Dynamic modification of cytoplasmic and nuclear proteins by O-linked N-acetylglucosamine (O-GlcNAc) on Ser and Thr residues is ubiquitous in higher eukaryotes. And this modification may serve as a signaling mod-ification analogous to protein phosphorylation. Addition and cleavage of O-GlcNAc are catalyzed by O-linked GlcNAc transferase (OGT) and O-linked N-acety1glucosaminidase (O-GlcNAcase), respectively. Two types of human O-GlcNAcase gene were cloned and expressed as three fusion proteins in Escherichia coli. O-GlcNA-case activity showed in the order of thioredoxin fusion> $6{\times}His$ tag> GST fusion. O-GlcNAcase had enzy-matic activity against only ${\rho}$NP-GlcNAc of seven tested substrate analogs. Blast search revealed that O-GlcNAcase has two conserved domains, amino terminal hyaluronidase-like domain and carboxy terminal N-acetyltransferase domain. Extensive deletion studies were done to define catalytically important domains. The deletions of hyaluronidase-like domain and N-acetyltransferase domain abolished enzyme activity. But, N-ter-minal 55 amino acid deletion and C-terminal truncation showed lower activity. Based on deletion analysis, we suggest that hyaluronidase-like domain is essential for enzyme activity and carboxy terminal N-acetyltrans-ferase domain may be modulatory function.
Much care should be taken when electric caps are used in blast site than when non-electric initiation systems are used. This is because electric caps can cause premature firing or misfires if stray currents of high magnitude flow into the blasting circuit. If the rock has higher electrical conductivity or lower electrical resistivity, such risks will be increased because the rock will provide more passages for the stray currents to flow into the blasting circuit. In this study, several rock samples obtained at a blast site were tested for electrical resistivity to decide whether electric caps could be used or not in the site. The measured electrical resistivity was $39{\sim}47{\Omega}{\cdot}m$ for the rock samples that had a higher content of metal sulfides. Contrary, the resistivity was $15000{\sim}21000{\Omega}{\cdot}m$ for ordinary rocks. Especially, in the case of the rock of electric resistivity of $39{\Omega}{\cdot}m$, only 2-V electric potential enables a stray current to flow through the rock of 1-m length, which can cause the premature firing of a detonator whose initiation current is 0.4 A. This result shows that electric initiation system should not be used in the site because rocks containing much amount of metal sulfides are widely distributed there.
The present study was conducted to investigate different gene expression profile between treated poMSTNpro and non-treated in rainbow trout and to identify those genes that are specifically or predominantly expressed in treated poMSTNpro by employing annealing control primer (ACP)-based GeneFishing polymerase chain reaction (PCR). We isolated total RNAs in muscle tissues from the treated poMSTNpro fish by immersion bath technique with fish myostatin prodomain (Paralichthys olivaceus, poMSTNpro) for one month and the other was non-treated poMSTNpro, and synthesized cDNA using annealing control primers (ACP, Seegene, Korea). Using 20 different ACPs for PCR, were cloned sequenced, and analyzed identities of 2 differentially expressed genes (DEGs). According to BLAST analysis, sequences of 2 clones significantly matched database entries and confirmed by semi-quantitative RT-PCR. The functional roles of one up-regulated gene, cytochrome P450 mono-oxygenases 2K1v2 (CYP2K1v2), and one down-regulated gene was Profilin-1 were identified. We identified distinctive gene expression profiles in improved rainbow trout growth by treatment with a fish myostatin prodomain using ACP-based GeneFishing.
Park, Chung Youl;Park, Jungan;Lee, Boo-Ja;Bak, Sangmin;Lee, Hong-Kyu;Kim, Jeong-Sun;Yoon, Youngnam;Suh, Sang Jae;Lee, Su-Heon
Research in Plant Disease
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v.22
no.1
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pp.59-63
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2016
A new poty-like virus was isolated from plants of winter daphne (Daphne odora) that showed virus-like symptoms on leaves, from four regions of Korea during 2014. Filamentous-shaped particles were observed by transmission electron microscopy of preparations extracted from symptomatic leaves and examined by the direct negative stain method. RT-PCR assay showed that three samples were positive for both Cucumber mosaic virus and potyvirus, and only one sample was positive for potyvirus only. A BLAST comparison to partial sequences from helper-component proteinase, cylindrical inclusion and coat protein genes detected the highest nucleotide identity of 76%, 72%, and 72% with Daphne mosaic virus, respectively, levels below the potyvirus species discrimination threshold. The new potyvirus was isolated using indicator plants (Chenopodium amaranticolor), in which local lesions were produced. In this study, we identified a novel potyvirus from winter daphne, which we have named Daphne mottle virus (DapMoV).
