Purpose: The purpose of this study was to evaluate the bone regeneration capacity of silk fibroin (SF) when combined with beta tricalcium phosphate (${\beta}$-tricalcium phosphate [TCP]) and rh-bone morphogenetic protein (BMP) in vivo by micro-computed tomography (CT), soft x-ray, and histological analysis. Methods: A total of 56 critical size defects formed by a trephine bur made on 28 adult female Spague-Dawley rats were used for this study and the defect size was 5.0 mm in diameter. The defects were transplanted with (1) no graft material (raw defect), (2) autogenous bone, (3) SF ($10{\mu}g$), (4) SF-BMP ($10{\mu}g$, $0.8{\mu}g$ each), and (5) SF+${\beta}$-TCP ($10{\mu}g$). At 4 and 8 weeks after operation, the experimental animals were sacrificed. Samples were evaluated with soft x-ray, histological examinations and 3-dimensional micro-CT analysis. Results: In the 3-dimensional micro-CT evaluation, bone volume and bone surface data were higher in the SF-BMP ($12.8{\pm}1.5$, $138.6{\pm}45.0$ each) (P<0.05) and SF-TCP ($12.3{\pm}1.5$, $144.9{\pm}30.9$ each) group than in the SF group ($6.1{\pm}3.3$, $77.2{\pm}37.3$ each) (P<0.05), except for the autogenous group ($15.0{\pm}3.0$, $190.7{\pm}41.4$ each) at 4 weeks. At 8 weeks, SF-BMP ($16.8{\pm}3.5$, $173.9{\pm}34.2$ each) still revealed higher (P<0.05) bone volum and surface, but SF-TCP ($11.3{\pm}1.5$, $1132.9{\pm}52.1$ each) (P=0.5, P=0.2) revealed the same or lower amount compared with the SF group ($13.8{\pm}2.7$, $127.5{\pm}44.8$ each). The % of bone area determined by radiodensity was higher in the SF-TCP ($31.4{\pm}9.1%$) and SF-BMP ($36.2{\pm}16.2%$) groups than in the SF ($19.0{\pm}10.4$) group at the period of 4 weeks. Also, in the histological evaluation, the SF-BMP group revealed lower inflammation reaction, lower foreign body reaction and higher bone healing than the SF group at postoperative 4 weeks and 8 weeks. The SF-TCP group revealed lower inflammation at 4 weeks, but accordingly, as the TCP membrane was absorbed, inflammatory and foreign body reaction are increased at 8 weeks. Conclusion: The current study provides evidence that the silk fibrin can be used as an effective grafted material for tissue engineering bone generation through a combination of growth factor or surface treatment.
Background: Micro computed tomography (CT) is rapidly developing as an imaging tool, especially for mice, which have become the experimental animal of choice for many pulmonary disease studies. We evaluated the usefulness of micro CT for evaluating lung fibrosis in the murine model of bleomycin-induced lung inflammation and fibrosis. Methods: The control mice (n=10) were treated with saline. The murine model of lung fibrosis (n=60) was established by administering bleomycin intra-tracheally. Among the 70 mice, only 20 mice had successful imaging analyses. We analyzed the micro CT and pathological findings and examined the correlation between imaging scoring in micro CT and histological scoring of pulmonary inflammation or fibrosis. Results: The control group showed normal findings on micro CT. The abnormal findings on micro CT performed at 3 weeks after the administration of bleomycin were ground-glass opacity (GGO) and consolidation. At 6 weeks after bleomycin administration, micro CT showed various patterns such as GGO, consolidation, bronchiectasis, small nodules, and reticular opacity. GGO (r=0.84) and consolidation (r=0.69) on micro CT were significantly correlated with histological scoring that reflected pulmonary inflammation (p<0.05). In addition, bronchiectasis (r=0.63) and reticular opacity (r=0.83) on micro CT shown at 6 weeks after bleomycin administration correlated with histological scoring that reflected lung fibrosis (p<0.05). Conclusion: These results suggest that micro CT findings from a murine model of bleomycin-induced lung fibrosis reflect pathologic findings, and micro CT may be useful for predicting bleomycin-induced lung inflammation and fibrosis in mice.
