Metabonomic analysis has been recognized as a powerful approach for characterizing metabolic changes in biofluids due to toxicity, disease process or environmental influences. To investigate the possibility of relating metabolic changes with $^{1}H-NMR$ spectra, urine samples from Sprague-Dawley rats treated with various dietary restrictions or toxic substances (nicotine) were analysed using $^{1}H-NMR$ spectroscopy and pattern recognition techniques. Dietary restrictions-given to male rats were normal diet and high fat diet and fasting. The nicotine urine samples were collected from SD rats administered with nicotine (25 mg/kg) at the various time intervals. $^{1}H-NMR$ spectra of all urine samples were acquired at 400 MHz on a VARIAN spectrometer. To establish the presence of any intrinsic class-related patterns or clusters in each NMR data, methods of PCA (principal component analysis) and soft independent modeling of class analogy (SIMCA) analysis were used, and the results from these analyses were compared to each other. In all cases of dietary conditions and nicotine treatment, SIMCA analysis gave better results for the discrimination of NMR spectra of urine samples than PCA.
Headspace solid phase micro-extraction gas chromatography/flame ionization detection (HS-SPME-GC/FID) method was compared with headspace gas chromatography/mass selective detection (HS-GC/MS). Organic solvent-spiked urine as well as urine samples from workspace was analyzed under optimal condition of each method. Detection limit of each compound by HS-SPME-GC/FID was $3.4-9.5{\mu}g/L$, which enabled trace analysis of organic solvents in urine. Linear range of each organic solvent was $10-400{\mu}g/L$, with fair correlation coefficient between 0.992 and 0.999. The detection sensitivity was 4 times better than HS-GC/MS in selected ion monitoring (SIM) mode. Accuracy and precision was confirmed using commercial reference material, with accuracy around 90% and precision less than 4.6% of coefficient of variance. Among 48 urine samples from workplace, toluene was detected from 45 samples in the range of $20-324{\mu}g/L$, but no other solvents were found. As a method for trace analysis, SPME HS GC/FID showed high sensitivity for biological monitoring of organic solvent in urine.
Constituents of animal biofluids such as milk, blood and urine contain information specifically related to metabolic and health status of the ruminant animals. Some changes in composition of biofluids can be attributed to disease response of the animals. Mastitis is a major problem for the global dairy industry and causes substantial economic losses from decreasing milk production and reducing milk quality. The purpose of this study was to investigate potential of NIRS combined with multivariate analysis for cow's mastitis diagnosis based on NIR spectra of milk, blood and urine. A total of 112 bulk milk, urine and blood samples from 4 Holstein cows were analyzed. The milk samples were collected from morning milking. The urine samples were collected before morning milking and stored at -35$^{\circ}C$ until spectral analysis. The blood samples were collected before morning milking using a catheter inserted into the carotid vein. Heparin was added to blood samples to prevent coagulation. All milk samples were analyzed for somatic cell count (SCC). The SCC content in milk was used as indicator of mastitis and as quantitative parameter for respective urine and blood samples collected at same time. NIR spectra of blood and milk samples were obtained by InfraAlyzer 500 spectrophotometer, using a transflectance mode. NIR spectra of urine samples were obtained by NIR System 6500 spectrophotometer, using 1 mm sample thickness. All samples were divided into calibration set and test set. Class variable was assigned for each sample as follow: healthy (class 1) and mastitic (class 2), based on milk SCC content. SIMCA was implemented to create models of the respective classes based on NIR spectra of milk, blood or urine. For the calibration set of samples, SIMCA models (model for samples from healthy cows and model for samples from mastitic cows), correctly classified from 97.33 to 98.67% of milk samples, from 97.33 to 98.61% of urine samples and from 96.00 to 94.67% of blood samples. From samples in the test set, the percent of correctly classified samples varied from 70.27 to 89.19, depending mainly on spectral data pretreatment. The best results for all data sets were obtained when first derivative spectral data pretreatment was used. The incorrect classified samples were 5 from milk samples,5 and 4 from urine and blood samples, respectively. The analysis of changes in the loading of first PC factor for group of samples from healthy cows and group of samples from mastitic cows showed, that separation between classes was indirect and based on influence of mastitis on the milk, blood and urine components. Results from the present investigation showed that the changes that occur when a cow gets mastitis influence her milk, urine and blood spectra in a specific way. SIMCA allowed extraction of available spectral information from the milk, urine and blood spectra connected with mastitis. The obtained results could be used for development of a new method for mastitis detection.