Several extracellular protease-producing bacteria were isolated from Chungkookjang, a traditional Korean food of fermented soybeans, on skim milk agar plates. Among these bacteria, strain D14 exhibited the highest production (15.2 U/mL) and specific activity (40.0 U/mg protein) of extracellular protease activity as assessed on growth in a protease induction medium composed of 1% (w/v) soluble starch, 1.5% (w/v) skim milk, 0.5% (w/v) yeast extract, and 2% (w/v) NaCl. The bacterium was identified as Bacillus subtilis based on morphological and physiological characteristics and 16S rDNA sequence. A BLAST search of 16S rDNA sequences revealed that the isolate was most closely related to Bacillus subtilis subsp. subtilis strain NCIB 3610. The 16S rDNA sequence homology was 99.9%. Our isolate produced the highest level of protease when grown in a protease induction medium containing 1% (w/v) sorbitol and 0.5% (w/v) yeast extract. Fructose and glucose reduced enzyme production to 12.7% and 35.9%, respectively, of the level seen when the strain was grown in medium containing soluble starch. Soytone also reduced enzyme production to 61.4% of the level noted when the strain was grown in medium containing yeast extract.
Hearing loss is a common congenital disorder that is frequently associated with mutations in the Cx26 gene (GJB2). Recently, the mutation analysis of GJB2 has been used in a newborn screening test for the detection of hearing impairment. Population-based studies should be performed before the application of genetic testing for the identification of deaf newborns. In this study, 8 positions of GJB2 mutations-including 35delG, 167delT, 235delC, V27I, V37I, M34T, E114G, and I203T-were analyzed using PCR-direct sequencing in a total of 437 healthy Korean neonates. DNAs from dried blood spots were extracted using a commercial DNA extraction kit. The PCR-amplified products (783 bps) of the GJB2 gene were detected using 2% agarose gel electrophoresis and subjected to direct sequencing. The sequences were compared with those in the GenBank database by using the BLAST program. In this study, 5 GJB2 mutations -including V27I (79G>A), V37I (109G>A), E114G (341A>G), I203T (608T>C), and 235delC- were found. Of the 437 neonate samples, 301 subjects showed GJB2 mutations (68.9%, 301/437). The V27I mutation was found in 271 subjects and was the most frequent (62.0%, 271/437). The E114G, I203T and V37I mutations were shown in 146, 17 and 14 subjects, respectively. The 235delC mutation was found in 1 subject. The E114G mutation was frequently accompanied by the V27I mutation. V27I/E114G (97.2%, 143/147) was the most common double mutation and 3 subjects had the double mutation V27I/I203T. A triple mutation, V27I/E114G/I203T, was found in 1 subject. In conclusion, PCR-direct sequencing is a convenient tool for the rapid detection of GJB2 mutations and this data might provide information for the genetic counseling of the GJB2 gene.
