• 한국동물위생학회지
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• 제17권1호
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• pp.32-36
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• 1994

This study was carried out to investigate antibodies against Toxoplasma gondii by Latex agglutination test from 101 slaugutered pigs and 109 cattle. In the species, 5(4.6%) out of 109 cattle and 4(4.0%) out of 101 pigs were seropositive for Toxoplasma gondii.

• Parasites, Hosts and Diseases
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• 제28권4호
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• pp.197-206
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• 1990

MDCK세포간에 형성된 tight junction이 Toxoplasma gondii이 숙주세포 침투에 미치는 영향에 대하여 고찰 하기 위해 여러 조건의 세포배양을 시행하였다. MDCK세포를 25-well배양기 내의 18-mm cover glass에 $1{\times}10^5,{\;}3{\times}10^5{\;}및{\;}5{\times}10^5$ 개로 분주한 후 배양 1, 2, 3 및 4일에 다수의 Toxoplasma를 첨가하여 1시간 동안 배양한 다음 Giemsa 용액으로 염색한 후 관찰하였을 때, 각 실험군에서 침투한 원충의 숫자는 숙주세포가 포화밀도를 이루면서 급격히 감소하였다. 배양액 내의 calcium 농도를 일반적인 1.8mM에서 $5{\;}{\mu}M$로 낮추어 포화밀도의 MDCK 세포간에 tight junction 형성을 억제하였을 때, 원충의 침투가 약 2배 증가하였으며(p<0.05) 포화밀도 이전의 배양에서는 원충의 침투가 감소하였다. Trypsin-EDTA를 처리하여 포화밀도의 배양에서 tight junction을 소화 시킨 경우, 원충의 침투가 약 2.5배 증가하였으며 (p<0.05) 포화밀도 이전의 배양에서는 급격히 감소하였다. 이상의 결과들로 볼 때, 포화밀도의 MDCK세포간에 형성된 tight junction이 Toxoplasma의 침투를 억제하는 것을 알 수 있었다. 이는 Toxoplasma가 숙주세포로 침투할 때 숙주세포의 막구조에 대한 특이성이 있음을 시사 하며, 상피세포에서는 tight junction 위의 막(apical membrane) 보다 옆 및 아래의 막(basolateral membrane)상의 구조를 이용하는 것으로 추정되었다.

• Parasites, Hosts and Diseases
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• 제25권2호
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• pp.188-194
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• 1987

돼지에 $1.5{\times}10^6$개의 Sarcocystis suicanis sporocyst와 10,000개의 Toxcplasma gondii oocyst(미국 Georgia 대학교 수의과대학 보존주)를 각각 경구감염 시킨후 9주간에 걸쳐 혈중 IgG 항체의 소장과 Sarcocystis와 Tohoplasma 사이의 혈청학적 교차반응성을 IFA 검사와 ELISA법을 이용하여 검사하였다. IFA검사와 ELISA를 위한 Sarcocystis의 전충체 항원과 수용성 항원은 감염돈의 확육을 인공소화액으로 소화시켜 준비하였다. Toxoplasma의 전충체 항원과 수용성 항원은 감염 mouse 복강에서 충체를 분리하여 사용하였다. Sarcocystis와 Togoplasma를 각각 인공감염시킨 돈혈청의 IgG 항체는 IFA검사와 ELISA에서 모두 감염 2주째에 처음으로 검출되었으며 Tcxoplasma에 대한 항체가는 감염 6주째에 최고치에 도달하였다가 그 이후에는 하강하였다. Sarcocystis에 대한 항체가는 감염 9주까지 서서히 상승하였다. Toxoplasma에 감염된 돈혈청은 Sarcocystis 항원에 대하여 IFA검사에서는 1 : 16까지 교차반응이 나타났으며 ELISA에서는 1 : 32까지 나타났다. 대조군의 돈혈청은 모두 1 : 4 이하이었다.

