양서류의 난에 존재하는지의 여부를 조사하기 전에 필요한 몇가지 예비실험을 하기 위하여 Xenopus laevis에 난에서 RNA를 추출 하였다. Sephadex G-100 column chromatography는 세 개의 peak을 항상 보여주고 있다. 첫째 peak에 포함되어있는 고분자량의 RNA만을 $^{3}H$-dimethyl sulfate를 사용하여 시험관내에서 label하여 tRNA로부터의 base paired oligonucleotide의 참여를 배제하였다. 이 방법으로 아주 높은 specific activity를 얻을 수 있었으며 또한 부착된 methyl group은 대단히 안정성을 보였다.

• 한국수정란이식학회:학술대회논문집
• /
• 한국수정란이식학회 2006년도 The 6th Intermational Symposium on Developmental Biotechnology
• /
• pp.4-4
• /
• 2006

• 한국동물학회지
• /
• 제27권3호
• /
• pp.127-136
• /
• 1984

Xenopus 수정란을 중력에 대해 새로운 방향으로 기울이거나 연속회전시키는 일련의 방법을 통하여 배/복측 극성 (dorsal/ventral polarity) 형성에 관계되는 다음과 같은 사실을 알게 되었다. (1) 수정 후 난을 $15^\\circ, 30^\\circ, 45^\\circ 및 60^\\circ$ 각도로 기울인 채 발생시키면 원구배순부는 보통중력의 반대쪽에 형성되었으며, $15^\\circ에서 60^\\circ$로 기울이는 각도를 증가시킬수록 변경되는 율도 증가하였다. (2) 자외선을 조사한 수정란을 제 1 분열전 $15^\\circ, 30^\\circ, 45^\\circ, 60^\\circ$등의 각도를 유지한 상태에서 발생시킨 결과 자외선에 의한 축형성의 발생결함이 회복되었으며 이때 기울이는 각도가 클수록 그 회복율도 증가하였다. (3) 여러 속도의 정속회전대 (clinostat)상에서 수정란을 발생시킬 경우 비교적 저속인 $0.45 \\sim 9.0$ rph에서는 원구배순부의 형성 장소가 난의 회전방향에 의존하였으나, $40 \\sim 360$ rph에서는 무작위한 방향으로 나타났다. 한편 정속회전대를 경험한 embryo는 대부분 정상적인 발생을 보였으나 축형성상의 결함을 보이는 개체도 아울러 관찰되었다. 이상과 같은 결과들을 배/복측 극성 결정기작과 연관지어 논의하였다.

• 한국동물학회지
• /
• 제33권3호
• /
• pp.365-372
• /
• 1990

Transgenic 양서류를 만들기 위한 연구의 일환으로 bacterial $\beta$-galactosidase 유전자를 cytopalsmic actin promoter에 연결시킨 plasmid를 xenopus 수정란에 미세주입하여 외부 DNA의 발현을 조사하였다. $\beta$-gal DNA를 20nl당 1ng에서 2ng의 농도로 미세주입하는 경우, 이 농도는 배발생에 크게 영향을 미치지 않는 것으로 나타났다. 또한 유전자 산물인 $\beta$-galactosidase는 양서류의 모든 배엽성 세포에서 발현 가능하고, 정상적인 활성을 나타내므로 외부 DNA의 발현여부를 in situ 상태에서 판명할 수 있었다. 주입된 외부 DNA는 낭배기 시기에 최초로 발현되고, 적어도 올챙이 시기까지 유지 및 발현 가능하며, 초기 발생동안 extrachromosomal 상태에서 발현되는 것으로 나타났다. 그러나 발현의 정도는 주입된 개체는 물론 매 실험마다 차이를 보였고, 또한 기질인 X-Gal에 반응하는 부위가 전체 배에 분포하는 겅우는 거의 없으며, 일정 부위에 한정되어 있음이 관찰되었다. 이는 세포막을 통해서 DNA가 다른 할구로 이동하지 못하는 사실에 비추어 미세주입된 DNA가 난할시 각 할구로 균등하게 분포되지 못하고 국부적으로 나뉘어 들어가기 때문인 것으로 사료된다.

• 한국동물학회지
• /
• 제27권2호
• /
• pp.93-102
• /
• 1984

Xenopus laevis의 수정란의 한천층을 cysteine용액으로 용해시킨후 다시 예리한 forceps으로 vitelline membrane을 제거하였다. 막을 제거한 수정란을 제1분열이 일어나기 직전 미래의 복측 (vental side)부분을 중력에 대하여 반대방향인 위쪽으로 향하게 하거나 또는 중력에 마주 대하도록 아랫쪽으로 배열하였다. 그후 tailbud 시기까지 발생시켜 2중체축 (double axis) 형성률을 조사하였다. 그 결과 수정란을 동물 반구가 위로 향하는 자연상태와 다르도록 배열하는 것은 2중체축 형성에 큰 요인으로 작용하지 못하였고 오히려 수정란의 외형을 유지시키는 물리적 구조(편평형 또는 구형)가 더 큰 요인임이 밝혀졌다. 이와같은 관찰은 무미양서류 수정란의 극성 결정 메카니즘과 배의 제1차 유도작용을 연구하는데 좋은 자료를 제고하여 준다.

• 한국동물학회지
• /
• 제31권1호
• /
• pp.29-34
• /
• 1988

초기 발생과정에 있어서 핵과 세포질이 상호작용을 조사하기 위하여 양서류 한 종의 핵을 이조의 무핵 수정란에 치환하였다. Rana속에 속하는 R.dybowskii,R.nigromaculata,R.pipiens등의 이종간 잡종의 개체의 경우 낭배초기를 전후하여 발생이 중지되며,Rana,Xenopus그리고 Axolotl의 속간 핵치환에서는 후기포배기에 발생이 중지되는 양상을 보인다. 이때 각 핵-세포질 조합의 발생수행능력을 비교하면 계통발생상의 유연관계가 먼 종일수록 초기에 발생이 중지되는 결과를 나타냈다. 일반적으로양서류 종간 핵치환 결과는 후기 포배까지는 정상발생양상을 보이고 있다. 이와같은 잡종개체가 초기에 발생수행능력의 제한을 받는 요인은 두가지로 생각할 수 있는데, 치환된 핵에 비가역적 변화가 일어났을 가능성과 핵과 세포질간의 기능적 비양립성이 그것으로 현재로서는 후작 좀 더 가능성 있는 요인으로 사료된다.