Metal foams have a cellular structure consisting of a solid metal containing a large volume fraction of pores. In particular, open, penetrating pores are necessary for industrial applications such as in high temperature filters and as a support for catalysts. In this study, Fe foam with above 90% porosity and 2 millimeter pore size was successfully fabricated by a slurry coating process and the pore properties were characterized. The Fe and $Fe_2O_3$ powder mixing ratios were controlled to produce Fe foams with different pore size and porosity. First, the slurry was prepared by uniform mixing with powders, distilled water and polyvinyl alcohol(PVA). After slurry coating on the polyurethane(PU) foam, the sample was dried at $80^{\circ}C$. The PVA and PU foams were then removed by heating at $700^{\circ}C$ for 3 hours. The debinded samples were subsequently sintered at $1250^{\circ}C$ with a holding time of 3 hours under hydrogen atmosphere. The three dimensional geometries of the obtained Fe foams with an open cell structure were investigated using X-ray micro CT(computed tomography) as well as the pore morphology, size and phase. The coated amount of slurry on the PU foam were increased with $Fe_2O_3$ mixing powder ratio but the shrinkage and porosity of Fe foams were decreased with $Fe_2O_3$ mixing powder ratio.
Yun, Young Jin;Kim, Han-Jun;Lee, Deok-Won;Um, Sewook;Chun, Heung Jae
Journal of Industrial and Engineering Chemistry
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제67권
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pp.244-254
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2018
Surface modified poly ${\text\tiny{L}}$-lactic acid (PLLA) samples with hydroxyapatite (HA), heparin and bone morphogenetic protein-2 (BMP-2) mediated by polydopamine (pDA) coating (PLLA/pDA/HA/Hep/BMP-2) were prepared, and their effects on the enhancements of bone formation and osseointegration were evaluated in vitro and in vivo as compared to PLLA, PLLA/pDA/HA, and PLLA/pDA/Hep/BMP-2. The changes in surface chemical compositions, morphologies and wettabilities were observed by X-ray photoelectron spectroscopy (XPS), field-emission scanning electron microscopy (FE-SEM), atomic force microscopy (AFM) and water contact angle measurements. Pre-coating of HA particles with pDA provided uniform and homogeneous anchoring of particles to PLLA surface. In addition, the strong ionic interaction between heparin and pDA led PLLA surface readily heparinized for loading of BMP-2. In vitro experiments revealed that the levels of alkaline phosphatase (ALP) activity, calcium deposition, and osteocalcin (OCN) gene expression were higher in MG-63 human osteosarcoma cell lines grown on PLLA/pDA/HA/Hep/BMP-2 than on control PLLA, PLLA/pDA/HA, and PLLA/pDA/Hep/BMP-2. In vivo studies using micro-computed tomography (micro-CT) also showed that PLLA/pDA/HA/Hep/BMP-2 screw exhibited greatest value of bone volume (BV) and bone volume/tissue volume (BV/TV) among samples. Histological evaluations with H&E and Von Kossa staining demonstrated that a combination of HA and BMP-2 contributed to the strong osseointegration.
