• 대한수의학회지
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• 제13권1호
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• pp.67-73
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• 1973

Toxoplasma gondii (Tp), RH strain, was inoculated into cultured buffy coat cells obtained from the swine blood. The main reason for adopting swine lies in the animal's unusual susceptibility to Tp, As for the culture method used in the experiment, those well proved methods practised by Cho, Merchant, Moore and Tarnvik were mainly referred to as a starting point: hence, the author's method has been turned out to be the modified or supplementary form of those methods. Observations were made on the phase of multiplication of Tp in the cytoplasm. The results obtained were as follows: 1. Better growth and multiplication of Toxoplasma gondii were noticeably observed in the swine buffy coat cell, inoculated after three-to-five day cultivation of the cell. 2. In the lapse of the observation period, there appeard Toxoplasma gondii rarely available in the earlier stage, which had been inoculated into the cell after three-to-five day cultivation. In other words, Toxoplasma gondii started to show itself in seven or eight hours after inoculation, most outstandingly noticeable between twenty four hours and forty eight hours. Thereafter the disintegration stage of Toxoplasma gondii was observed.

• Parasites, Hosts and Diseases
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• 제32권1호
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• pp.19-26
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• 1994

Toxoplasma 약독주(ME49 주)의 배양계 확립을 위하여 뇌내 cyst를 마우스 복강에 주입하고 1, 3, 5 그리고 7일후 다시 얻어 배양기 부착성 세포를 배양하는 방법으로 ME49주를 배양하였으며, ME49주의 성장에 미치는 CAMP 및 DHFR억제제의 영향을 관찰하였다. ME49주로 감염된 대식 세포의 형태학적 관찰은 Giemsa 염색방법을 이용하였고 성장정도는 $[^3H]-uracil$ 표지량을 대조군에 대한 비로 나타내었다. 감염 3일 및 5일이 경과된 후에 채취한 복수의 대식세포에서 ME49 주의 bradyzoite가 주로 판찰되었으며, 배양기에서 3일 이상 경과된 후에는 pseudocyst를 형성하기 시작하였고, 5일 10일이 경과되면서 pseudocyst의 크기가 증가하였다. CAMP를 농도별로 처리하였을 때 3일째와 5일째의 복수를 5일간 및 10일간 배양했을 때 농도의존적으로 성장을 촉진하였다. DHFR 억제제중 pyrimethamine의 경우 농도의존적인 성장억제효과를 나타냈고 methotrexate의 경우엔 ME49 주 bradyzoite의 성장에 영향을 미치지 않는 것으로 나타났다. 이상의 결과로 마우스 대식세포내에서 bradyzoite의 배양이 가능하고 그 배양조건은 3일째와 5일째 복수를 5일 이상 10일 정도 배양하는 것이 적당하며 CAMP 및 pyrimethamine이 bradyBoite의 성장을 각각 촉진 및 억제하는 것으로 나타났다.

• Parasites, Hosts and Diseases
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• 제28권4호
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• pp.197-206
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• 1990

MDCK세포간에 형성된 tight junction이 Toxoplasma gondii이 숙주세포 침투에 미치는 영향에 대하여 고찰 하기 위해 여러 조건의 세포배양을 시행하였다. MDCK세포를 25-well배양기 내의 18-mm cover glass에 $1{\times}10^5,{\;}3{\times}10^5{\;}및{\;}5{\times}10^5$ 개로 분주한 후 배양 1, 2, 3 및 4일에 다수의 Toxoplasma를 첨가하여 1시간 동안 배양한 다음 Giemsa 용액으로 염색한 후 관찰하였을 때, 각 실험군에서 침투한 원충의 숫자는 숙주세포가 포화밀도를 이루면서 급격히 감소하였다. 배양액 내의 calcium 농도를 일반적인 1.8mM에서 $5{\;}{\mu}M$로 낮추어 포화밀도의 MDCK 세포간에 tight junction 형성을 억제하였을 때, 원충의 침투가 약 2배 증가하였으며(p<0.05) 포화밀도 이전의 배양에서는 원충의 침투가 감소하였다. Trypsin-EDTA를 처리하여 포화밀도의 배양에서 tight junction을 소화 시킨 경우, 원충의 침투가 약 2.5배 증가하였으며 (p<0.05) 포화밀도 이전의 배양에서는 급격히 감소하였다. 이상의 결과들로 볼 때, 포화밀도의 MDCK세포간에 형성된 tight junction이 Toxoplasma의 침투를 억제하는 것을 알 수 있었다. 이는 Toxoplasma가 숙주세포로 침투할 때 숙주세포의 막구조에 대한 특이성이 있음을 시사 하며, 상피세포에서는 tight junction 위의 막(apical membrane) 보다 옆 및 아래의 막(basolateral membrane)상의 구조를 이용하는 것으로 추정되었다.