Bikiwhan is one of the oriental medicines that have been used for the treatment of tumors since ancient times. However, the mechanism of the drug action is not closely surved. This study was made to investigate the effects of Bikiwhan on the innate immunity were analysed by measuring the functions of phagocytes, and those of specific immunity were analysed by measuring T and B cells activities. The followings are the results obtained from this study : 1. Bikiwhan has direct cytotoxic effects against human lymphoma cell lines (K562) in a dose dependent manner. 2. An administration of Bikiwhan increased allogenic immune response in the mouse. 3. An administration of Bikiwhan increased the antibodies formation against SRBC. 4. An administration of Bikiwhan enhanced the apperance of rosette forming cells in the spleen. 5. An administration of Bikiwhan decreased the delayed-type hypersensitivity against dinitrofluorobenzene. 6. An administration of Bikiwhan has no effect on natural killer cells. 7. Bikiwhan increased the phagocyte activity of peritoneal macrophages in vitro and in in vivo as well. 8. Bikiwhan depressed the formation of reactive oxygen intermediated in vitro and in vivo as well. 9. Bikiwhan has the capacity to make peritoneal macrophages secrete nitric oxide. The above results demonstrate that Bikiwhan has enhancing effects of immune responses against tumors by decreasing tissue demages caused by immune responses.
인체 중간엽 줄기세포는 다양한 세포로의 분화 및 자가증식 할 수 있는 능력뿐만 아니라 질병치료에 대한 치료적 잠재력을 가지고 있다. 줄기세포 분화의 분자 기작에 대한 이해는 줄기세포 이식의 치료 효능을 향상시킨다. 본 연구에는 인체 중간엽 줄기세포의 골분화에서 NFAT5의 역할을 밝혔다. 특이적 siRNA의 transfection으로 인한 NFAT5의 억제는 인체 중간엽 줄기세포의 골분화를 현저히 감소시켰으며, NF-${\kappa}B$ promoter 활성화 또한 세포의 증식이나 지방 세포로의 분화에 영향 없이 감소 시켰다. NFAT5의 발현 억제는 기본적으로 유도되는 NF-${\kappa}B$의 활성화와 TNF-${\alpha}$에 의해서 유도되는 NF-${\kappa}B$의 활성화를 감소시켰으나, TNF-${\alpha}$에 의해서 유도되는 NF-${\kappa}B$의 분해에는 아무런 영향을 주지 않았다. 이번 연구를 통해 NFAT5가 NF-${\kappa}B$ 경로를 조절함으로써 인체 중간엽 줄기 세포의 골분화에 아주 중요한 역할을 하는 것을 확인 할 수 있었다.
Journal of the Korean Association of Oral and Maxillofacial Surgeons
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제34권5호
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pp.525-531
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2008
CDH-13(T-cadherin), which is one of a kind among the 20 cadherins, can be found mainly in wall of aorta, neuron, spleen, blood vessel etc. It is also called H-cadherin. This structural difference can explain that CDH-13 is thought to play a key role in maintaining mutual relation between extra and intra-cellular environment rather than in cell adhesion. The main function of CDH-13 is to participate in blood vessel function. Additionally, it is known to regulate cell growth and cell contact inhibition. When cells are proliferating, cell surface perceives other cells so that substance such as CDH-13 can inhibit their growth or proliferation resulting in homeostasis without endless proliferation or invasion of connective tissue boundaries. However, tumor cell itself appears to be different from normal cells' growth, invasion or transmission. Therefore, it can be diagnosed that these characteristics are closely related to expression of CDH-13 in tumor cells. This study is to investigate expression of CDH-13 in SCC and its correlation with promoter methylation. 20 of tissue species for the study are excised and gathered from 20 patients who are diagnosed as SCC in department of OMS, dental hospital, dankook university. To find development of CDH-13 in each tissue samples, immunohistochemical staining, RT-PCR gene analysis and methylation specific PCR are processed. The results are as follows. 1.Immunohistochemical staining: In normal oral squamous epithelial tissue, strong expression of CDH-13 was found in cell plasma membrane of basal cell layer. On the other hand, in case of low-differentiated oral SCC, development of CDH-13 was hardly seen. 2.The development of CDH-13 gene: In 9 of samples, expression of CDH-13 gene could be seen and 2 of them showed low expression compared to the others. And rest of the 11 samples showed no expression of CDH-13 gene. 3.Methylation of CDH-13 gene: Among 9 samples which expressed CDH-13 gene, 7 of them showed unmethylation. In addition, among 11 samples without CDH-13 gene expression, 10 showed methylation. According to the results stated above, promoter methylation were found in 13 samples(65%) among 20 of oral SCC samples. In low-differentiated SCC, suppression of gene expression could be seen accompanying promoter methylation. These phenomenon of gene expression was proved by immunohistochemical investigation. Finally, for development of oral SCC, conclusions can be made that suppression of CDH-13 played a main role and suppression of gene expression was originated from promoter methylation. Considering this, it is expected that suppression of CDH-13 from promoter methylation to be utilized as a good diagnostic marker of oral SCC.
