The purpose of this research was to investigate cytotoxicity of DangkwiYonghoe-Hwan(DYH) and the constitutive crude drugs on several cancer cell-lines, thymocytes, splenocytes and 3T3 cells. The DYH consists of Coptidis Rhizoma, Scutellariae Radix, Phellodendri Cortex, Gardeniae Fructus, Gentianae scabrae Radix, Indigo pulverata Levis, Aloe, Rhei Rhizoma, Moschus, Saussureae Radix and Angelicae Gigantis Radix. The cytotoxicity was determined by MTT method. The DYH inhibited the proliferation of MOLT-4, K562, HL-60, Jurkat, L1210, P815, S180 and Yac-1, thymocyte, splenocyte and 3T3 cells. The cytotoxicity of Coptidis Rhizoma on the cancer cell-lines was the most potent in the constitutive crude drugs. The proliferation of cancer cell-lines was partly inhibition and partly increase by the treatment of Scutellariae Radix, Gardeniae Fructus, Gentianae scabrae Radix, Indigo pulverata Levis, Aloe, Rhei Rhizoma, Moschus and Angelicae Gigantis Radix. Phellodendri Cortex and Saussureae Radix had a poor cytotoxicity on cancer cell-lines. Coptidis Rhizoma and Phellodendri Cortex inhibited the proliferation of thymocyte, splenocyte and 3T3 cells.
Ryu, Chun-Jeih;Whitehurst, Charles E.;Chen, Jianzhu
BMB Reports
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제41권8호
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pp.575-580
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2008
Thymocyte-specific transcriptional regulatory systems can be used to better understand the relationship between transcription and V(D)J recombination during early T cell development. In this study, we generated transgenic mice expressing the transactivator Gal4-VP16 or the Gal4 DNA binding domain (Gal4-DBD) under the control of the lck proximal promoter, which is only active in immature thymocytes. From these studies Gal4-VP16 and Gal4-DBD expression was shown to significantly alter thymic cellularity and differentiation without significantly changing the $CD3^+$ thymocyte distribution. Furthermore, the presence of Gal4-VP16 or Gal4-DBD in the transgenic thymocytes retarded the mobility of the Gal4 DNA binding motif as determined by a gel mobility shift assay, suggesting that the developmental alteration did not affect the functional property of the transgenic proteins. These results indicated that lck promoter-driven Gal4-VP16 or Gal4-DBD expression did not affect $CD3^+$ mature thymocytes, thus this system can be applied to study transcriptional regulation of transresponder genes in bigenic mouse model thymocytes.
To effectively purify of IL-1 inhibitor from human febrile urine, we have established monoclonal antibody that reacts with human recombinant interleukin l$\beta$(IL-1$\beta$). The antibody, designated ON-1, was highly specific to IL-1$\beta$ and no cross-reaction with other cytokines(IL-l$\alpha$ and IL-4) was observed. As the results of ELISA inhibition assay and Western blotting method, it was further identified that ON-1 had high binding specificity with IL-1$\beta$. IL-1 receptor binding material from febrile patient urine was effectively purified with affinity column chromatography which conjugated with ON-1. This urinary material inhibited the thymocyte proliferation in a dosedependent manner. IL-l$\beta$ induced thymocyte proliferation activity was inhibited to 67.3% at 6 $\mu\textrm{g}$ of the purified urinary material. The result may suggest that this urinary material the purified urinary material. The result may suggest that this urinary material will have antagonic effect on IL-1 action mechanism and act IL-l$\beta$ inhibitor.
