Immunohistochemical study on the intestinal tissues obtained from the 21 pigs of the 14 terms in Korea in which the clinical and epidemiological features had indicated the possible outbreaks of porcine epidemic diarrhea(PED) was performed using the indirect immunofluorescence test and/or the immunoperoxidase method in order to detect PED viral antigens in the infected cells of the intestines, and histopathological features were described as well. By immunohistochemical analysis, PED viral antigens were detected in the epithelial cells covering the small intestinal villi and recognized slightly in the cells lining the colonic surface epithelium as well. Occasional fluorescence was also seen in a few intestinal crypt epithelium. On light microscopy, the piglets with PED showed marked villous atrophy and fusion, and severe enterocyte degeneration and desquamation. On the other hand, the older pigs more than 4 week old age was mild villous atrophy and fusion, severe villous epithelial cell proliferation, and moderate mononuclear cell infiltration.
The low feed intake immediately after weaning is responsible for villous atrophy and reduced growth rate in newly-weaned pigs. Overcoming this drawback will produce beneficial results for swine producers, and this warrants an understanding of the factors affecting the feed intake in newly-weaned pigs. In fact, a plethora of factors exert influences on feed intake in newly-weaned pigs, and these factors encompass health status, creep feeding, weaning age, mixing of litters, environment, dietary nutrient level and balance, palatability of ingredients, forms of diet presentation, water supply and quality, and stockmanship. Due to the complexity of the factors that affect the feed intake of weaned pigs, a comprehensive approach should be adopted to overcome the low feed intake problem right after weaning. It warrants mention that it is almost impossible to completely restore the feed intake just after weaning to pre-weaning level in terms of energy intake through dietary means which are available for being practiced economically and/or technically in current swine production. However, a refined dietary regime will certainly alleviate the low feed intake problem in the immediate postweaning period.
The intestinal histopathology and in situ postures of Gymnophalloides seoi (Digenea: Gymnophallidae) were studied using C3H/HeN and C57BL/6 mice as experimental hosts; the effects of immunosuppression were also observed. The metacercariae isolated from naturally infected oysters, 300 or 1,000 in number, were infected orally to each mouse, and the mice were killed at days 3-21 post-infection (PI). In immunocompetent (IC) mice, only a small number of flukes were found in the mucosa of the duodenum and jejunum during days 3-7 PI, with their large oral suckers pinching and sucking the root of villi. The intestinal mucosa showed mild villous atrophy crypt hyperplasia, and inflammations in the villous stroma and crypt, with remarkable goblet cell hyperplasia. These mucosal changes were almost restored after days 14-21 PI. In immunosuppressed (IS) mice. displacement as well as complete loss of villi adjacent to the flukes was frequently encountered, otherwise the histopathology was generally mild, with minimal goblet cell hyperplasia. In these mice, numerous flukes were found, and it seemed that they were actively moving and rotating in situ. Several flukes were found to have invaded into the submucosa, almost facing the serosa. These results indicate that in IC mice the intestinal histopathology caused by G. seoi is generally mild, and the flukes do not penetrate beyond the mucosa, however, in IS mice. the flukes can cause severe destruction of neighboring villi. and some of them invade into the submucosa.
From April 2014 to September 2015, 153 piglets from 52 farms in Jeju were diagnosed with porcine epidemic diarrhea (PED). The major PED cases were focused on suckling piglets (144 piglets, 94.1%), particularly in 1-7-day-old piglets. Histopathologically, severe villous atrophy was observed in the small intestine, especially in the jejunum and ileum. The mean villous height to crypt depth ratios of the jejunum and ileum were 1.4:1 and 1.5:1, respectively. The major histopathologic findings of the small intestine were cytoplasmic vacuolation, cuboidalization, squamation, and exfoliation of the mucosal enterocytes in the villi. The cytoplasmic vacuolations in the enterocytes were the most prevalent lesions in the small intestine and were more severe in the ileum than in the jejunum. According to immunohistochemistry methods, the PED virus (PEDV) antigens were presented in the cytoplasms of the enterocytes, and were distributed more prevalently in the ileum than in the jejunum. PEDV antigens were also detected in the colon of 26 piglets (19.5%). Sequence comparison and phylogenetic analysis indicated that 12 PEDV had more than a 98.9% homology with each other. These PEDV strains were highly homologous with the genogroup 2 North American group.