• 한국동물위생학회지
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• 제18권3호
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• pp.36-41
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• 1995

This study was conducted to determine the serum antibodies against toxoplasma in bovine from gyeongnam district by latex agglutination(LA) test. LA test was carried out with Toxo-MT kit(Eikon chemical co). The result obtained were summerized as follow： 1. Positive rates of toxoplasma antibodies in 1,488 bovine sera was 5.0%(75 cases) by LA test. 2. The toxoplasma antibody detection rates against 823 korean cattle and 865 dairy cattle were 1.8%(11 cases) and 7.4%(64 cases) respectively. 3. In LA test serum antibody titers in 75 positive sera were shown as 54 cases(72.0% in 1：32, 9(12.0%) in 1：64, 7(9.4%) in 1：128, 3(3.40%) in 1：256, 1(1.3%) in 512 and 1(1.3%) in 1：2,048 respectively. 4. Positive rates of toxoplasma antibodies in cattls sera from each area were 0.2∼22.0%.

• 대한수의사회지
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• 제18권4호
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• pp.52-61
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• 1982

이 논문은 우리나라에서 지금까지 응용한 바있는 Toxoplasma병의 진단에 관한 시험연구의 성적을 기술하였다. 가. 우리나라에서 1957년 돈으로부터 Toxoplasma 원충을 분류한 것이 최초의 보고였다. 나. Toxoplasma병의 사후진단을 하기 위하여 동물접종시험 (1957), 조직배양시험 (1961), Acridine orange 염색법(1974) 그리고 직접형광항체법(1974)을 이용하였다. 다. Toxoplasma병의 생전진단을 하기 위하여 보체결합조지반응시험(1965), 색소시험(1965), 적혈구응집반응시험(1972) 그리고 피내반응시험(1972)을 응용하였다. 라. 야외돈에 대한 항체보유율 조사성적은 보체결합조지반응시험(1965)에서 $13.4\%$ 적혈구응집반응시험(1972)에서 $25.3\%$ 그리고 피내반응시험(1972)에서 $5.3\%$였으며 점차적 증가하는 경향을 보이고 있다. 마. Toxoplasma병에 대한 방역대책의 일단으로서 본병의 신속 정확한 진단을 하기 위하여 가축위생연구소에서는 매년 생산하는 피내반응진단액은 동물검역소에 그리고 직접형광항체진단액은 각도 가축위생시험소에 공급하고 있다.

• Parasites, Hosts and Diseases
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• 제28권2호
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• pp.71-78
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• 1990

세포내 cAMP의 농도 변화가 Toxoplasma의 성장 및 증식에 미치는 영향을 검토하기 위하여 끽접 cAMP와 cAMP의 analogue를 첨가하거나 간접적으로 세포내 cAMP의 합성이나 분해를 담당한 효소들의 활성을 변화시 킴으로써 CAMP의 농도를 조절하여 그 효과를 측정하였다. HL-60세포를 숙주 세포로 사용하여 동수의 Toxoplasma를 첨가하여 배양하였으며, 처리 효과는 배양 세포계에서 Toxoplnsma에만 특이하게 표지되는 $^3H-uracil$과 Toxoplasma및 HL-60세포에 공통으로 표지되는 $^3H-thymidine$을 각각 매 12시간마다 2시간씩 배양하여 그 표지량을 측정하여 비교 분석하였다. 직접 cAMP와 cAMP의 analogue인 dbcAMP 및 br-cAMP를 첨가하였을 때, 각각 특이한 농도에서, 즉 1 mM, 0.5~5mM 및 0.1mM에서 Toxoplasma의 성장 및 증식을 향상시켰다. 이때, 성장 및 증식을 유도하는 시기 및 그 증가도에서도 차이가 있는 것으로 나타났다. 이 결과들은 세포내 cAMP의 농도를 증가시키도록 cAMP의 합성 및 분해에 관여하는 효소들의 황성을 변화 시켰을 때에도 같은 양상으로 나타났다. cAMP의 합성 효소인 adenylate cyclase의 활성제인 pNHppG, cAMP의 분해 효소인 cAMP phosphodiesterase의 활성제인 A23187과 imidazole 및 억제제인 IBMX, compound 48/80 및 theophylline을 각각 처리하였는데, 세포내 cAMP의 농도가 증가되었을 대에는 Toxoplasmn의 성장 및 증식 을 향상시켰으나, cAMP의 농도를 감소시켰을 때에는 억제하였다. 이 때 배양계에 독성을 일으키는 농도 이하에서 농도 의존성의 경향을 보였으며, 유도 시기 및 그 증가도에는 차이가 있었다. 따라서 세포 내에서 향상된 수준의 cAMP가 어떤 기전을 활성화시키며, 그 결과 세포질에서의 Toxcplasma의 성장 및 증식을 자극하게 된다는 것을 시사하였다.