Objective : Jeungson-Ojeok-Hwan Bijukbang(JOH) has been used to treat patients with tumor etc. In the theory of Korean medicine, JOH can treat Juk-Chui. JOH is known to have treat Juk-Chui. Juk-Chui is analogous to tumor. Methods : For these reasons, the present study was designed to investigate the effects of JOH on solid tumor in mice in terms of immune-potentiating and direct cytotoxic action of JOH in vitro and vivo study. The present author investigated thymocyte and splenocyte proliferation to confirm immune-potentiating activity of JOH and also investigated tumor/body weight ratio and survival rates in tumor bearing mice. Results : In this study, administration of JOH decreased tumor/body weight ratio significantly, and prolonged survival duration compared to non-treated control. In addition, treatment with JOH suppressed proliferation rate of Sarcoma 180 (S-180) cells significantly, and elevated proliferation rates of thymocytes isolated from normal mice. These results were co-related with in vivo study. Conclusion : these results suggest that JOH is useful to treat patient with solid tumor, because JOH has direct toxic action for tumor cell and immune-potentiating action for T cells. Further study will need to elucidate exact mechanisms related in anti-cancer action of JOH.
본 연구는 생체 내 세포 및 조직배양기로서의 면역결핍동물을 개발할 목적으로 proximal lck promoter와 DT-A gene를 이용하여 형질전환생쥐을 생산하고 이 형질전환생쥐의 면역세포에서 DT-A gene이 발현되는지를 분석하였다. 형질전환생쥐와 정상생쥐로부터 thymus, spleen 및 liver에서 RNA를 추출하여 RT-PCR수행하였는데 정상생쥐의 조직에서는 어떠한 DT-A gene의 발현양상을 얻을 수 없었으나 형질전환생쥐의 thymus, spleen, liver에 DT gene의 발현을 확인할 수 있었고, Northern blotting을 이용하여 형질전환생쥐의 thymus, spleen 및 liver에서 DT-A gene이 강하게 발현되는 것으로 나타났다. 형질전환생쥐 $F_1$ 및 $F_2$ 산자의 혈액에서 T-cell 발달의 분포도를 확인하기 위해 CD4 및 CD8 antibody를 이용하여 FACS analysis를 실시하였는데 형질전환생쥐의 혈액 내 mature T-cell인 single positive thymocyte의 수가 정상생쥐에 비해 감소하는 경향을 나타냈다. 정상생쥐의 혈액 내 T-cell 중 $CD8^{+}$ T-cell의 경우 약 50%를 나타냈으나 형질전환생쥐의 경우 33%로 감소하였고, $CD4^{+}$ T-cell은 정상생쥐에서 10%를 차지하고 있으나 형질전환생쥐에서는 5.9%로 감소되는 것으로 분석되었다. 그러므로 본 연구의 형질전환생쥐에서 lck promoter에 의해 초기 immature한 상태의 T-cell에서 DT-A gene이 발현되어 발육중인 T-cell이 파괴 되어 mature 상태인 $CD4^{+}CD8^{-}$나 $CD4^{-}CD8^{+}$ cells (single-positive)들이 감소된 것으로 확인되었다.
Cyclophosphamide(25, 50 or 100 mg/kg), orally administered to male Sprague-Dawley rats, caused a time- and dose-dependent thymic atrophy. In the light microscopic examination of the atrophic thymus, thymocytes with condensed or fragmented nucleus were multifocally observed in the cortical region, started to increase 8 hr after CPA treatment and reached to the maximal level at 16 hr, although such cells were not seen after 48 hr when the severe depletion of thymocytes were marked. In agarose gel electrophoresis to analyze the DNA changes, DNA extracted from atrophic thymus showed a oligonucleosomal laddering at the corresponding time to morphological changes. In an additional supportive experiment, thymocytes showing morphological changes, nuclear condensation or apoptotic body, exhibited a positive reaction to immunoperoxidase staining using in situ apoptosis detection kit. Separately, agarose gel electrophoresis of DNA from bone .marrow cells was performed to investigate the involvement of bone marrow cells in the process of thymocyte apoptosis. Although DNA laddering was slightly increased 2 and 4 hr after treatment, no clear correlation was inferred. Taken togather, it is concluded that thymocytes showing morphological changes in thymic atrophy induced by cyclophosphamide administration represent an apoptosis having biochemical nature of programmed cell death.