목 적: 본 연구에서는 in vitro 및 in vivo에서 HSV-TK 유전자 치료의 bystander 효과 및 기전을 관찰하고, 싸이토카인 유전자의 병합 치료가 bystander 효과를 증폭시킬 수 있는지 조사하여 그 결과를 향후 신경모세포종 치료에 적용하고자 본 연구를 시행하였다. 방 법: A/J 마우스 신경모세포종 모델에서, neuro-2a/TK 세포와 unmodified neuro-2a세포를 여러 비율로 혼합하여 접종한 후 GCV를 투여하여 종양의 크기 변화 및 생존 유무를 관찰하였다. 마우스 신경모 세포종에서 bystander 효과의 기전을 알아보기 위해 neuro-2a/TK 세포를 주입한 마우스의 조직을 절개하여 connexin 43, CD4+ 및 CD8+ 세포 침윤을 관찰 하였다. 10% 및 25% HSV-TK 투여 군에서 neuro-2a/IL-2 세포의 투여가 bystander 효과를 증폭시키는 지 조사하였다. 결 과 : 1) in vitro 및 in vivo에서 bystander 효과는 뚜렷하게 관찰되었다. 2) 마우스 신경모세포종의 면역 조직 화학 염색 검사에서 connexin 43 발현은 관찰되지 않았으나 많은 수의 CD4+ 및 CD8+ T 세포의 침윤이 관찰되었다. 3) 10% 및 25% HSV-TK 투여군의 마우스에서 neuro-2a/IL-2 세포의 투여는 대조군과 비교하여 종양의 성장을 더 억제 시켰다. 결 론: In vitro 및 in vivo에서 HSV-TK/GCV 유전자 치료의 bystander 효과는 뚜렷하였으며, 그 기전으로 면역 세포가 중요한 역할을 할 것으로 추측된다. 그리고 bystander 효과는 IL-2 투여에 의해 증폭됨을 확인하였다. 이는 향후 신경모세포종의 수술 후 잔존암 치료에 HSV-TK/GCV 유전자 치료가 이용 가능할 것으로 생각된다.
TRAIL은 최근 암세포의 apoptosis 유도를 위한 효율적인 도구로 제시되었으나 많은 암세포들이 TRAIL 저항성을 획득한 것으로 알려져 TRAIL 저항성 극복을 위한 새로운 방법론의 제시가 요구되어지고 있다. Genistein은 대두의 대표적인 생리활성 물질인 isoflavonoid의 일종으로 많은 암세포에서 G2/M arrest를 유발하면서 apoptosis를 유도하는 것으로 알려져 있다. 본 연구에서는 U937 인체백혈병세포를 대상으로 genistein에 의한 TRAIL 유도 apoptosis의 감수성 증대 여부를 조사하였다. 본 연구의 결과에 의하면 U937 세포에서 세포독성이 없는 범위의 genistein 처리는 TRAIL에 의한 apoptosis 유도를 매우 증진시켰으며, 이는 tBid의 발현 증가와 cFLIPL의 발현 감소와 연계된 caspase의 활성 증가와 연관성이 있었다. 또한 caspase의 활성 저해제는 genistein과 TRAIL의 복합처리에 의한 apoptosis를 유의적으로 감소시켜 복합 처리에 의한 apoptosis의 유도에 caspase의 활성 증대가 필수적임을 알 수 있었다. 따라서 genistein은 TRAIL 저항성을 획득한 암세포의 효율적인 combined therapy approach를 위해 유용하게 사용될 수 있음을 알 수 있었다.
