Objectives : This study was carried out to evaluate analgesic effects of Zanthoxylum bungeanum Maxim (ZM) pharmacopuncture on formalin-induced pains in Sprague-Dawley (SD) rats and ICR-mice. Methods : The subjects were divided 8 weeks aged rats with constant pain sensitivity into five groups; normal (treated with normal saline at Taegye (KI3) and before injected with normal saline at hindpaw), Con-1 (treated with normal saline at KI3 before injected with formalin at hindpaw), Lido-1 (treated with lidocaine at KI3), ZMWG-1 (treated with Hot water extraction pharmacopuncture of Zanthoxylum bungeanum Maxim at KI3), ZMEG-1 (treated with ethanol extraction pharmacopuncture of Zanthoxylum bungeanum Maxim at KI3). After 35 minutes, we measured ultrasonic vocalization (USV) and enzyme activities of both Aspartate aminotransferase (AST), Alanine aminotransferase (ALT) in rat serum. In addition, Tail flick test is performed by injecting ICR mice at 5 weeks of age. And it classified into 4 groups (Con-2, Lido-2, ZMWG-2, ZMEG-2) according to the kind of drug (normal saline, lidocaine, ZMW, ZME). After each drug injection, we examined the reaction by placing the tail in water at $50^{\circ}C$. Results : ZME had analgesic effects in the early and late phase of USV during the formalin test. There were no significant differences between ZMEG-1 and Lido-1 in early and late phase of USV. Also, No significant differences observed in serum AST and ALT activity in ZMWG-1 and ZMEG-1 compared with Con-1. For tail-flick test, analgesic effect on warmth significantly increased in Lido-2 and ZMEG-2 compare to that of Con-2. Conclusion : ZME pharmacopuncture had analgesic effects on formalin-induced pain without liver toxicity. Also, tail-flick test suggest that ZME pharmacopuncture could be useful technique on analgesic effect on warmth and treatment of pains.
고정화한 P. phosphoreum의 biolummescence악 독생물질과의 상관관계를 이용한 수계의 독성물질 momtonng 가능성을 조사하였다. P. phosphoreum을 이용한 수계의 독성물질 momtonng을 위한 적정 세포 농도는 최대 biolummescence intensnty를 보인 $O.D_{660}$ 1.0~1.2였으며 이 농도외 세포를 2.5% NaCl 용액에 희석하여 5.0%의 alginateo에 고정화 했을 때 biolummescence 유지도까 가장 좋았다. 이러한 방법으로 monitoring이 가능한 수계의 pH는 6.0~8.0이었다. Free cell과 고정화 세포로 $CdCl_2.H_20, PbCl_2, phenol $그리고 mtrophenol에 대한 bioluminescence를 조사하였을 때 고정화 방법에 의해 독성물질에 대한 민감성0] 증가되었다. 고정화 세포외 경우 각 독성 물질에 따라 20분 이내에 0.01~1.50ppm이하까지 mornitoring이 가능하였다. 뿐만 아니라 speciflC blolurninescence reclucLion rate, biolummescence mtenslLy의 ratio 그리고 Gamma value로 분석함으로서 독성물질의 농도와 biolummescence의 변화를 직선의 관계로 나타낼 수 있어 독성 물질의 농도 예측이 가능하다.
The aim of this study was to investigate in vivo toxicity and effects of two phthalate esters (PEs), di-n-butylphthalate (DBP) and di-2-ethylhexyl phthalate (DEHP), on the immune system of the bagrid catfish, Pseudobagrus fulvidraco. Groups of experimental fish were subjected to daily intraperitoneal injections of 300 or 1000 mg $kg^{-1}$ of DBP or DEHP for 3 days, and the cellularity and functional activity of phagocytes were measured in the spleen and pronephros (head kidney). The number of spleen leukocyte cells increased significantly (p<0.05) in response to low and high doses of DEHP and DBP, respectively; however, the cellularity of the pronephros was more susceptible to higher dose of DEHP than DBP. Nonspecific immunity, as determined by the phagocytic index (PI) and phagocytic capacity (PC), was significantly depressed by DEHP at 1000 $1000mg\;kg^{-1}\;day^{-1}$ in the pronephros at 3 days after injection. Furthermore, significantly (p<0.05) increased levels of serum glutamic oxaloacetate transaminase (GOT) and glutamic pyruvate transaminase (GPT) indicated marked hepatic dysfunction in immunosuppressed fish. Treated fish showed a significant reduction in total serum protein but no significant alteration in lysozyme activity. These results demonstrate the sensitivity of the fish immune response for predicting PE-induced immunotoxicity.