Eom, Jun Sik;Kim, Eun Tae;Kim, Hyun Sang;Choi, You Young;Lee, Shin Ja;Lee, Sang Suk;Kim, Seon Ho;Lee, Sung Sill
Animal Bioscience
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제34권12호
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pp.1930-1939
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2021
Objective: The aim of the study was to conduct metabolic profiling of dairy cattle serum and urine using proton nuclear magnetic resonance (1H-NMR) spectroscopy and to compare the results obtained with those of other dairy cattle herds worldwide so as to provide a basic dataset to facilitate research on metabolites in serum and urine. Methods: Six dairy cattle were used in this study; all animals were fed the same diet, which was composed of total mixed ration; the fed amounts were based on voluntary intake. Blood from the jugular neck vein of each steer was collected at the same time using a separate serum tube. Urine samples were collected by hand sweeping the perineum. The metabolites were determined by 1H-NMR spectroscopy, and the obtained data were statistically analyzed by performing principal component analysis, partial least squares-discriminant analysis, variable importance in projection scores, and metabolic pathway data using Metaboanalyst 4.0. Results: The total number of metabolites in the serum and urine was measured to be 115 and 193, respectively, of which 47 and 81, respectively were quantified. Lactate (classified as an organic acid) and urea (classified as an aliphatic acylic compound) exhibited the highest concentrations in serum and urine, respectively. Some metabolites that have been associated with diseases such as ketosis, bovine respiratory disease, and metritis, and metabolites associated with heat stress were also found in the serum and urine samples. Conclusion: The metabolites measured in the serum and urine could potentially be used to detect diseases and heat stress in dairy cattle. The results could also be useful for metabolomic research on the serum and urine of ruminants in Korea.
This study was conducted to evaluate the personal effects of tobacco smoke and environmental tobacco smoke(ETS) by measuring the concentration of nicotine and cotinine in the urine. While 129 urine samples were being collected, Personal characteristics such as sex, age, number of years since a Person has been a smoker, average consumption number of cigarettes per day, and number of smoker in family were also surveyed. Collected urine samples were used for analysis of nicotine and cotinine by GC/NPD after Passing the extrelut column. In the urine of the smoker, the average contents of nicotine and cotinine were 5.38$\mu\textrm{g}$/ml and 3.14 $\mu\textrm{g}$/ml, respectively. The average contents of nicotine and cotinine were 0.18$\mu\textrm{g}$/ml and 0.07$\mu\textrm{g}$/ml in the urine of male non-smoker, respectively. The contents of nicotine and cotinine in the non-smoker's urine were dependent on sex and age. On the other hand, the contents of nicotine and cotinine in smoker's urine were dependent on average consumption amount of cigarettes per day. Also, there was a direct relation between nicotine levels in the smoker's urine and the average consumption number of cigarettes Per day of smoker. The Possible sources of nicotine and cotinine in the non-smoker's urine seemed to be caused by food, beverage and En, Our results indicate that the number of smoker in family had no effect on increasing nicotine and cotinine contents in the urine of non-smoker.
뇨당 측정 시스템은 소변 속의 글루코오스 농도를 측정함으로서 당뇨 수치를 모니터링하는 비침습적인 당뇨병 자가 진단 장치이다. 본 논문에서는 기존의 침습형 혈당측정방법의 불편성과 비색계를 이용한 뇨당 검사법의 단점을 보완한 뇨당 측정시스템을 설계하였다. 뇨당 측정시스템은 뇨당 측정용 화학센서, 신호검출부, 디지털 제어 및 신호분석부, 디스플레이부 및 전원부로 구성된다. 뇨당측정용 센서로는 재현성이 뛰어나고 다루기가 간편하며 저렴한 가격으로 대량 생산할 수, 있는 일회용 뇨당측정용 전류화학센서를 개발하였다. 설계한 뇨당 측정시스템의 성능을 평가하기 위하여 사람의 소변에 임의의 농도의 글루코오스 성분을 섞은 용액에 대하여 글루코오스 성분 분석시 사용되는 표준장비와의 비교분석을 통해서 글루코오스 농도 검출에 대한 신뢰성 평가를 수행하였다. 회귀분석에 기초한 신뢰성 평가를 수행한 결과 표준오차는 2.85282로 나타났다. 또한, 화학센서를 사용해서 측정하는 시스템을 평가 시 중요한 파라미터인 S.D(Standard Deviation)는 10%로서 임상적으로 유효한 15% 범주 내에 있음을 확인하였고, C.V(Coefficient of Validation)값은 ,5%이내이므로 혈당센서의 기준으로 평가해 볼때 만족하는 결과를 보였다.