인체 기생 장흡충류의 하나인 호르텐스극구흠충(Echinostoma hortense)의 병원성을 알아 보기 위하여 흰쥐에 퍼낭유충을 실험 감염시킨 후 경시적으로 숙주의 장병변을 관찰하였다. 피낭유충은 실험적으로 감염시킨 올챙이에서 분리한 것을 사용하였고 Sprague-Dawley계 흰쥐 18마리에 각각 200개씩 감염시킨 후 1일, 3일, 7일, 11일, 22일 및 44일에 3마리씩 희생시키고 위 유문으로부터 1cm, 3cm, 5cm, 8cm 및 30cm 부위에서 각각 장 절편을 채취하여 병리 조직학적 관찰을 시 행하였다. 관찰 결과 충체는 감염 1∼3일에는 융모 사이 (infervillous space)에서, 감염 7일부터 44일까지는 주로 내강(lumen)에서 발견되었고 구흡반 및 복흡반으로 융모를 흡입(sucking, 파괴하고 있는 것이 관찰되었다. 장 조직의 병변은 융모 위축(villous atrophy)과 선와 증식 (crypt hyperplasia)이 특징적 소견이었다. 융모의 변화는 끝(tip)의 둔화, 유착, 소실 등이었고 융모1선와 높이의 비율 이 3 : 1에서 1 : 1까지 감소되었다. 기질의 변화로는 염증 세포의 침윤, 충혈, 부종, 섬유화 등이 관 찰되었다. 배세포는 감염 11일 경부터 점차 증가하는 소견을 보였다. 전체적으로 장 병변은 소장 상 부에서 카장 심하였고 감염 1∼3일부터 관찰되기 시작하였으며 감염기간의 경과에 따라 점차 심화 되었다. 이상의 결과를 종합할 때 호르텐스극구흡충에 감염된 횐쥐의 장 병변은 점막층에 국한되어 있으나 융모의 위축 및 파괴가 매우 심하며 감염 44일까지도 병변이 지속되고 있음을 알 수 있었다. Key worths: Echinostoma hortense, rat intestinal pathology, villous atrophy, crypt hyperplasia로 출아묘는 이앙기간이 단축되므로 중묘보다는 다소 늦게 파종하고 이앙기는 중묘 적기에 하는 냉해의 우려도 없어 좋을 것으로 생각된다. 6. 간장은 중묘보다 어린모 이앙재배에서 3∼4cm 기었는데 이는 천식이 되어 초기생육이 왕성하므로 과번무 되었기 때문으로 생각되며 지나친 천식은 태풍 등으로 도복의 위험성이 있다. 7. 수량성은 조식재배의 경우 어린모는 중묘와 비슷한 경향이며 직파재배 보다 다소 증수되었다.질소함량은 경장, 건물중, 근류수 및 근류중들과, 그리고 줄기중의 allantoin 질소함량은 근류수 및 근류중들과 각각 유의적인 정의 상관관계를 나타내었다. 희미해졌으며 담배는 500 $\mu$ E m$^{-2}$ sec$^{-1}$에서 인삼은 1000 $\mu$ E m$^{-2}$ sec$^{-1}$에서 47KD이었다.50일영이상)에서 35.3% 및 유추(30 일영미만)에서 17.3%의 순이었다. 이중 세균성 및 기생충성 질병은 육성계에서의 검색률이 가장 높았으나, 바이러스성 질병은 육성계 및 성계에서 거의 같은 비율로 높았으며 곰팡이성 질병은 유추에서 가장 높은 검색률을 나타내었다.17) 사료비절감은 생산비의 60∼70%를 차지하고 있으므로 공동구인 자가배합을 하여 자기실정에 맞는 경영체질로 운영하고 있었다. (18) 인건비가 생산비의 15∼20%의 비율이며 또한 사람 구득난이라 가족노동을 최대한 활용, 관리를 하고 있으며 생력화를 위해 기계화, 자동화되어 가고 있었다. 애정과 정성심있는 관리로 닭을 스트레스를 주지 않게 하기 위해 가족관이, 기계자동화가 중요한 역할을 하고 있었다. (19) 시설기구와 육성상각비를 줄이기 위해 관리자의 변동이 없고, 종신직장으로서 긍지와 자부심을 가지고 늑무하고 있었다.
