The author observed histochemically the nature of the calcified tissue in the rabbit dental pulp, induced by pulpal injection of potassium permanganate. The pulp of rabbit mandibular incisors were exposed and enlarged by a dental hand reamer. The exposed pulps were injected with 0.05ml of 20mM solution of potassium permanganate dissolved in Ringer's solution in experimental tooth. Also the control tooth received a pulpal injection of 0.05ml of Ringer's solution. After pulpal injection, the tooth was plugged with a gutta-percha root canal point. The staining techniques were hematoxylin-eosin stain, van Gieson stain, PAS reaction, toluidine blue stain, alcian blue-hematoxylin stain and colloidal iron-picric acid stain. The results were as follows: 1. The pulp on experimental tooth showed osteodentin-like calcified tissue. Also, in some areas, false denticle-like substance were observed. 2. The central portion of the calcified matrix showed metachromasia in toluidine blue stain had strong staining capacity in alcian blue stain. 3. The peripheral portion of the calcified tissue revealed marked van Gieson positive reaction for collagen. But their staining ability in alcian blue was slight and metachromasia was not appeared.
Implantation of demineralized bone matrices was done into the amputated pulp in vivo and sequential reaction of the pulpal ectomesenchymal cells was observed. The bone matrices, obtained from cat long bone were crushed into below $700{\mu}m$, demineralized with 0.5N HCl and allografted into pulp of molar teeth. At seven days after implantation many undifferentiated mesenchymal cells aggregated near the matrices in the pulpal tissue. At fourteen days after implantation, the cells differentiated into preosteoblast-like cells which have secretory cell characteristics. At one or two months after implantation osteoid tissue was formed. The cells, which are located at the surface of the tissue, contained abundant dilated rough endoplasmic reticulum, Golgi apparatus and secretory granules in the cytoplasm. The matrix of the tissue has less collagen fibers than those in normal dentin. These results suggest that the interaction of pulpal mesenchymal cells with demineralized bone matrix can be a model which induces mineralization.
Solid phase enzyme linked immunosorbent assay (ELISA) was developed to detect the whole cells of Edwardsiella tarda from infected tissues of flounder. Cross-reaction test was performed by ELISA against fish pathogens such as A. hydrophila ATCC7966. V. anguillarum HYUFP5001, Y, ruckeri 11-4, E. ictaluri and Streptococcus sp. NG8206. Rabbit anti-E, tarda Edk-2 sera highly cross-reacted with A. hydrophila ATCC7966 and V. anguillarum HUFP5001. However, the cross-reaction was removed by using the anti-serum pre-adsorbed with A, hydrophila ATCC7966 FKC. The intra-species cross-reaction among E. tarda isolates was very high. ELISA with the whole cell antigens present in tissue homogenate appeared with highly decreased sensitivity, presumably by the co-coating of lipid or proteins in tissues. Thus, it would be necessary to use the infected tissue homogenates diluted more than 100 times with PBS for diagnosis. Interestingly, compared with the using of FKC antigen, the direct detection of viable cells in tissue homogenate showed more sensitive results with detection limit of $1{\times}10^3$ cells/ml in buffer or diluted tissue homogenate. Consequently, the ELISA method developed in this study was specific, rapid and sensitive for diagnosing edwardsiellosis.
Tissue reactions in gills of cultured red seabream, Pagrus major, toan epitheliocystis infection are described. Basophilic intracellular inclusions in gills contained prokaryotes, most probably a Chlamydia-like organisms according to morphological characteristic. A few types of tissue reaction were found around the inclusions: encapsulation, epithelial hyperplasia, lamellar fusion, and inflammation. It was considered that eosinophilic granule cells and macrophages might take part in defense reactions against this prokaryotic organism.
The objective of this study was to develop of semen transport system for cryopreservation and fertility in bull sperm. The ejaculated semen were diluted with Triladyl containing 20% egg-yolk for transportation. Diluted semen was transported by three methods that there were wrapping tissue (Tissue), sinking under $30^{\circ}C$ water (Water) and sinking between warm water and air (Air) methods. Semen was transported within 2 hours in $0.3^{\circ}C$. For this study, the freezing of diluted semen were added with Triladyl containing 20% egg-yolk. And frozen-thawed sperm were estimated with SYBR14/PI double stain for viability, FITC-PNA/PI double stain for acrosome reaction analysis and Rhodamine123 double stain for mitochondrial intact assessment. In results, live sperm (SYBR+/PI-) in Air treatment group ($43.3{\pm}4.7%$) was significantly (p<0.05) higher than other treatment groups (Tissue: $16.3{\pm}2.7%$ and Water: $27.5{\pm}3.1%$), dying sperm (SYBR+/PI+) in Air treatment group ($55.6{\pm}4.7%$) was significantly lower than other treatment groups (Tissue: $77.6{\pm}3.2%$ and Water: $67.6{\pm}3.3%$) (p<0.05). Acrosome reaction in Air treatment group ($0.2{\pm}0.1%$) within live sperm (PI negative region) was significantly (p<0.05) lower than other treatment groups (Tissue: $0.7{\pm}0.2%$ and Water: $0.5{\pm}0.1%$), the acrosome reaction in Air treatment group ($28.6{\pm}2.8%$) within all sperm also was significantly lower than other treatment groups (Tissue: $44.2{\pm}1.8%$ and Water: $36.2{\pm}2.0%$) (p<0.05). And mitochondrial intact in Air treatment group within live ($97.1{\pm}0.4%$) and all ($61.9{\pm}3.3%$) sperm were significantly higher than other treatment groups (Tissue: $85.2{\pm}3.3%$, Water: $87.8{\pm}2.9%$ within live sperm and Tissue: $49.28{\pm}3.7%$, Water: $42.0{\pm}3.1%$ within all sperm) (p<0.05). Therefore, we suggest that transportation by sinking method between warm water and air was beneficial to improvement of fertility in frozen-thawed in bull semen.
