Bacillus spp., as a type of plant growth-promoting rhizobacteria (PGPR), were studied with regards promoting plant growth and inducing plant systemic resistance. The results of greenhouse experiments with tobacco plants demonstrated that treatment with the Bacillus spp. significantly enhanced the plant height and fresh weight, while clearly lowering the disease severity rating of the tobacco mosaic virus (TMV) at 28 days post-inoculation (dpi). The TMV accumulation in the young non-inoculated leaves was remarkably lower for all the plants treated with the Bacillus spp. An RT-PCR analysis of the signaling regulatory genes Coil and NPR1, and defense genes PR-1a and PR-1b, in the tobacco treated with the Bacillus spp. revealed an association with enhancing the systemic resistance of tobacco to TMV. A further analysis of two expansin genes that regulate plant cell growth, NtEXP2 and NtEXP6, also verified a concomitant growth promotion in the roots and leaves of the tobacco responding to the Bacillus spp.
To increase the expression of a foreign protein in transgenic plant, the benefits of 5'-untranslated leader sequences of tobacco mosaic virus (TMV) RNA or soybean glycinin gene, Gy2, fused to a protein coding sequence were exploited. pGA643-derived plasmid contains 355 promoter of cauliflower mosaic virus, protein coding sequence of maize 10 kDa zein (10kZ) and Gy2 terminator. The leader from Gy2 or TMV RNA was inserted between the promoter and the coding sequence in each construct. The recombinant DNAs were introduced into tobacco plants by Agrobacterium mediated leaf disc transformation method. Although the transgene without the leader had more transcripts than the others, mRNAs containing the leader were translated more efficiently. It might be due to difference in the length of 5'-untranslated sequence and context surrounding the AUG codon, but could be sequence specific rather. These results suggest that the leader sequences of Gy2 and TMV play important roles as an enhancer in translational control of foreign gene in transgenic tobacco plant.
Kim, Young-Sook;Hwang, Eui-ll;O, Jeong-Hun;Kim, Kab-Sig;Ryu, Myong-Hyun
The Plant Pathology Journal
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v.20
no.4
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pp.293-296
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2004
During the screening of antiviral substances having inhibitory effects on Tobacco mosaic virus (TMV) infection on tobacco plants, we found a bacterial isolate KTB3, and identified it as Acinetobacter sp. which strongly inhibited the infection of TMV When the culture filtrate from KTB3 was applied on the upper surface of the Xanthi-nc tobacco leaves at the same time, or 24 hours before TMV inoculation, almost complete inhibition was achieved. Likewise, 86% inhibition was achieved, when the culture filtrate was applied on the underside of the leaves. In field trials, transmission of TMV from diseased seedlings to healthy ones during transplanting work was reduced by 92%, when the culture filtrate was sprayed onto the tobacco seedlings, cv. NC82, 24 hours before transplanting. No toxic effect was observed on the tobacco plants. Antiviral substance from the culture filtrate was purified by ethanol precipitation, dialysis, DEAE-cellulose, and Sephadex G75 gel column chromatography. The partially purified active material which showed positive color reaction to sugar and protein inhibited TMV infection by 60% at 1 ${\mu}$g/ml.
Tobacco mosaic virus (TMV), TMV-common strain, causes severe damage on flue-cured tobacco in Korea. As the results, breeding programs were conducted to transfer the TMV resistance from NC567 to other cultivars. Advantage of F1, hybrid may not lie only in their heterotic value but also in directly combining of valuable dominant traits, e.g. for disease resistance, either in pairs or as groups already assembled in the two parents. A new TMV resistant flue-cured tobacco variety KF114 was developed from a cross as maternal parent MSNC567 and NC82 at the Suwon Experiment Station. KF114 was more vigorous growth characteristics in early stage than that of NC82, standard variety in Korea, and other characters were similar to those of NC82. It os high resistance to TMV, but bacterial wilt(Pseudomonas solanacerum) and black shank (Phytophthora parasitica var. nicotianae) is comparable to NC82. It should adapt well to the flue-cured production area and can reduce premature flowering under unfavorable weather conditions. Yield of KF114 is 1% to 5% higher, and nearly equal in value per KG compared with NC82. This variety, F1 hybrid, met acceptable standards for chemical and physical characteristics of cured leaf and high ranked good smoking taste by panel members in Korea Ginseng and Tobacco Research Institute.