하천 오염에서 문제시되고 있는 유기오염 물질인 PCP 와 DDT의 환경기준을 평가하고 담수어 어종간의 독성에 대한 저항성을 연구하였다. 각 어종에 대하여 24, 48, 72 및 96시간의 TL sub(m) 값을 산출하였던 바 오염물질에 대한 저항성은 오염물질의 성상에 따라 상이한 양상을 보여주었다. 실험한 10종의 담수어중 PCP 및 DDT에 저항성이 약한 어종은 N. Chrysophekadion으로 96 h-TL 하(m) 값은 0.065mg/l 과 0.0044mg/l으로 각각 나타났으며 PCP에 저항성이 강한 어종은 T. nilotica로서 96 h-TL 하(m) 값은 0.264mg/l이었으나, DDT에 대해서는 C. Siamensis로서 96 h-TL 하(m) 값은 0.0133mg/l로 평가되었다.
Melanoma, the most serious type of skin cancer, exhibits a high risk of metastasis. Although chemotherapeutic treatment for metastatic melanoma improves disease outcome and patient survival, some patients exhibit resistance or toxicity to the drug treatment regime. OTUB1 is a deubiquitinating enzyme overexpressed in several cancers. In this study, we investigated the effects of inhibiting OTUB1 expression on melanoma-cell proliferation and viability and identified the underlying molecular mechanism of action of OTUB1. We did endogenous OTUB1 knockdown in melanoma cells using short interfering RNA, and assessed the resulting phenotypes via MTT assays, Western blotting, and cell-cycle analysis. We identified differentially expressed genes between OTUB1-knockdown cells and control cells using RNA sequencing and confirmed them via Western blotting and reverse transcription polymerase chain reaction. Furthermore, we investigated the involvement of apoptotic and cell survival signaling pathways upon OTUB1 depletion. OTUB1 depletion in melanoma cells decreased cell viability and caused simultaneous accumulation of cells in the sub-G1 phase, indicating an increase in the apoptotic-cell population. RNA sequencing of OTUB1-knockdown cells revealed an increase in the levels of the apoptosis-inducing protein TRAIL. Additionally, OTUB1-knockdown cells exhibited increased sensitivity to PLX4032, a BRAF inhibitor, implying that OTUB1 and BRAF act collectively in regulating apoptosis. Taken together, our findings show that OTUB1 induces apoptosis of melanoma cells in vitro, likely by upregulating TRAIL, and suggest that approaches targeting OTUB1 can be developed to provide novel therapeutic strategies for treating melanoma.
The SKINTEX Method is based on a two-compartment physico-chemical model which includes a Biomembrane Barrier in compartment one and an organized macromolecular matrix in compartment two. Test samples absorb onto or permeate through the keratin/collagen Biomembrane Barrier and then can interact with the organized macromolecular matrix. Changes in the integrity of the barrier release a dye indicator: Changes in the matrix can alter its transparency. The sum of these two responses is read spectrophotometrically at 470nm. An early investigation of 950 chemicals and formulations in the SKINTEX System produced results which were 89% concordance to in vivo Draize dermal irritation results obtained with 24-hour occluded application of test samples with-out abrasion and standard scoring. Alkaline materials were analyzed in a specialized SKINTEX AMA Protocol. In this early study, the model did not distinguish nonirritant test materials and formulation with PDII(Primary Dermal Irritation Index)in the range from 0 to 1.2, A High Sensitivity Assay Protocol(HSA)was developed to amplify the changes in both compartments of this model and provide more accurate calibration of these changes. A study of 60 low irritation test samples including cosmetics, household products, chemicals and petro-chemicals distinguished nonirritants with PDII $\leq$ 0.7 for 26 of 30 nonirritants. A second protocol was developed to evaluate the SKINTEX model predictability with respect to human irritation. The Human Response Assay (HRA )has been optimized based on differences in penetration and irritation responses in humans and rabbits. An additional 32 test materials with different mechanisms and degrees of dermal toxicity were evaluated by the HRA. These in vitro results were 86% concordant to human patch test results. In order to further evaluate this model, a Standard Chemical Labelling (SCL) Protocol was developed to optimize this system to predict Draize dermal irritation results after a 4-hour application of the test material. In a study of 52 chemicals including acids, bases, solvents, salts, surfactants and preservatives, the SCL results demonstrated 85% concordance to Draize results for a 4-hour application of test samples on non-abraded rabbit skin. The SKINTEX System, including three specialized protocols, provided results which demonstrated good correlation to the endpoint of dermal irritation in man and rabbits at different application times.