A Study of Clinical Application of the Connective Tissue Massage General massage is termed kneading and rubbing. It will bring the effect of blood volume and cardiovascular reaction. Connective tissue massage is a diagnostic and treatment method. But the general massage has not diagnostic aspect. Connective tissue massage techniques are stimulating and stretching the LCT, mast cell, collagenous fiber, fascia, skin, muscle and nerve tissue. Diagnostic aspects of connective tissue massage are visible investigation, manual investigation, and stroking on the reflex zone. CTM do stroking with 3, 4th finger tips on the whole body for the treatment.
The authors inquired into what reactions comprise the response of mice(as a model) CD3, CD4 and CD8 monoclonal antibodies in spleen tissue when injected intraperitoneally by antigens of Clonorchis sinensis. The author is objective was focused on investigating the property of cellular immunity for liver fluke. In particular, the results of having examined the phenotype of the tissue of spleen were revealed as follows: a certain length of time after having been intraperitoneally injected with antigens of Clonorchis sinensis and Freund's adjuvant, the tissue of spleen was embedded and immunohistochemically stained by the avidin-biotin complex method. A strong reaction in response to CD3, while a feeble reaction resulted from CD4 and CD8. The tissue region showed a positive reaction to all antibodies, especially from capsules, vascular areas, white pulps and membrane of blood cells.
An experimental study was performed to study the tissue reactions to tissue conditioners in rabbits. Thirty rabbits were divided into three groups, 10, Hydro-cast group, 10, Coe-comfort group, and 10, heat-cured resin group. Tissue conditioners and heat-cured resin were embedded in the oral mucosa of rabbits. The tissue specimens were removed on 3rd, 7th, 14h, 21st and 28th day after embedding and examined under microscope after staining them with H-E stain, Van Gieson's stain, Masson's trichrome stain and PAS reaction. The results were as follows :
1. Tissue reactions to tissue conditioners were somewhat different from each other in the early stage, but, with the increase of the embedding period, the fibrous capsule was thickened in both. These tissue reactions were similar to those to heat-cured resin.
2. Newly formd fibrous components were stained deep-red with Van Gieson's stain and dark-green with Masson's trichrome stain. But their stainability was decreased as collagenous fibers became matured.
3. Newly formed fibrous components showed intense PAS reactivity, but PAS reactivity was reduced as the connective tissue capsule became completed.
To exanime in vivo tissue reactions of glass fibers, we injected glass fibers to rats subcutaneously. We made fibers of average dimensions of approximately $2{\mu}m$ in diameter and $60{\mu}m$ in length. After instilation of glass fiber we sacrificed rats sequentially at 1, 3 and 6 months. At 1 month after injection of glass fibers, the exposure area turned to yellow color and formed well-demarcated round mass. The average size of the mass was $1\times0.3cm$. Grossly detectable mass was decreased in size at 6 months compared to 1 or 3 months. Microscopically, strong foreign body reaction to glass fibers, inflammation and fibrosis were observed until 6 months. Foreign body reaction was increased up to 3 months, but it was decreased after 6 months. In scanning electron microscope, there was many bundles of glass fibers around the inflammation area, but the size of glass fibers were gradually reduced from 1 month to 6 months. These results suggest that subcutaneous exposure of glass fiber can provoke strong tissue reaction including foreign body granulomas, inflammation and fibrosis. But glass fiber itself did not produce any neoplastic changes.
Purpose: This study evaluated histologically the tissue responses to and the effects of a customized nano-hydroxyapatite (n-HA) block bone graft on periodontal regeneration in a one-wall periodontal-defect model. Methods: A customized block bone for filling in the standardized periodontal defect was fabricated from prefabricated n-HA powders and a polymeric sponge. Bilateral $4{\times}{\times}4{\times}5$ mm (buccolingual width${\times}$mesiodistal width${\times}$depth), one-wall, critical-size intrabony periodontal defects were surgically created at the mandibular second and fourth premolars of five Beagle dogs. In each dog, one defect was filled with block-type HA and the other served as a sham-surgery control. The animals were sacrificed following an 8-week healing interval for clinical and histological evaluations. Results: Although the sites that received an n-HA block showed minimal bone formation, the n-HA block was maintained within the defect with its original hexahedral shape. In addition, only a limited inflammatory reaction was observed at sites that received an n-HA block, which might have been due to the high stability of the customized block bone. Conclusions: In the limitation of this study, customized n-HA block could provide a space for periodontal tissue engineering, with minimal inflammation.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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