Hyunpil Yoon;Bo Hyun Jung;Ki-Yeon Yoo;Jong-Bin Lee;Heung-Sik Um;Beom-Seok Chang;Jae-Kwan Lee
Journal of Periodontal and Implant Science
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제53권4호
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pp.248-258
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2023
Purpose: This study aimed to characterize the early stages of periodontal disease and determine the optimal period for its evaluation in a mouse model. The association between the duration of ligation and its effect on the dentogingival area in mice was evaluated using micro-computed tomography (CT) and histological analysis. Methods: Ninety mice were allocated to an untreated control group or a ligation group in which periodontitis was induced by a 6-0 silk ligation around the left second maxillary molar. Mice were sacrificed at 1, 2, 3, 4, 5, 8, 11, and 14 days after ligature placement. Alveolar bone destruction was evaluated using micro-CT. Histological analysis was performed to assess the immune-inflammatory processes in the periodontal tissue. Results: No significant difference in alveolar bone loss was found compared to the control group until day 3 after ligature placement, and a gradual increase in alveolar bone loss was observed from 4 to 8 days following ligature placement. No significant between-group differences were observed after 8 days. The histological analysis demonstrated that the inflammatory response was evident from day 4. Conclusions: Our findings in a mouse model provide experimental evidence that ligature-induced periodontitis models offer a consistent progression of disease with marginal attachment down-growth, inflammatory infiltration, and alveolar bone loss.
Emmanuel Joao Nogueira Leal da Silva;Sara Gomes de Moura;Carolina Oliveira de Lima;Ana Flavia Almeida Barbosa;Waleska Florentino Misael;Mariane Floriano Lopes Santos Lacerda;Luciana Moura Sassone
Restorative Dentistry and Endodontics
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제46권2호
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pp.16.1-16.11
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2021
Objectives: The aim of this study was to evaluate the shaping ability of the TruShape and Reciproc Blue systems and the apical extrusion of debris after root canal instrumentation. The ProTaper Universal system was used as a reference for comparison. Materials and Methods: Thirty-three mandibular premolars with a single canal were scanned using micro-computed tomography and were matched into 3 groups (n = 11) according to the instrumentation system: TruShape, Reciproc Blue and ProTaper Universal. The teeth were accessed and mounted in an apparatus with agarose gel, which simulated apical resistance provided by the periapical tissue and enabled the collection of apically extruded debris. During root canal preparation, 2.5% sodium hypochlorite was used as an irrigant. The samples were scanned again after instrumentation. The percentage of unprepared area, removed dentin, and volume of apically extruded debris were analyzed. The data were analyzed using 1-way analysis of variance and the Tukey test for multiple comparisons at a 5% significance level. Results: No significant differences in the percentage of unprepared area were observed among the systems (p > 0.05). ProTaper Universal presented a higher percentage of dentin removal than the TruShape and Reciproc Blue systems (p < 0.05). The systems produced similar volumes of apically extruded debris (p > 0.05). Conclusions: All systems caused apically extruded debris, without any significant differences among them. TruShape, Reciproc Blue, and ProTaper Universal presented similar percentages of unprepared area after root canal instrumentation; however, ProTaper Universal was associated with higher dentin removal than the other systems.
본 연구는 실시간 동적영상(Real-time dynamic image)을 획득할 수 있는 고해상도 엑스선 영상장치인 마이크로 CT 을 이용하여 흰쥐의 미세 혈관구조를 관찰함은 물론 국내 원광 방사선영상 과학연구 센터에서 개발한 마이크로 CT 에 대한 유용성을 알아보고자 한다. 흰쥐 몸 전체의 2D 영상을 얻은 후 MIP(maximum intensity projection), VRT(volume rendering technique)기법을 이용하여 혈관구조의 조영된 3D 영상을 얻을 수 있었고 이 3D 혈관 영상을 머리, 복부, 심장과 몸 전체의 혈관시스템으로 각각 분류하였다.
Kim, Seong-Gon;Jeong, Jae-Hwan;Che, Xiangguo;Park, Yong-Tae;Lee, Sang-Woon;Jung, Eun-Sun;Choe, Senyon;Choi, Je-Yong
BMB Reports
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제46권6호
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pp.328-333
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2013
Many bioactive molecules like recombinant human bone morphogenetic protein 2 (rhBMP-2) have been developed for mineralized bone grafts, for which proper scaffolds are necessary to successfully apply the bioactive molecules. In this study, we tested the osteogenic efficacy of rhBMP-2 produced in-house in combination with gelatin sponge as the scaffold carrier in a rabbit radial defect model. The efficacy of the rhBMP-2 was determined by alkaline phosphatase activity assay of C2C12 cells. Two groups of ten rabbits each were treated with rhBMP-2/gelatin sponge, or gelatin sponge only. At 4 weeks, rhBMP-2/gelatin sponge grafts showed more bone regeneration than gelatin sponge grafts, as determined by X-ray radiography, micro-computed tomography, and histological analyses. At 8 weeks, rhBMP-2/gelatin sponge grafts exerted much stronger osteogenic effects. The study demonstrates the improved osteogenic efficacy of the rhBMP-2/gelatin sponge grafts in a rabbit radial bone defect model acting as a bone-inductive material.
