Objectives: This study was performed to investigate the effects of Semen Persicae (SP) on infarct volume, COX-2 protein expression in the middle cerebral artery occlusion (MCAo) rats. Methods: Twenty-eight rats were randomly assigned to four groups (MCAo experimental group, MCAo control group, sham experimental group, control group). The middle cerebral artery (MCA) was occluded in the MCAo group by proximal focal cerebral ischemia rat model, while the MCA was not occluded in the sham group. SP extraction was administrated for 4 days to each experimental group. Neuroprotective effects were investigated by measurement of brain damage using 2, 3, 5-triphenyltetrazolium chloride staining and analysis of COX-2 protein expression by western blotting. Results: The occurrence of infarct volume in the SP oral administration group decreased compared to the control group. COX-2 protein expression in the SP oral administration group decreased compared to the control group. Conclusions: The present study demonstrates the effect of SP in reducing infarct volume and decreasing COX-2 expression.
Objective : To elucidate the role of aquaporin-4[AQP4] in cerebral edema formation, we studied the expression and subcellular localization of AQP4 in astrocytes after focal cerebral ischemia. Methods : Cerebral ischemia were induced by permanent middle cerebral artery[MCA] occlusion in rats and estimated by the discoloration after triphenyltetrazolium chloride[TTC] immersion. Change of AQP4 expression were evaluated using western blot. Localization of AQP4 was assessed by confocal microscopy and its interaction with ${\alpha}-syntrophin$ was analyzed by immunoprecipitation. Results : After right MCA occlusion, the size of infarct and number of apoptotic cells increased with time. The ratio of GluR1/GluR2 expression also increased during ischemia. The polarized localization of AQP4 in the endfeet of astrocytes contacting with ventricles, vessels and pia mater was changed into the diffuse distribution in cytoplasm. The interactions of AQP4 and Kir with ${\alpha}-syntrophin$, an adaptor of dystrophin complex, were disrupted by cerebral ischemia. Conclusion : The deranged spatial buffering function of astrocytes due to mislocalized AQP4/Kir4.1 channel as well as increased assembly of $Ca^{2+}$ permeable AMPA receptors might contribute to the development of edema formation and the excitotoxic neuronal cell death during ischemia.
1. The yeasts in the two samples of Nuruk (mold wheat) which one prepared at the College of Agriculture, Choong-Nam University (S) and the other purchased at a market(T), were examined and counted. The yeasts were differe entiated by the market (T), were examined and counted. The yeasts were differe entiated by the TTC(2,3,5-triphenyltetrazolium chloride)agar overlay technique that yields a varied shade of color. The results were : the population of yeasts in 1g of Nuruk S was about $6{\times}10^4$, 56.5% of which were TTC-pink yeasts, 16% TTC-red pink yeasts, 8% were TTC-red yeasts, and 16.5% TTC-white yeasts. In Nuruk T(1g), the number of yeasts accounted for $14{\times}10^4$ and constituted of 42% TTC0pink, 21% TTC-red pink, 23% TTC-red and 9% TTC-white. 2. During the fermentation of Takju (Korean Sake) employing the Nuruk S and T the yeast flora throughout the brewing were observed in 12 hour intervals. TTC pink and red yeasts considered to be the major yeasts were isolated all cultured. The strains ($1{\times}10^5$/ml) were added to the mashes S and T in which pH was adjusted to 4.2 and the change of yeast flora was examined during fermentation.
Objective: This study was designed to investigate the effect of Samultang (SMT) under hippocampus cells ischemia both in vitro and in vivo. Methods: In the in vitro study, HT22 cells, predominantly detected in the cytoplasm, which coincides with the location of the mitochondria, were used as indicators. In the in vivo study, permanent middle cerebral artery occlusion (MCAO) was induced on rats. SMT was given orally 2 h before induction of permanent focal brain ischemic injury. Result: In the in vitro study, SMT had protective effects in glutamate-induced cytotoxicity, which was revealed as apoptosis characterized by chromatic condensation and the loss of mitochondrial membrane potential in HT22 cells. In the in vivo study, TTC (2,3,5-triphenyltetrazolium chloride) staining showed a marked ischemic injury in blood supply territory of the middle cerebral artery (MCA) such as the cerebral cortex and striatum. However, treatment with SMT significantly reduced infarcted volume. SMT increased marked survival of HT22 cells against glutamate-induced cytotoxicity in MTT assay. Conclusion: These results suggest that water extract of SMT provides neuroprotection against ischemic or oxidative injury by inhibition of apoptotic cell death.