연구배경: TRAIL 은 death 수용체(DR4, DR5)와 decoy 수용체(DcR1, DcR2)라는 독특한 수용체 시스템 덕분에 정상세포는 보호하고 종양선택적 살상능을 가진 유망한 항암제로 주목받고 있다. DR5 TRAIL 수용체는 wild-type p53 세포에서 DNA 손상항암제인 doxorubicine에 의해 발현 유도되는 p53-조절 death 수용체 유전자로 처음에 발견되었다. 폐암 조직에서 이러한 DR5와 p53 발현에 관연 연구 보고는 많지 않다. 본 연구에서 비소세포폐암 조직에서 면역조직화학적 방법을 이용하여 DR5 발현과 p53과의 상관관계를 중심으로 분석하였다. 방법: Avidin-biotinylated horseradish peroxidase complex를 이용하여 89예의 수술적 절제된 비소세포폐암 포르말린 고정조직에서 면역조직화학적 염색을 시행하였다. 1차 항체로는 anti-DR5 polyclonal antibody (Pro Sci Inc., Poway, CA)와 anti-p53 monoclonal antibody (DO-7, Novocastra, Inc, Manhasset, NY)를 이용하였다. DR5 발현에 대한 면역조직화학적 판정은 면역염색의 범위와 강도를 합산하여 다음과 같이 판정하였다; 0, non-staining; 1+, weak and diffuse(>50%) or focal (<50%) or moderate and focal; 2+, strong and focal or moderate and diffuse ; 3+, strong and diffuse. 2+ 이상을 고발현(high expression)으로 분류하였다. p53 발현 정도에 따른 p53 wild type과 mutant type의 구분은 3+의 강양성인 경우를 mutant type으로 판정하였고, 나머지 0, 1+, 2+ 발현은 wild type p53으로 판정하였다. 결과: 주변 정상폐조직에서의 DR5발현은 기관지점막에서 89%의 고발현율을 보였으나, type I, II 폐상피세포, 림프구, 평활근세포 등의 정상 세포에서는 거의 발현되지 않았다. 폐암 조직에서 DR5 고발현율은 편평상피암에서 28% (15/53), 선암에서 47% (15/32), 대세포암에서 50% (2/4)의 빈도를 보여 전반적으로 36%의 고발현율을 보였다. DR5 고발현율은 임상병기, 생존기간 등 임상 지표와 유의한 상관관계를 보여주지 못하였지만 p53 발현과는 유의한 역상관관계를 보여주었다. 결론: 비소세포폐암 조직에서 면역조직화학적 분석을 통하여 DR5 발현이 기관지점막을 제외하고는 종양 선택적임을 확인하였고 p53 발현과 유의한 역상관관계가 있음을 확인하였다. 이는 DR5가 p53 조절 유전자임을 in vivo에서 확인한 유력한 증거일 수 있다고 생각된다.
최근 수십 년 간 종양 용해성 바이러스(Oncolytic viruses; OV)는 암 치료제로서의 잠재성에 의해 광범위하게 연구되어왔다. 종양 용해성 바이러스는 두 가지의 독특한 장점을 가지고 있는데, 첫째로 암세포만을 특이적으로 감염시키고 사멸시킬 수 있다는 것이고, 두 번째로는 암이 진행되는 초기 단계에 숨어서 인식되지 않는 상태인 종양 관련 항원들을 인식하는 특정한 적응 면역을 활성화 시키는 것이다. 2015년에는 유전자 변형 종양 용해성 바이러스인 Talminogene laherparepvec (T-VEC)이 미국 식약청(FDA)의 승인을 받았으며, 현재는 다양한 종양 용해성 바이러스들이 단일로 사용되거나 기존의 암 치료 방법인 면역 치료법, 방사선 치료법, 화학 치료법과 함께 사용되어 임상 시험에서 활성이 연구되고 있다. 종양 용해성 바이러스 치료법의 효능은 항 종양 면역 활성과 항바이러스 반응의 균형이 어느 정도인가에 의해 조절되기 때문에, 획기적인 성과에도 불구하고 암 치료를 위한 종양 용해성 바이러스의 개발은 전달 방법, 바이러스를 인식하는 신체 내 항체 및 종양의 복잡성, 가변성, 반응성에 따른 항바이러스의 면역 유도와 같은 다양한 장애물을 극복하여야 하는 문제가 있다. 종양 내에 직접 종양 용해성 바이러스를 투여하는 방법은 눈에 띄는 부작용이 없이 고형 종양을 줄이는 것에 성공하였으나, 아쉽게도 뇌종양 같은 일부 종양에는 사용할 수 없고 전신 투여가 필요한 단점이 존재한다. 이러한 장애물들을 극복하기 위해서 종양 용해성 바이러스의 효능을 높이기 위한 형질 전환 유전자의 삽입 혹은 면역 조절 물질과 바이러스를 조합하는 등의 다양한 전략들이 개발되고 있다.