Two strains of Cucumber mosaic virus (CMV) isolated in Kuwait were confirmed their infectivity based on symptomatology and host range on different cultivars of tomato (Lycopersicon esculentum), tobacco(Nicotiana tabacum L.) and squash (Cucurbita pepo). The pattern of symptoms differed for the two CMV strains in tomato and tobacco, showing severe stunting and mosaic symptoms with one strain designated KU2, and almost symptomless with the other strain designated KU1. A satellite RNA 5 (sat-RNA) was found to be associated with the KU1 strain and was characterized as a benign viral satellite RNA. Using reverse transcription and polymerase chain reaction (RT-PCR) with sat-RNA specific primers, an amplified PCR product of about 160bp was determined and analyzed by gel electrophoresis. This naturally occurring benign viral satellite RNA was successfully used as a biological control agent to protect tomato plants against the severe KU2 strain. Tomato plants grown in plant-growth chambers, were preinoculated with KU1 containing the benign viral satellite and then challenge inoculated with the severe KU2 strain at different time intervals. All plants challenged three weeks after preinoculation showed nearly complete protection from subsequent infection by the severe strain. This biological control technology using plant viruses was found protective and could be successfully established sooner after the preinoculation.
A mosaic diseased radish collected from the suburb of Seoul, in November, 1961 was used for studing the host range, physical properteis, purificaitiion, insect transmission, and electron microscopy. A Japanese strain of radish mosaic(RPV) was also used with Korean strain of radish mosaic (KRMV) for a comparative study. The two viruses, KRMA and RPV, were identified by the difference in host range, insect transmission and electron microscopy. The KRMA was severely infective on tobacco and Nicotiana glutinosa, while on Gomphrena globsa was immune to the virus. RPV produces necrotic local lesions on Gomphrena globosa but did not infect tobacco and N. glutinosa. Among varieties of radish, Seoul, Akamaroo, Akanagea, Koong-Joong showed more severe symptoms than Simoo, Minong, Paek-soo, which appeared to be fainly resistant. In a number of tests, it was found that the virus KRMA retained its infectivity until to a dilution of 1:2,000, heating at $58^{\circ}$ for 10 minutes, adn aging in vitro for 7 days at room temperature. The RPV was not inactivated until it was diluted to 1:2,000, heated to $56^{\circ}$, and aged for 6 days. The KRMV was readily transmitted by the aphid(Myzus persicae Sulz). The virus RPV was not transmitted by the aphid in a number of tests. Partialy purified viruses using ammonium acetate buffer, salting-out by ammonium sulfate and centrifugation of high and low speed were highly infective. Electron micrographs showed that the KRMV paticles are of spherical particles whereas the RPV particles are rod-shaped.
A mosaic diseased radish collected from the suburb of Seoul, in November, 1961 was used for studing the host range, physical properteis, purificaitiion, insect transmission, and electron microscopy. A Japanese strain of radish mosaic(RPV) was also used with Korean strain of radish mosaic (KRMV) for a comparative study. The two viruses, KRMA and RPV, were identified by the difference in host range, insect transmission and electron microscopy. The KRMA was severely infective on tobacco and Nicotiana glutinosa, while on Gomphrena globsa was immune to the virus. RPV produces necrotic local lesions on Gomphrena globosa but did not infect tobacco and N. glutinosa. Among varieties of radish, Seoul, Akamaroo, Akanagea, Koong-Joong showed more severe symptoms than Simoo, Minong, Paek-soo, which appeared to be fainly resistant. In a number of tests, it was found that the virus KRMA retained its infectivity until to a dilution of 1:2,000, heating at $58^{\circ}$ for 10 minutes, adn aging in vitro for 7 days at room temperature. The RPV was not inactivated until it was diluted to 1:2,000, heated to $56^{\circ}$, and aged for 6 days. The KRMV was readily transmitted by the aphid(Myzus persicae Sulz). The virus RPV was not transmitted by the aphid in a number of tests. Partialy purified viruses using ammonium acetate buffer, salting-out by ammonium sulfate and centrifugation of high and low speed were highly infective. Electron micrographs showed that the KRMV paticles are of spherical particles whereas the RPV particles are rod-shaped.
As an alternative method to produce low cost reagents for immunodiagnosis and protect the plants from viral disease, a gene encoding a single chain variable fragment(scFv) recombinant antibody targeted to the coat protein of cucumber mosaic virus (CMV) was expressed in Nacotiana tabacum. The source of the scFv recombinant antibody gene was from spleen tissue of an immunized mouse. The gene was initially cloned into the pCANTAB5E phagemid and expressed in E. coli. In the following study, the antibody gene was subcloned into the plant expression vector, pCAMBIA-1301 and introduced into tobacco leaf tissue via Agrobacterium tumefacients mediated transformation. After transformation, 56 out of 58 plants were shown to carry the desired anti-CMV scFv gene by PCR analysis. Overall, only 12.5% of the 56 putative transgenic plants were found to express the antibody to a detectable level.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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