• Parasites, Hosts and Diseases
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• 제29권2호
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• pp.121-128
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• 1991

Toxoplasma gondii를 HL-60 세포와 함께 in vitro 배양시 Toxopsasma 침투 정도가 각 세포에서 균일하지 않으므로 세포의 주기에 따른 일정 phase가 그 침투에 좋은 환경을 제공할 것이라는 추론으로 HL-60세포 주기를 동시화(synchronization)하여 각 stage에서 변화를 관찰하였다. 동시화는 과량의 thymidine이 DNA 합성을 억제함을 이용하여 2mM thymidine을 10시간 간격으로 각 24, 18시간 동안 처리하여 (double thymidine block method) S (synthetic) phase를 진행하는 세포를 얻었고 이후 30시 간 동안 13회의 간격을 두고 $5{\times}10^6/ml$의 Toxoplasma를 첨가하여 1시간 동안 배양하였다. 숙주세포의 동시화 정도는 (1) 3H-thymidine의 표지량 (2) mitotic index 측전 및 (3) 세포수의 증가를 통해 확인하였다. Toxoplasma의 침투 정도는 S phase중에서도 배지에서 thymidine을 제거한 후 3시간 경과시가 그 전후에 비해 6배 이상 높았으며 특히 이 시기는 DNA 합성이 최고가 되는 점과 일치하였다. 침투된 Toxoplasma 수의 변화 외에 세포의 모양도 상당한 변화가 있었고 이는 19시간 후 2번째 S phase에서도 약하나마 관찰되었다 실험 결과를 통해 특정 약 1시간 동안 일어나는 어떤 세포의 변화가 Toxoplasma 침투에 중요한 역할을 한다는 것을 알 수 있었다. 이는 원충 기생충의 숙주세포 흡착과 interiorization과정에 receptor가 관련되고 몇 receptor는 세포주기에 따라 발현이 조절되는 사실로부터 $G_1/S$ 경계부터 3시간째에 발현되면서 Togopzasma를 유인하는 receptor molecule의 존재 가능성을 시사하였다.

• Parasites, Hosts and Diseases
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• 제29권2호
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• pp.129-138
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• 1991

자유생활 담수 섬모충류의 일종인 Tetrahymenn Pyriformis는 비특이적으로 복강 대식세포를 활성화하여 미생물 살멸효과가 있음이 밝혀졌으나 한국에서 순수분리 배양된 GL주(주)에 대한 평가는 시행된 바 없어 본 섬모충의 추출액을 ICR 마우스 복강 내로 주사하여 복강 대식세포를 활성화한 다음 실험실 내에서 표적 기생 원충인 Toxoplasma gondii (RH 주)를 접촉시켜 시간별로 Togoplasma 살멸 효과를 보아 대식세포의 환성도를 평가하였던 바 다음과 같은 결론을 얻었다. 표적 기생 원충으로서 살아있는 Toxoplasma 영양형을 주입하였을 경우, 대식세포 활성제 처리 실험군은 물론 대조군에서도 모두 처리 1분 이내에 Toxoplasma가 숙주세포내로 침입 내지 탐식되었으며 이때 탐식지수 범위는 15∼51%였다. 대조군에서는 배양 시간에 따라 100개의 대식세포당 총 탐식 표적 기생충 수가 증가하였으나 활성제 처리군에서는 배양 20시간에 그 수가 모두 줄었고 Tetrahymena 처리군에서는 총 표적 기생충 수가 14, 탐식지수 10%로서 가장 왕성한 대식세포 활성도를 나타내었다. 화학 함성 활성제로서는 dimethyldioctadecylammonium bromide (DDA)가 Tetrakymena와 대차 없는 대식세포 활성효과를 보였다. 표적 기생 편충으로서 열처리 Tonxplasma 영양형을 주입하였을 경우, 대조군을 포함한 모든 실험군에서 처리 1분 이내에 역시 Toxoplasma 가 숙주 세포에 의해 탐식되었으며 탐식지수 범위는 8∼25%여서 살아있는 영양형을 처리하였을 때보다 낮은 범위를 보였다. 이때 Tetrakymena 처리군에서는 탐식지수 4%, 대식세포 100개당 표적 세포 총수가 4로서 Texoplasma 추출액 처리군과 함께 가장 우수한 활성제로 평가되었으며 화학합성 활성제로서는 DDA, dextran sulfate, complete Freund's adjutant 순으로 환성 효과가 높았다 이상의 결과로 보아 T. pyriformis (GL 주)는 화학합성 활성제보다 우수한 Toxoplasma 살멸 효과를 나타내었고, 실험실 내에서 대량 무균 배양될 수 있어 앞으로 대식세포 활성제로서, 나아가 Toxopzasma 감염 억제제로서 널리 이용될 가능성이 있을 것으로 생각되었다.