Sixteen specific pathogen free 4-wk-old crossbred weanling pigs were allotted into a $2{\times}2$ factorial experiment to evaluate the effects of chromium (Cr) on the immune responses after lipopolysaccharide (LPS) injection. Two factors included (1) no Cr or 400 ppb Cr supplementation from chromium picolinate (CrPic) and (2) LPS injection ($200{\mu}g/kg$ BW, intraperitoneally) on day 21 (d 21) and 35 (d 35) as compared with saline application. Plasma samples were obtained from all piglets before (0 h) and at 2 h, 4 h, 8 h, and 24 h after LPS injection. The changes in tumor necrosis $factor-{\alpha}$ ($TNF-{\alpha}$) and leukocyte populations after LPS injection were not significant on d 21. On d 35, the plasma $TNF-{\alpha}$ level was increased at h 2 postinjection, and supplemental Cr reduced the $TNF-{\alpha}$ level. The leukocyte populations had changed profoundly and lymphocyte subsets of $CD2^+$ and $CD8^+$ were reduced at 8 h postinjection. The blood granulocytes were increased and the percentage of $CD2^+$ was reduced in the Cr-fed group on d 35. Furthermore, Cr supplementation decreased the blastogensis of concanavalin A-stimulated peripheral blood mononuclear cells (PBMC) on d 21. These results suggest that 400 ppb Cr supplementation from CrPic in diets may modulate the immune responses in weanling pigs during LPS injection.
Background: Colon cancer is one of the most common cancers worldwide. Apoptosis is a necessary physiological process for cell elimination which is very important both cellular homeostasis and cell proliferation and differantiation. Dysregulation can lead to uncontrolled cell growth and tumor development. Survivin, a member of the IAP family, plays a key role in promotion of cell proliferation as well as inhibition of apoptosis in cancer cells. The aim of this study was to investigate whether specific genetic polymorphisms of survivin could be associated with colon cancer development and progression in a Turkish population. Our study is the first to our knowledge to investigate the relationship between colon cancer risk and survivin gene polymorphisms. Materials and Methods: The relation between colon cancer and survivin -31 G/C (rs9904341), -241 C/T (rs17878467) and -625 C/G (rs8073069) polymorphism in promotor site of survivin gene associated with apoptosis was investigated using the polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism (PCR-RFLP) method. Results: Individuals with -31C allele and CC genotype were found to have a higher risk of developing colon cancer (OR=13.4, p=0.01). The -241 CT genotype considerably increased the risk of colon cancer (OR=12.0, p=0.0001). However, there was no significant varaition of the survivin -625 C/G polymorphism among colon cancer patients and controls in our study. Conclusions: This study provides the first evidence that survivin -31 G/C and -241 C/T SNP significantly contribute to the risk of colon cancer in the Turkish population.
안토시아닌(anthocyanins)은 플라보노이드에 속하고 항산화 활성들을 포함한 그들의 다양한 건강 유익성에 대해 알려져 있다. 그들 중 검정콩 껍질에서 분리한 주요 안토시아닌은 glycopyranose를 함유하고 있는 배당체이다. 천식은 호염기성 세포(basophils)와 비만세포(mast cells)를 포함한 다양한 면역세포와 관련된 알레르기 관련 질병이다. 호산구(eosinophils), 호염기성 세포, 비만세포는 탈과립화에 의한 천식-특이적 보조 2(T-helper 2) 사이토카인 분비 그리고 계속해서 일어나는 증폭과 같은 염증을 일으키는 매개체의 증가를 통해 알레르기 천식(allergic asthma)에서 중요한 역할을 한다. 흰쥐 호염기성 백혈병(rat basophilic leukemia) RBL-2H3 세포는 알레르기 반응을 측정하기 위해 가장 일반적으로 사용되는 in vitro 모델이다. 본 연구에서는 검정콩 껍질 안토시아닌이 항원으로 자극한 RBL-2H3 세포에서 탈 과립 그리고 Th2 사이토카인 생산에 미치는 효과를 조사하였다. 세포 탈과립은 ${\beta}$-hexosaminidase의 방출을 검출함으로써 평가하였다. IgE-항원 복합체로 자극한 RBL-2H3 세포내 ${\beta}$-hexosaminidase 방출과 Th2 사이토카인 생산이 무처리군의 그것과 비교하여 더 높았다. 안토시아닌은 RBL-2H3 세포의 IgE-항원 복합체 유도 탈과립을 현저하게 억제시켰고 RBL-2H3 세포내 IgE-항원 복합체-매개체 interleukin(IL)-4, IL-13 그리고 TNF-${\alpha}$ 생산을 저해하였다. 이러한 결과는 검정콩 껍질 유래 안토시아닌이 알레르기 반응(allergic reaction)을 현저히 저해하는 효과가 있음을 보였고, 이들 안토시아닌이 향후 알레르기 천식을 억제하거나 개선하는데 유용한 물질로 사용될 가능성이 있을 것으로 판단되었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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