Twelve colostrum-deprived piglets were inoculated oral1y with porcine epidemic diarrhea virus isolated from Korea. The piglets were euthanatized from at 12 hour postinoculation(PI) at 6-hour intervals. At 24 to 36 hours PI, all infected piglets showed severe yellowish to watery diarrhea, dehydration, depression, and anorexia. At necropsy, the intestinal wall looked thin, mesenteric vessels congested, and mesenteric lymph nodes edematous. The histological findings showed marked villous atrophy and fusion, severe degeneration of enterocytes and monomuclear cell infiltration in the lamina propria. On electron microscopy, villous epithelial cells of infected jejunum contained viral particles at 18 hour PI. The viral particles were pleomorphic spheres with a mean diameter of 95∼180nm including 18nm projections.
The purpose of this study was to evaluate the effect of a subsequent infection of PCV2 on piglets with PEDV. In clinical signs, the signs observed in dual-infected with PEDV and PCV2 piglets and alone infected with PEDV piglets ranged from diarrhoea to vomiting and dehydration. Dual-infected piglets developed signs of anorexia, vomiting and watery diarrhoea within 12 hpi. Nevertheless alone -infected piglets caused pasty diarrhea at first. In mortality, dual infections showed 25%, but alone -infections showed 8.3%, respectively. In gross findings, piglets dual-infected with PEDV and PCV2 appeared the severe findings of congestion, distension of lumen, milder curdes of undigested milk in stomach than those of single-infected piglets. In histopathological findings, piglets of dual-infection group appeared the more severe findings of villous atrophy and fusion, congesion, exfoliation, vacuolation, squamation, loss of cilia and proliferation of crypt. Significant (P<0.05) decrease in VH:CD ratio in dually infected piglets compared to piglets from alone-PEDV infections. In immunohistochemical findings, strong hybridization signals in dual-infected piglets observed moderate to severe villous atrophy or vacuolation with positive cells arranged continuously over the villi. In the lumen, exfoliated enterocytes were strongly positive in dual-infected piglets. A number of PEDV-positive cells in dual-infected pigs were significantly higher than that in alone PEDV-infected piglets.
Fibricela seoulensis에 감염된 마우스나 흰쥐 소장에는 점막 융모(villi)의 단축, 융합, 둔 화 등 퇴행성 변화와 상피층 결손, 위축 등이 초래되며, 선와(crypts)는 증식되는 소견을 보인다. 이러한 병변이 충체를 구충한 후에는 어떻게 치유되는가를 관찰하고자 이 연구를 시행하였다. 즉 흰쥐에 1,000개 씩의 피낭유충을 감염시키고 15일 후에 프라지콴텐을 10 mg/kg씩 투여하여 구충한 다 음 투약 후 1, 3, 5, 7, 15, 21및 28일에 각각 도살하고 조직절편을 만들어 병변을 관찰하였다. 정상 대조군의 소장에는 손가락 모양의 가늘고 긴 융모가 일정하게 배열되어 있었고, 기질에는 병변이 없었다. 융모/선와(V/C) 높이의 비율은 2 : 1∼3 : 1이었다. 감염 대조군은 심한 융모의 융합, 둔단화, 상피층의 결손, 위축, 기질층의 염증, 부종 등 융모 위축과 선와 증식 소견을 보였다. 프라지관텔 투여 후 1일과 3일에는 감염 대조군과 비슷한 정도로 융모의 병변이 보였으나 5일에는 기질층의 변화가 없었고 일부 융모가 회복되기 시작하였고 7일w15일 사이에는 대부분의 점막에서 융모가 정상화되어 가는 소견을 보였다. 구충 3주 후에는 완전히 회복되었다. 이상의 결과는 계. seoulensis 감염에 의해 형성된 소장 점막의 병변이 구충제로 성충을 제거한 후 약 3주 이내에 완전히 정상적인 융모의 모습으로 치유될 수 있음을 나타내었다.