Kang Se-Eun;Park Sun-Mee;Choi Jae-Suk;Ahn Dong-Hyun;Kim Young-Dae;Hong Yong-Ki
Fisheries and Aquatic Sciences
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제8권4호
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pp.243-246
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2005
The addition of seaweed extracts was found to regulate the viability of cultures of the crustose coralline alga Lithophyllum yessoense. The viability was quantitated using a triphenyltetrazolium chloride assay, and the methanol-soluble extracts from 18 prevalent seaweed species were tested. Extracts from Codium fragile and Enteromorpha linza inhibited viability, and a Hizikia fusiform is extract slightly increased viability. The methanol extract of C. fragile, which had the strongest inhibitory activity, decreased viability to 72 or $52\%$ that of the control following addition of 0.2 or 2 mg/mL of extract to the culture, respectively. The main active compound in the C. fragile was lipid. This information is a preliminary result related to the exploration of seaweed restoration in the algal whitening area.
This study evaluated neuroprotective effects of Yanggyuksanhwa-tang (YST), which have been known to be efficacy in the treatment of the stroke and diabetes. on focal cerebral ischemia of diabetic rats. On primary experiment, diabetic condition in rats was induced by streptozotocin injection, then, focal cerebral ischemia was induced by the middle cerebral artery occlusion (MCAO) under the diabetic condition. Then neuroprotective effect of YST was observed with changes of infarct size and volume, expressions of c-Fos, Bax, and hypoxia inducible factor (HIF)-1${\alpha}$ in the brain tissues by using 2% 2,3,5-triphenyltetrazolium chloride (TTC) staining and immunohistochemistry. YST treatment showed a significant decrease of infarct size and volume induced by MCAO in diabetic rats. YST treatment showed a significant decrease of c-Fos and Bax positive neurons in cortex penumbra. YST treatment showed a decrease of HIF-l${\alpha}$ positive neurons in cortex penumbra, but it was not significant statistically. These results suggest that YST has effects on neuroprotection against cerebral infarct under diabetic condition. And it is supposed that neuroprotective effect of YST reveals by anti-apoptosis mechanism.
간장국제조과정중에 생육하는 효모들을 계수 및 분리 동정하고 TTC 정색에 의하여 유발한 결과는 다음과 같다. 1. 간장국 1g 중의 효모수는 3일국에 $97{\times}10^3$, 4일국에 $135{\times}10^3$, 5일국에 $179{\times}10^3$개로서 제국일수의 경과에 따라 효모수가 증가하였다. 2. 이들 효모의 TTC 정색에 었어서 White가 53.6${\sim}$71.9%, Red가 5.6${\sim}$11.1%, Red pink가 6.8${\sim}$1905 pink가 11.1${\sim}$22.6%로서 white 효모가 가장 많았고 Red 효모가 가장 적었다. 3. 30주를 임의 분리하여 동정한 결과 Saccharomyces rouxii 5주, Saccharomyces fermentati 2주, Saccharomyces rosei 1주, Hansenula suaveolens 1주, Hansenula anomala 6주, Pichia polymorpha 6주, Debaryomyces nicotianae 2주, Debaryomyces hansenii 2주, Torulopsis candida 2주, Torulopsis sake 2주, Candida pelliculosa 1주등 6속 11종으로 동정되었다. 4. 등정한 이들 효모를 TTC 정색에 따라 유별한 결과 Hansenula suaveolens, Hansenula anomala, Candida pelliculosa, Debaryomyces nicotianae, Pichia polymorpha 등은 국중에 생육하는 전체 효모의 약 60%를 차지하는 TTC white 효모구에 속하였으며 Saccharomyces rouxii와Saccharomyces rosei는 Red 로 Saccharomyces fermentati와 Debaryomyces hansenii는 Red pink로 Torulopsis candida와 Torulopsis sake는 pink로 나타났다. 5. 분리된 효모의 대부분이 무염 또는 식염10% 합유배지에서 잘 생육하나 15-18% 식염 합유배지에서는 생육이 거이 억제되었다.
