The objectives of this study were: i) to detect the presence of Staphylococcus aureus and methicillin-resistant S. aureus (MRSA) in raw milk, cheese, beef minced meat, and chicken meat samples; ii) to evaluate the antimicrobial susceptibility of the isolates; and iii) to determine clonal relation among the isolates by using pulsed-field gel electrophoresis (PFGE) method. Therefore, a total of 160 food samples were randomly collected between August 2014 and May 2015 in Hatay province, located in the southern Turkey. Twenty (12.5%) of the samples were found to be contaminated with S. aureus. A total of 40 isolates from the 20 positive samples were confirmed to be S. aureus by multiplex PCR based on 16S rRNA and nuc gene. The mec A gene was not detected in any of the S. aureus strains. In the present study, 39 out of 40 (97.5%) isolates were found to be resistant to one or more antibiotics. All of isolates were susceptible to gentamicin, oxacillin, and vancomycin. The highest resistance rate was detected in penicillin (95%) and ampicillin (92.5%), followed by tetracycline (30%), erythromycin (20%), ciprofloxacin (12.5%). Nine major patterns were determined by PFGE. In 6 of these patterns, thirty-six strains (90%) had identical PFGE profiles.
Helicobacter pylori as the second most common cause of gastric cancer in the world infects approximately half of the developed countries population and 80% of the population living in developing countries. Integrons as genetic reservoirs play major roles in dissemination of antimicrobial resistance genes. To the best of our knowledge, this is the first study to report carriage of class 1 and 2 integrons and associated gene cassettes in H. pylori isolates from Iran. This cross-sectional study was conducted in Tehran among 110 patients with H. pylori infection. Antimicrobial susceptibility testing (AST) for H. pylori strains were assessed by the micro broth dilution method. Class 1 and 2 integrons were detected using PCR. In order to determine gene cassettes, amplified fragments were subjected to DNA sequencing of both amplicon strands. The prevalence of resistance to clarithromycin, metronidazole, clarithromycin, tetracycline, amoxicillin, rifampin, and levofloxacin were 68.2% (n=75), 25.5% (n=28), 24.5% (n=27), 19.1% (n=21), 18.2% (n=20) and 16.4% (n=18), respectively. Frequency of multidrug resistance among H. pylori isolates was 12.7%. Class 2 integron was detected in 50 (45.5%) and class 1 integron in 10 (9.1%) H. pylori isolates. The most predominant gene cassette arrays in class 2 integron-bearing H. pylori were included sat-era-aadA1, dfrA1-sat2-aadA1, blaoxa2 and, aadB whereas common gene cassette arrays in class 1 integron were aadB-aadA1-cmlA6, aacA4, blaoxa2, and catB3. The high frequency of class 2 integron and multidrug resistance in the present study should be considered as a warning for clinicians that continuous surveillance is necessary to prevent the further spread of resistant isolates.
Kim, Seon-Mi;Choi, Nam-Ki;Cho, Seong-Hoon;Lee, Seok-Woo;Lim, Hoi-Jeong;Lim, Hoi-Soon;Kang, Mi-Sun;Oh, Jong-Suk
Journal of the korean academy of Pediatric Dentistry
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v.38
no.2
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pp.170-178
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2011
The purpose of this study was to assess the prevalence of periodontopathic bacteria and resistance determinants from oral biofilm of children. Subgingival dental plaque was isolated from 87 healthy children, and PCR was performed to determine the presence of 5 periodontal pathogens including P. gingivalis, T. forsythia, T. denticola, F. nucleatum, A. actinomycetemcomitans, and nine resistance genes including tet(Q), tet(M), ermF, aacA-aphD, cfxA, $bla_{SHV}$, $bla_{TEM}$, vanA, mecA. 1. The prevalence of F. nucleatum, T. forsythia. and P. gingivalis was 95.4%, 55.2%, and 40.2%, respectively. In addition. the prevalence of A. actinomycetemc omitans was 5.7%, while T. denticola was 3.4%. 2. In analysis of antibiotic resistance determinants. cfxA, $bla_{TEM}$ and tet(M) were detected in all the samples tested. It was also found that the prevalence of tet(Q) showing tetracycline resistance. $bla_{SHV}$ associated with resistance to ${\beta}$-lactams, ermF exhibiting erythromycin resistance, and, vanA resulting vancomycin resistance was 88.5%, 29.9% 87.4%, and 48.5%, respectively. The aacA-aphD gene showing resistance to aminoglycosides and mecA gene harboring methicillin resistance exhibited the lowest prevalence with 9.2%. 3. In a correlation analysis between periodontopathic pathogens and antibiotic resistance determinants, it was found that there was a significant correlation between T. forsythia and $bla_{SHV}$. Also, P. gingivalis and vanA showed a correlation. Finally, tet(Q) and ermF showed a significant correlation (phi: 0.514) while mecA and vanA also showed a correlation(phi: 0.25).