Although most researchers agree that platelet-rich plasma (PRP) is a good source of autogenous growth factors, its effect on bone regeneration is still controversial. The purpose of this study was to evaluate whether increasing angiogenic factors in the human PRP to enhance new bone formation through rapid angiogenesis. MATERIAL AND METHODS. In vitro, the human platelets were activated with application of shear stress, $20\;{\mu}g/ml$ collagen, 2 mM $CaCl_2$ and 10U thrombin/$1\;{\times}\;10^9$ platelets. Level of vascular endothelial growth factor (VEGF) and platelet microparticle (PMP) in the activated platelets were checked. In the animal study, human angiogenic factors-enriched PRP was tested in 28 athymic rat's cranial critical bone defects with $\beta$-TCP. Angiogenesis and osteogenesis were evaluated by laser Doppler perfusion imaging, histology, dual energy X-ray densinometry, and micro-computed tomography. RESULTS. In vitro, this human angiogenic factors-enriched PRP resulted in better cellular proliferation and osteogenic differentiation. In vivo, increasing angiogenic potential of the PRP showed significantly higher blood perfusion around the defect and enhanced new bone formation around acellular bone graft material. CONCLUSION. Angiogenic factor-enriched PRP leads to faster and more extensive new bone formation in the critical size bone defect. The results implicate that rapid angiogenesis in the initial healing period by PRP could be supposed as a way to overcome short term effect of the rapid angiogenesis.
Karina Ines Medina Carita Tavares ;Jader Camilo Pinto ;Airton Oliveira Santos-Junior ;Fernanda Ferrari Esteves Torres ;Juliane Maria Guerreiro-Tanomaru ;Mario Tanomaru-Filho
Restorative Dentistry and Endodontics
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제46권4호
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pp.56.1-56.11
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2021
Objectives: This study evaluated 2 nickel-titanium rotary systems and a complementary protocol with an ultrasonic tip and a small-diameter instrument in flattened root canals. Materials and Methods: Thirty-two human maxillary second premolars with flattened canals (buccolingual diameter ≥4 times larger than the mesiodistal diameter) at 9 mm from the radiographic apex were selected. The root canals were prepared by ProDesign Logic (PDL) 30/0.01 and 30/0.05 or Hyflex EDM (HEDM) 10/0.05 and 25/0.08 (n = 16), followed by application of the Flatsonic ultrasonic tip in the cervical and middle thirds and a PDL 25/0.03 file in the apical third (FPDL). The teeth were scanned using micro-computed tomography before and after the procedures. The percentage of volume increase, debris, and uninstrumented surface area were analyzed using the Kruskal-Wallis, Dunn, Wilcoxon, analysis of variance/Tukey, and paired and unpaired t-tests (α = 0.05). Results: No significant difference was found in the volume increase and uninstrumented surface area between PDL and HEDM (p > 0.05). PDL had a higher percentage of debris than HEDM in the middle and apical thirds (p < 0.05). The FPDL protocol resulted in less debris and uninstrumented surface area for PDL and HEDM (p < 0.05). This protocol, with HEDM, reduced debris in the middle and apical thirds and uninstrumented surface area in the apical third (p < 0.05). Conclusions: High percentages of debris and uninstrumented surface area were observed after preparation of flattened root canals. The HEDM, Flatsonic tip, and 25/0.03 instrument protocol enhanced cleaning in flattened root canals.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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