The broth microdilution technique used to measure the minimal inhibitory concentration (MIC) of natural compounds against bacteria is problematic: it is difficult to visualize bacterial growth due to the color of the natural compound. Therefore, the use of a colorimetric method with a redox indicator by broth microdilution can simplify it and increase its objectivity. This study evaluated the usefulness of the colorimetric method in measuring the MIC of Phellinus baumii against methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA). The inhibition in disc diffusion method was observed from $8,192{\mu}g/mL$ P. baumii in all 10 MRSA isolates examined; however, the MIC ranges of the 10 MRSA isolates was $512{\sim}2,048{\mu}g/mL$ by broth microdilution using a colorimetric method; with the 3-(4,5-dimethylthiazole-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) indicator. In addition, the MIC of P. baumii by broth microdilution using MTT as indicator yielded excellent results. However, the 2, 3, 5-triphenyltetrazolium chloride (TTC) results could not be determined due to the color of the TTC indicator. The MICs of four antibiotics against MRSA using MTT or TTC were equal to those determined by visual interpretation. In conclusion, to evaluate the antibacterial effects of a natural compound, the broth microdilution technique is considered to be better than the disc diffusion method. Moreover, to resolve the problems caused by the colors of natural compounds, a colorimetric method such as that using MTT may be very valuable.
Background: Cerebral blood vessels are innervated by sympathetic nerves from the superior cervical ganglion (SCG). The purpose of the present study was to evaluate the neuroprotective effect of superior cervical sympathetic ganglion block in rats subjected to permanent focal cerebral ischemia. Methods: Thirty male Sprague-Dawley rats (270-320 g) were randomly assigned to one of three groups (control, lidocaine and ropivacaine). A brain injury was induced in all rats by middle cerebral artery occlusion with a nylon thread. The animals of the local anesthetic group received $30{\mu}l$ of 2% lidocaine or 0.75% ropivacaine in the SCG. Neurologic scores were assessed 24 hours after brain injury. Brain samples were then collected. The infarct and edema ratios were measured by 2.3.5-triphenyltetrazolium chloride staining. Results: There were no differences in the death rates, neurologic scores, or infarction and edema ratios between the three groups. Conclusions: These findings suggest that superior cervical sympathetic ganglion block may not influence the brain damage induced by permanent focal cerebral ischemia in rats.
Objective : Repeated administration of mannitol in the setting of large hemispheric infarction is a controversial and poorly defined therapeutic intervention. This study was performed to examine the effects of multiple-dose mannitol on a brain edema after large hemispheric infarction. Methods : A middle cerebral artery was occluded with the rat suture model for 6 hours and reperfused in 22 rats. The rats were randomly assigned to either control (n=10) or the mannitol-treated group (n=12) in which intravenous mannitol infusions (0.8 g/kg) were performed six times every four hours. After staining a brain slice with 2,3,5-triphenyltetrazolium chloride, the weight of hemispheres, infarcted (IH) and contralateral (CH), and the IH/CH weight ratio were examined, and then hemispheric accumulation of mannitol was photometrically evaluated based on formation of NADH catalyzed by mannitol dehydrogenase. Results : Mannitol administration produced changes in body weight of $-7.6{\pm}1.1%$, increased plasma osmolality to $312{\pm}8\;mOsm/L$. It remarkably increased weight of IH ($0.77{\pm}0.06\;gm$ versus $0.68{\pm}0.03\;gm$ : p<0.01) and the IH/CH weight ratio ($1.23{\pm}0.07$ versus $1.12{\pm}0.05$ : p<0.01). The photometric absorption at 340 nm of the cerebral tissue in the mannitol-treated group was increased to $0.375{\pm}0.071$ and $0.239{\pm}0.051$ in the IH and CH, respectively from $0.167{\pm}0.082$ and $0.162{\pm}0.091$ in the IH and CH of the control group (p<0.01). Conclusion : Multiple-dose mannitol is likely to aggravate cerebral edema due to parenchymal accumulation of mannitol in the infarcted brain tissue.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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