An antimicrobial susceptibility test was conducted to compare the resistance rates among Campylobacter spp. isolates from dogs (n = 50) raised under diverse conditions and humans (n = 50). More than 60% of Campylobacter (C.) jejuni from dogs and humans showed resistance to nalidixic acid, enrofloxacin and ciprofloxacin. C. jejuni isolates from humans showed higher resistance to tetracycline (83.3%) and ampicillin (91.3%) than those from dogs. None of the C. jejuni or Campylobacter coli isolates from humans or dogs were resistant to erythromycin. Overall, 85% of Campylobacter spp. isolates showed a multidrug resistant phenotype. Nucleotide sequencing analysis of the gryA gene showed that 100% of $NA^R/CIP^R$ C. jejuni isolates from dogs and humans had the Thr-$86^{th}$-Ile mutation, which is associated with fluoroquinolone resistance. flaA PCR restriction fragment length polymorphism (RFLP) typing to differentiate the isolates below the species level revealed 12 different clusters out of 73 strains. The human isolates belonged to eight different RFLP clusters, while five clusters contained dog and human isolates.
Oh, Sang-Ik;Kim, Jong Wan;Kim, Jongho;So, Byungjae;Kim, Bumseok;Kim, Ha-Young
Journal of Veterinary Science
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v.21
no.4
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pp.57.1-57.11
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2020
Background: Streptococcus dysgalactiae subspecies equisimilis (SDSE) acts as an etiological agent for lameness, neurological signs, and high mortality in pigs. Despite its importance in pig industries and zoonotic potential, little is known about the effects of this pathogen. Objectives: This study aimed to determine the molecular characteristics and antimicrobial resistance of SDSE strains isolated from diseased pigs. Methods: A total 11 SDSE isolates were obtained from diseased pigs. Bacterial identification, PCR for virulence genes, emm typing, and antimicrobial resistance genes, multilocus sequence typing, and antimicrobial susceptibility test were performed. Results: Nine isolates were from piglets, and 8 showed lameness, sudden death, or neurological signs. The isolates were PCR-positive for sla (100%), sagA (100%), and scpA (45.5%), and only 1 isolate amplified the emm gene (stL2764). Eight different sequence types were detected, categorized into 2 clonal complexes and 4 singletons. All the isolates in this study were included in a small cluster, which also contained other strains derived from humans and horses. The minimum inhibitory concentrations for the tested beta-lactams were low, while those for macrolides, tetracyclines, and fluoroquinolones were relatively high. PCR analysis of the macrolide and tetracycline resistance genes demonstrated that the isolates carried erm(B) (18.2%, n = 2), mef(A/E) (9.1%, n = 1), tet(M) (18.2%, n = 2), and tet(O) (90.2%, n = 10). Two isolates presented a mutation in parC, which is associated with fluoroquinolone resistance. Conclusion: This study provided insight into swine-derived SDSE, as it is related to veterinary medicine, and elucidated its zoonotic potential, in the context of molecular epidemiology and antimicrobial resistance in public health.
Spore-forming Bacillus species are commercially available probiotic formulations for application in humans. They have health benefits and help prevent disease in hosts by combating entero-pathogens and ameliorating antibiotic-associated diarrhea. However, the molecular and cellular mechanisms of these benefits remain unclear. Here, we report the draft genome of a potential probiotic strain of Bacillus clausii B106. We mapped and compared the probiotic profile of B106 with other reference genomes. The draft genome analysis of B106 revealed the presence of ADI pathway genes, indicating its ability to tolerate acidic pH and bile salts. Genes encoding fibronectin binding proteins, enolase, as well as a gene cluster involved in the biosynthesis of exopolysaccharides underscored the potential of B106 to adhere to the intestinal epithelium and colonize the human gut. Genes encoding bacteriocins were also detected, indicating the antimicrobial ability of this isolate. The presence of genes encoding vitamins, including Riboflavin, Folate, and Biotin, also indicated the health-promoting ability of B106. Resistance of B106 to multiple antibiotics was evident from the presence of genes encoding resistance to chloramphenicol, ${\beta}$-lactams, Vancomycin, Tetracycline, fluoroquinolones, and aminoglycosides. The findings indicate the significance of B. clausii B106 administration during antibiotic treatment and its potential value as a probiotic strain to replenish the health-promoting and disease-preventing gut flora following antibiotic treatment.