The challenging clinical outcomes associated with advanced cervical cancer underscore the need for a novel therapeutic approach. Monensin, a polyether antibiotic, has recently emerged as a promising candidate with anti-cancer properties. In line with these ongoing efforts, our study presents compelling evidence of monensin's potent efficacy in cervical cancer. Monensin exerts a pronounced inhibitory impact on proliferation and anchorage-independent growth. Additionally, monensin significantly inhibited cervical cancer growth in vivo without causing any discernible toxicity in mice. Mechanism studies show that monensin's anti-cervical cancer activity can be attributed to its capacity to inhibit the Wnt/β-catenin pathway, rather than inducing oxidative stress. Monensin effectively reduces both the levels and activity of β-catenin, and we identify Akt, rather than CK1, as the key player involved in monensin-mediated Wnt/β-catenin inhibition. Rescue studies using Wnt activator and β-catenin-overexpressing cells confirmed that β-catenin inhibition is the mechanism of monensin's action. As expected, cervical cancer cells exhibiting heightened Wnt/β-catenin activity display increased sensitivity to monensin treatment. In conclusion, our findings provide pre-clinical evidence that supports further exploration of monensin's potential for repurposing in cervical cancer therapy, particularly for patients exhibiting aberrant Wnt/β-catenin activation.
생태계는 생물에게 매우 다양한 환경조건의 서식처를 제공하며 이 서식처 내에 적응한 생물만이 생존, 성장, 번식하며 해당 서식처에 살아가게 된다. 또한 서식처의 환경조건들은 서식처로 유입한 화학물질의 생물유효도(bioavailability)에 크게 영향을 미쳐 생물들이 받는 부정적 영향이 서로 다를 수 있다. 본 연구에서는 생태독성평가에 적합한 ISO guideline 11276의 독성평가 표준종 중 토양 생태계에 다양한 서식처 조건 중 수변 생태계에서 적응하여 살아가는 Yuukianura szeptyckii의 중금속에 대한 평가 민감성을 확인하고 수변 서식처 중금속 생태독성평가종으로서의 가능성을 확인하는 데 있다. 결과는 카드뮴과 구리 모두 농도에 따른 유의한 독성영향을 보였다. 카드뮴의 경우 LC50은 280 mg kg-1, EC50은 66 mg kg-1, NOEC와 LOEC는 각각 25, 50 mg kg-1으로 나타났으며 구리의 경우에는 LC50은 911 mg kg-1, EC50은 151 mg kg-1, LOEC는 50 mg kg-1으로 나타났다. 기존의 국제표준종인 Folsomia candida와 국내표준종인 Allonychiurus kimi의 이전 결과와 비교하면 더욱 민감한 독성값을 보였으며, 이러한 생존과 번식에 미치는 부정적 영향은 체내의 중금속의 유입 농도와 밀접한 관련을 보였다. Y. szeptyckii는 수분 함량이 높은 토양에서 중금속 생태독성평가에 민감한 종으로 나타났으며, 상대적으로 높은 습도를 보일 가능성이 높은 수변생태계에 적합한 생태독성평가종으로 사용이 가능할 것으로 생각된다.