We carried out high-resolution(FWHM=3' .3) HI 21 cm observations of the supernova remnant(SNR) PKS0607+17 and HII region S261 using Arecibo 305-m telescope. The observation was to investigate whether the high-velocity(HV) gas detected in the southern area of PKS0607+17 by Koo & Heiles(1991) is physically associated with the SNR or not. The velocity of the HV gas ranges from +64 km/s to +87 km/s, which is difficult to result from the Galactic rotation. The HV gas could be the gas accelerated by supernova blast wave. However, because the observation of Koo and Heiles(1991) was carried out using Hat Creek radio telescope(FWHM $\simeq$ 36'), the association of the HV gas with the SNR could not be investigated. Using the Arecibo HI 21cm data, we have found that the HV gas appears m the southern part of the SNR and its velocity ranges from +61 km/s to +77 km/s. But the HV gas is scattered m the whole field, not only toward PKS0607+17 but also outside the SNR Accordingly the HV gas is probably not associated with the SNR, but is accidentally aligned along the same line of sight toward the SNR. Instead we have found that HI clouds at low velocities could be possibly associated with the SNR. In Arecibo HI 21cm channel maps the HI gas seems to surround the southern boundary of the SNR at $V_{LSR}$ = +19.6 ~ +40.2 km/s. But because the region of the Arecibo HI 21cm observation is not wide enough to examine the HI gas distribution, we investigated this area using the Berkely low-latitude HI survey data(Weaver & Williams 1974) too. There we found HI gas surrounding the radio continuum boundary of PKS0607+17 at $V_{LSR}$ = +21.6 ~ +258 km/s. It is possible that this HI gas is associated with the SNR, in which case, the velocity of the SNR $V_o$$\simeq$ +26 km/s, its distance d $\simeq$ 12.5 kpc and its radius R $\simeq$ 145 pc. If we assume that the expansion velocity is ~10 km/s, then the age of the SNR is $\sim4.4\times10^6$ years. PKS0607+17 could be one of the oldest SNRs in the Galaxy. We also studied HI propertities of the HII region S261, which is $\sim1^{\circ}$ away from PKS0607+17. There has been no high-resolution m 21 cm observational study on S261. We discovered HI cloud located at the north-eastern part of S261 at $V_{LSR}$ = +5 km/s ~ +10 km/s, which is possibly associated with the HII region. The central velocity of the HI cloud $V_{LSR}$ = +7.2 km/s and the corresponding distance d = 1.5 kpc. This velocity is comparable to the radio recombination line velocities.
Journal of Korean Tunnelling and Underground Space Association
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v.5
no.3
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pp.251-260
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2003
Tunnel blasting has been performed with V-cut to investigate the characteristics. Blasting vibrations were measured at two directions, the proceed direction and side direction. Propagation characteristics were determined by regression analysis; square root scaled distance and cube root scaled distance with maximum charge per delay of the blast. Testing result, The cross point was 62m in the allowable vibration velocity of 3mm/sec and 46m in 5mm/sec. Also, vibration level with measuring point was highest and decayed fastest, adapting to cube root scaled distance, for the proceed direction on ground.
Journal of the Korea Institute of Building Construction
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v.11
no.6
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pp.547-556
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2011
The primary factors affecting concrete sulfate resistance are the chemical composition of the Portland cement, and the chemistry and quantity of mineral admixtures. To investigate the effect of those on the sulfate attack, the testing program involved several different mortar mixes using the standardized test, ASTM C1012. Four different cements were evaluated, including one Type I cement, two Type I-II cements, and one Type V cement. Mortar mixes were also made with mineral admixtures, as each cement was combined with three different types of mineral admixtures. One Class F fly ash, one Class C fly ash, and one ground granulated blast furnace slag (GGBFS) were added in various percent volumetric replacement levels. Expansion measurements were taken and investigated with the expansion criteria recommended by ASTM.
Thunberg fritillary (Fritillaria thunbergii), a perennial used in traditional Chinese herbal medicine, is a members of the family Liliaceae. The degeneration of germplasm is a severe problem in the production of Fritillaria thunbergii var. chekiangensis. However, no information about viral infections of F. thunbergii var. chekiangensis has been reported. In this study, we sequenced the small RNAs of F. thunbergii var. chekiangensis from leaves and bulbs, and viruses were identified using a phylogenetic analysis and BLAST search for sequence. In addition, multiplex reverse transcriptase-polymerase chain reaction (RT-PCR) was used to rapidly detect viruses in this variety. Our study first reported that five viruses infected F. thunbergii var. chekiangensis. Among them, fritillary virus Y (FVY), lily mottle virus (LMoV), Thunberg fritillary mosaic virus (TFMV), and hop yellow virus (HYV) had been reported in F. thunbergii, while apple stem grooving virus was first reported in the genus Fritillaria. A multiplex RT-PCR method was developed to rapidly test the four viruses FVY, LMoV, TFMV, and HYV in F. thunbergii var. chekiangensis. Our results provide a better understanding of the infection of F. thunbergii var. chekiangensis by viruses and a basic reference for the better design of suitable control measures.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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