Objective: In this study, metabolites that changed in the rumen fluid, urine and feces of dairy cows fed different feed ratios were investigated. Methods: Eight Holstein cows were used in this study. Rumen fluid, urine, and feces were collected from the normal concentrate diet (NCD) (Italian ryegrass 80%: concentrate 20% in the total feed) and high concentrate diet (HCD) groups (20%: 80%) of dairy cows. Metabolite analysis was performed using proton nuclear magnetic resonance (NMR) identification, and statistical analysis was performed using Chenomx NMR software 8.4 and Metaboanalyst 4.0. Results: The two groups of rumen fluid and urine samples were separated, and samples from the same group were aggregated together. On the other hand, the feces samples were not separated and showed similar tendencies between the two groups. In total, 160, 177, and 188 metabolites were identified in the rumen fluid, urine, and feces, respectively. The differential metabolites with low and high concentrations were 15 and 49, 14 and 16, and 2 and 2 in the rumen fluid, urine, and feces samples, in the NCD group. Conclusion: As HCD is related to rumen microbial changes, research on different metabolites such as glucuronate, acetylsalicylate, histidine, and O-Acetylcarnitine, which are related to bacterial degradation and metabolism, will need to be carried out in future studies along with microbial analysis. In urine, the identified metabolites, such as gallate, syringate, and vanillate can provide insight into microbial, metabolic, and feed parameters that cause changes depending on the feed rate. Additionally, it is thought that they can be used as potential biomarkers for further research on subacute ruminal acidosis.
This study assesses the sodium intake of adults by 24-hour urine analysis, dietary records review and a food intake questionnaire. Subjects were 236 adult female in Daegu. The results are summarized as follows: Sodium intake as indicated by the 24-hour urine analysis was $5,805.4\;{\pm}\;3836.8\;mg$. This was significantly higher than intake indicated by dietary records ($4415.4\;{\pm}\;1935.1\;mg$) and the dish frequency questionnaire (DFQ 55) ($4293.5\;{\pm}\;1526.5\;mg$). The results of the 24-hour urine analysis and DFQ 55 showed that sodium intake was higher for the 65-to-74-year-old age group than for other age groups (p < 0.05, p < 0.05). Review of dietary records to examine typical sodium intake by food groups showed that 53.7% of the sodium consumed by subjects in all age groups came from seasonings and spices ($2399.0\;{\pm}\;1526.5\;mg$). The analysis of sodium intake by food groups using DFQ 55 showed 34.2% of their sodium came from consumption of kimchi (p < 0.001) and kimch, soup, stew and fish jorim accounted for 57.8% of total sodium intake. The results indicate positive correlation between age and sodium intake, as shown by the 24-hour urine analysis and food intake questionnaire (p < 0.05). Therefore, these results would be valuable as basic data for planning nutrition education for sodium intake reduction.
The main cause of cervical cancer is a persistent infection with high-risk human papillomavirus (HR-HPV). Cervical cancer is reported as a preventable cancer in more than 80% of cases with early diagnosis and appropriate treatment. Papanicolaou test (Pap test) has been a global strategy to prevent cervical cancer, and recently, HPV test has been reported to be effective against cervical cancer and precancerous lesions. However, pelvic examinations give patients anxiety, discomfort, pain, distress, and psychological stress. HPV test via a urine sample caused less physical and psychological stress and more advantage than the Pap test. Therefore, it is necessary to study the usefulness of the HPV test for easy-to-collect urine samples. A total of 220 samples were collected from a pair of cervical and urine samples from 110 women and only 108 pairs of samples out of 110 were used because 2 cases were not amplified by β-globin. Among 108 pairs of cervical and urine samples, the prevalence of HPV was 37.0% (40/108) in cervical samples, 34.3% (37/108) in urine samples and HR-HPV was 22.2% (24/108) in cervical samples, 18.5% (20/108) in urine samples. In this study, urine samples showed a lower positive rate of HPV than cervical samples. There were many variables that could affect the condition of the urine sample. However, the HR-HPV agreement rate of the cervix and urine samples was 94.44% and the Kappa value was 0.823, which was "almost perfect". Through these results showed the significance of cervical cancer screening using a urine sample. Cervical screening is crucial, as cervical cancer can be prevented in more than 90% of cases. Urine samples collected by non-invasive methods may have the potential advantage of increasing acceptance of cervical cancer screening. Therefore, it is necessary to develop a new cervical cancer screening strategy using urine samples through further study based on the results of this study.
A sensitive spectrophotofluorometric method was developed for the analysis of 2[[3-(trifluoromethyl)phenyl]amino]-3-phridine carboxylic acid (I) in urine. The method is based on the fluoroscence behavior of the I-aluminum complex in absolute ethanol. This fluorophore has activation and emission wavelengths of 355 and 450 nm, respectively. Optimum conditions for the reaction were investigated. The fluorescence was linear in the range of 0.25 3.0 ug of I/ml. Replicate studies of spiked urine samples, each containing 2.5 ug of I/ml showed good precision with a relative standard deviation of 0.019. Overall recovery percent from five spiked urine samples was 99.4 $\pm$1.32%.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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