Objectives: Breast cancer is the most common cancer among women and has rapidly increasing rate annually. At present, western cancer therapies by surgery, radiation, and anticancer drug have not been fully effective. So many interests are given to herbal medicine on cancer treatment recently. This study was designed to investigate the effects of Curcuma longa L. (CL) on MDA-MB-231 human breast cancer cells and DMBA-induced breast cancer in rats. Methods: In this experiment, MDA-MB-231 cells were cultured in cell culture plates. 0.0625, 0.125, 0.25, 0.5, 1.0 mg/ml of CL extract were tested for their anti-proliferative effects on MDA-MB-231 cells by MMT assay. And we induced breast cancer in rats. The changes in tumor's weight, and the effects on proliferations of splenocyte and thymocyte were investigated. Results: CL showed anti-proliferative effects on MDA-MB-231 cells in proportion to concentration of the CL. DMBA-induced breast cancer in rats, tumor's weight of the rat was not statistically significant, but showed a tendency to be reduced in the groups treated with CL. Proliferation rate of the rat's splenocyte and thymocyte increased in proportion to CL. In breast cancer tissue, expression of ER-${\alpha}$ was weakened proportionately to the concentration of the CL. Conclusions: These data suggest that CL can prevent the proliferation of breast cancer, then CL is useful to treat patient with breast cancer.
The effects of Sagunjatang and Samultang on the immunosuppression induced by methotrexate(MTX) in rats were investigated in this study. The multiple parameters of immunity assessed in each rats included leukocyte count, lymphocyte rate, the number of lymphocyte in tibial bone marrow, contact hypersensitivity to DNFB, morphological change of thymocyte and IgG antibody on SDS-PAGE. Sprague-Dawley male rats were used and divided into five groups at random. Group A was normal control. Group B, the MTX treatment control, was injected i.v. with 2mg/kg of on days 9, 11 after sensitization with SRBC on 5th day. Group C, the experimental control, was treated Sagunjatang for 18days and MTX. Group D was treated Samultang for 18days and MTX. Group E was treated Sagunjatang-Samultang for 18days and MTX. The dosage of Sagunjatang and Samultang was $1m{\ell}/day$ respectively. In the case of Group E, rats Were fed Sagunjatang $1m{\ell}$ in the morning and Samultang $1m{\ell}$ in the afternoon. The results are summarized as follows: 1. Leukocyte count in rats induced by intravenous sensitization with SRBC was decreased significantly in Group E. 2. Leukocyte counts of 2weeks later after being treated MTX were increased significantly in Groups C and D. 3. Lymphocyte rate in rats induced by intravenous sensitization with SRBC wasn't changed significantly in all the experimental groups. 4. Lymphocyte rate of 2weeks. later after being treated MTX was increased significantly in Group D. 5. The number of lymphocyte in tibial bone marrow was incereased significantly in Group C. 6. Contact hypersensitivity wasn't changed significantly in all the experimental groups. 7. Morphological finding of thymocyte in group C was similar to normal group as compared with control group. 8. Purified IgG of all the experimental groups showed two bands of 50,000 and 25,000 on SDS-PAGE. But there was no difference among experimental groups.
The purpose of this research was to investigate the effects of Bojunglkgi-tang water extract (BE) on the specific immune response in BALB/c mice. When BE (500mg/kg) was administerd p.o. once a day for 7 days to BALB/c mice, the cell viability of splenocytes was increased and DNA fragmentation of splenocytes was decreased. But, BE did not affect the cell viability and DNA fragmentation of thymocytes. Also, BE increased the population of Thy1/sup +/ cells and TH cells in splenocytes. In addition, BE increased the production of γ -interferon from splenocytes. These results suggest that BE enhances the specific immune response via activation of TH1 cells in splenocytes.
The purpose of this research was to investigate the immunoregulatory effect, apoptosis of L 1210 leukemia cells of Comus officinalis Sieb.et Zucc. The proliferation of cultured splenocytes and thymocytes were enhanced by the addition of SSY. Splenic, thymic and mesenteric lymph node-T lymphocytes, especially TH cells was significantly increased in SSY-administered (p.o. for 7 days) mice. SSY treatment induced the apoptosis of L1210 mouse leukemia cells. In addition, SSY accelerated the phagocytic activity and nitric oxide production in peritoneal macrophages. These results suggest that SSY have an immuno-regulatory property and anti-cancer effect.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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