우리나라에서 수도용제초제로 가장 광범위하게 사용되고 있는 molinate는 농약성수기에 하천수중 검출빈도가 매우 높게 나타나고 있는 농약 중의 하나이다. 본 연구에서는 molinate의 Chrinomus riparius(깔따구류)와 Cloeon dipterum(하루살이류)의 유충의 성장단계별 급성독성을 비교 조사하였다. C. riparius의 령기별 molinate의 급성독성을 비교한 결과 1령 유충의 48시간 $EC_{50}$은 7.8 mg/L로 가장 감수성이 높았으며 2령 유충은 25.0 mg/L, 3령 유충은 22.9 mg/L로 나타나 2령과 3령의 감수성은 유사한 것으로 조사되었다. 4령 유충의 경우 48시간 $EC_{50}$이 50 mg/L 이상으로 나타나 가장 감수성이 낮은 것으로 조사되었다. 하루살이(C. dipterum) 유충의 경우에도 제일 어린 유충 group의 감수성이 가장 민감한 것으로 조사되었으며 96시간 $EC_{50}$은 14.3~24.1 mg/L범위였다. 결론적으로 수서곤충의 유충 령기별 독성 평가결과 가장 어린 개체가 가장 민감한 것으로 조사되어 독성 시험시 방법과 목적에 맞는 적절한 유충 성장단계를 선정해야 할 것으로 판단된다. 또한 농약의 수생태계 위해성 평가에서 우리나라 농수로에 서식하는 대표 수서곤충인 하루살이 유충의 활용 가능성을 제안 하고자 한다.
Ciguatoxin 구조 연구의 일환으로 파랑비늘돔 중에 서 독성분을 추출하였는데 Scarus sordidus만 근육과 내장에 독이 있었으나, S.frenatus, S.scaber and S.pectorlis에는 모두 독이 없었다. 실리스산컬럼에서 얻은 조독을 DEAE-셀루로즈 컬럼상에서 콜로로포름, 클로로포름-메타놀 (1 : 1) 및 메타놀로 전개하였더니 클로로포름 유출액(ST-1) 과 클로로포름-메타놀(1 : 1) 유출액에서 독성분이 발견되었고, 메타놀 유출액에서는 독성분이 검출되지 않았다. ST-1과 ST-2을 silica gel 60F-254에 spot하여 클로로포름-메타놀-물-식초산 (90 : 9.5 : 0.2 : 0.3)으로 전개하였더니, 그Rf값이 각각 0.60-0.75, 0.30-0.54였다. DEAE-셀루로즈 컬럼에서 얻은 ST-1을 재재크로마토그라피 하여도 역시 ST-1과 ST-2로 나누어졌다. 이렇게 얻은 ST-1과 ST-2는 세파텍스 LH-20에 흡착시켜, 클로로포름-메타놀(1 : 1) 용매로 전개할 때, 머무름시간이 모두 같았고, 역상 LiChrosorb RP-18를 이용한 HPLC상에서도 머무름시간이 동일하였다. 또 순수한 $ST-1\;(1.10\;{\mu}g)$ 그리고 이것을 1 N NaOH로 처리한 것 $(1.13\;{\mu}g)$을 활성도V인 알루미나 컬럼에 흡착시켜 클로로포름-메타놀 혼합액으로 전개하였더니 알카리처리를 하지 않는 경우는 $0.35\;{\mu}g)$가 클로로포름-메타놀의 9 : 1, 1 : 1 유출액에서, $(0.55\;{\mu}g)$가 메타놀-물 (1 : 1) 유출액에서 검출되었으나, 알카리처리를 한 경우는 처음 독성의 50%가 소실되어, 클로로포름-메타놀 (9 : 1) 유출액에서 $(0.21\;{\mu}g)$, 메타놀-물 (1 : 1) 유출액에서 $(0.80\;{\mu}g)$ 검출되었다. 하면 morey eel내장에서 얻은 독물질도 DEAE-셀루로즈에서 ST-1 과 ST-2로 나누어지며, 이 ST-1의 TLC, HPLC 및 알루미나 컬럼상의 거동이 파랑비늘돔에서 얻은 ST-1의 그것과 같으므로 scaritoxin으로 보고한 ST-1은 ciguatoxin의 형태인 less polar cigutoxin (LPCTX) 으로 생각된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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