• 대한수의학회지
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• 제41권1호
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• pp.89-98
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• 2001

This study was conducted to detect the toxoplasma specific-DNA in circulating blood and organs collected from slaughtered pigs at slaughtering house and experimentally infected pigs with Toxoplasma gondii tachyzoites by polymerase chain reaction(PCR), and also PCR was applied to diagnose for acute phase of swine toxoplasmosis as a newly developed diagnostic test. The sensitivity of oligonucleotide primer, T-1 & T-2, designed from toxoplasma B1 gene amplification method was compared with Tp parasite detection by mouse inoculation(MI). On the other hand, latex agglutination test(LAT) was conducted to detect the serum antibodies comparing with the detection of toxoplasma by PCR and MI. The results obtained were summarized as follows. PCR was able to determine at the lowest level of $10^0/ml$ T. gondii in blood samples which were blended with a serial diluted T gondii in vitro. On the other hand, $10^2/5g$ of T gondii could detect from a variety of tissues including lung, diaphragm, liver, heart, spleen and brain in vitro. The primer was proved to specifically determine T gondii in blood and tissues in vitro but it did not detect Neospora caninum used as a negative control. DNA of T. gondii was effectively extracted by freezing, thawing and grinding twice both tissues mixed with T gondii in vitro and in experimentally infected pig's tissues. PCR detected specific DNA in the blood of experimentally infected pigs at 108 hrs and 120 hrs post-infection, it was the same time that the pigs showed fever and parasitaemia. In case of tissue, specific DNA was, however, detected only lung from experimentally infected pigs. Even though the duration of acute phase was from 3 to 7 days post-infection, but the latex agglutination test (LAT) results appeared from 8 days post-infection. A comparison of sensitivity in determining T gondii in blood samples between PCR and MI, PCR positive rate ranged from 25 to 33.3%, but that of MI covered from 75 to 100%.

• Parasites, Hosts and Diseases
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• 제31권4호
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• pp.379-381
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• 1993

우태아혈청의 성분이 Toxoplasma의 숙주세포 침투를 억제하는 현상을 보여 이를 보고하고자 한다. MDCK세포를 숙주로 하여 Toxoplasma의 RH주를 첨가하였을 때, 우태아혈청 농도 1%(v/v) 에서 억제 효과가 나타나기 시작하여 5%일때 침투능을 반감시켰다. 우태아절청의 비동화 여부는 억제 효과에 영향을 미치지 못하였으며, 우태아혈청을 $95^{\circ}C$에서 10분간 처리하여 억제물질의 기능을 파괴시킬 때 억제 효과는 약간 감소되었다. Toxoprasma를 먼저 우태아혈청으로 처리한 후 숙주 세포에 첨가하였을 때 침투능에는 효과를 미치지 못하였으나, Tomplasma를 숙주세포와 배양하면서 우태아혈청을 첨가하였을 때에는 시간의 경과에 따라 침투능을 억제시켰다. 이상의 결과로 우태아혈청에 Toxoplasma의 숙주세포 침투를 억제하는 성분이 존재하는 것을 확인하였으며, 억제 방법이 침투하는 순간에 일어나며, 억제물질의 기능을 통해서라기 보다는 구조를 통해서 이루어진다고 추정할 수 있었다.