The morphologic changes of small intestinal epithelium in pigs diagnosed as porcine epidemic diarrhea(PED} by virus isolation and immunohistochemistry were studied through light microscope and transmissible electron microscope. On semi-thin section, the histologic findings showed severe villous atrophy and fusion with hyperplasia of cuboidal epithelium in the villi, inflammatory cell infiltration in lamina propria, and increased mitotic figures in the crypt. The structural changes were mostly restricted to the cytoplasm of affected absorptive epithelium of villi. 3 types of epithelial changes were found; degenerated virus-affected cells, undifferentiated cuboidal cells, and normal columnar cells. On electron microscopy, round to spherical viral particles of 50∼l00nm in diameter were found within the dilated vesicles and endoplasmic reticulums of degenerated cells, which had decreased their cytoplasmic electron density due to dilated and missing organelles(e.g. mitochondria, ERs, etc.). Microvilli were shortened and sparse, leaving denuded terminal web of the villous epithelial cells. Fat globules were often found within slightly degenerated enterocytes. On the tip of villi, severely damaged cells were exfoliated and replaced by undifferentiated cuboidal cells We found distinct ultrastructural changes in the jejunal epithelium confirming PED virus infection is involved in malabsorptive diarrhea.
As a novel approach for disease control and prevention, nutritional modulation of the intestinal health has been proved. However, It is still unknown whether branched-chain amino acid (BCAA) is needed to maintain intestinal immune-related function. The objective of this study was to determine whether BCAA supplementation in protein restricted diet affects growth performance, intestinal barrier function and modulates post-weaning gut disorders. One hundred and eight weaned piglets ($7.96{\pm}0.26kg$) were randomly fed one of the three diets including a control diet (21% crude protein [CP], CON), a protein restricted diet (17% CP, PR) and a BCAA diet (BCAA supplementation in the PR diet) for 14 d. The growth performance, plasma amino acid concentrations, small intestinal morphology and intestinal immunoglobulins were tested. First, average daily gain (ADG) (p<0.05) and average daily feed intake (ADFI) (p<0.05) of weaned pigs in PR group were lower, while gain:feed ratio was lower than the CON group (p<0.05). Compared with PR group, BCAA group improved ADG (p<0.05), ADFI (p<0.05) and feed:gain ratio (p<0.05) of piglets. The growth performance data between CON and BCAA groups was not different (p>0.05). The PR and BCAA treatments had a higher (p<0.05) plasma concentration of methionine and threonine than the CON treatment. The level of some essential and functional amino acids (such as arginine, phenylalanine, histidine, glutamine etc.) in plasma of the PR group was lower (p<0.05) than that of the CON group. Compared with CON group, BCAA supplementation significantly increased BCAA concentrations (p<0.01) and decreased urea concentration (p<0.01) in pig plasma indicating that the efficiency of dietary nitrogen utilization was increased. Compared with CON group, the small intestine of piglets fed PR diet showed villous atrophy, increasing of intra-epithelial lymphocytes (IELs) number (p<0.05) and declining of the immunoglobulin concentration, including jejunal immunoglobulin A (IgA) (p = 0.04), secreted IgA (sIgA) (p = 0.03) and immunoglobulin M (p = 0.08), and ileal IgA (p = 0.01) and immunoglobulin G (p = 0.08). The BCAA supplementation increased villous height in the duodenum (p<0.01), reversed the trend of an increasing IELs number. Notably, BCAA supplementation increased levels of jejunal and ileal immunoglobulin mentioned above. In conclusion, BCAA supplementation to protein restricted diet improved intestinal immune defense function by protecting villous morphology and by increasing levels of intestinal immunoglobulins in weaned piglets. Our finding has the important implication that BCAA may be used to reduce the negative effects of a protein restricted diet on growth performance and intestinal immunity in weaned piglets.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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