Clostridium difficile present in feces of food animals may contaminate their meats and act as a potential source of C. difficile infection (CDI) to humans. C. difficile resistance to antibiotics, its production of toxins and spores play major roles in the pathogenesis of CDI. This is the first study to evaluate C. difficile prevalence in retail raw animal meats, its antibiotics susceptibilities and toxigenic activities in Al-Jouf, Saudi Arabia. Totally, 240 meat samples were tested. C. difficile was identified by standard microbiological and biochemical methods. Vitek-2 compact system confirmed C. difficile isolates were 15/240 (6.3%). Toxins A/B were not detected by Xpect C. difficile toxin A/B tests. Although all isolates were susceptible to vancomycin and metronidazole, variable degrees of reduced susceptibilities to moxifloxacin, clindamycin or tetracycline antibiotics were detected by Epsilon tests. C. difficile strains with reduced susceptibility to antibiotics should be investigated. Variability between the worldwide reported C. difficile contamination levels could be due to absence of a gold standard procedure for its isolation. Establishment of a unified testing algorithm for C. difficile detection in food products is definitely essential to evaluate the inter-regional variation in its prevalence on national and international levels. Proper use of antimicrobials during animal husbandry is crucial to control the selective drug pressure on C. difficile strains associated with food animals. Investigating the protective or pathogenic potential of non-toxigenic C. difficile strains and the possibility of gene transfer from certain toxigenic/ antibiotics-resistant to non-toxigenic/antibiotics-sensitive strains, respectively, should be worthy of attention.
Seventy-five Vibrio parahaemolyticus isolates from the surface seawater of the Geum River Estuary area, on the west coast of Korea, were analyzed for the presence of virulence genes and susceptibility to 17 different antimicrobials. All 75 isolates were examined for the presence of two virulence genes (tdh or trh) using polymerase chain reaction; Only one of the isolates possessed the tdh or trh gene. According to the results of disk diffusion susceptibility tests, all of the strains were resistant to penicillin G, 92.0% were resistant to ampicillin, 82.7% were resistant to amoxicillin, 2.7% were resistant to ciprofloxacin, 2.7% were resistant to trimethoprim, 1.3% were resistant to cephalothin, and 1.3% were resistant to erythromycin. However, all of the strains were susceptible to amikacin, cefoxitin, chloramphenicol, gentamycin, kanamycin, nalidixic acid, nitrofurantoin, rifampin, streptomycin, and tetracycline. The average minimum inhibitory concentrations for ampicillin for V. parahaemolyticus was 557.6 ㎍/mL. These results not only provide novel insight into the necessity for seawater sanitation in Geum river estuary area, but they help reduce the risk of contamination of antimicrobial-resistant bacteria.
Jeong, Hye Jin;Lee, Min Gyou;Lee, Hyang Hee;Seo, Si Eun;Jeong, So Hyang;Cho, Bae Sik;Seo, Jung Mi
Journal of Food Hygiene and Safety
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v.37
no.2
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pp.63-68
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2022
The purpose of this study is to investigate the distribution of toxin genes and antimicrobial resistance of Vibrio parahaemolyticus isolated from seafood in Gwangju. A total of 335 seafood, including 163 shellfish, 97 fish, and 36 mollusk, were tested in this study. As a result, V. parahaemolyticus was detected in 123 (36.7%) of 335 seafood. The tdh gene was not detected in all strains, while the trh gene was detected in 3 strains (2.4%). According to antimicrobial susceptibility test, 116 strains (94.3%) represent resistance to ampicillin, and 1 strain (0.8%) represents resistance to trimethoprim/sulfametoxazole. However, all strains were sensitive to 9 antimicrobial agents, including amikacin, chloramphenicol, tetracycline, and more. Therefore, the risk of V. parahaemolyticus isolated from seafood in Gwangju is considered low, but continuous monitoring of V. parahaemolyticus in seafood is required.
The experiments were carried out to determine the optimum conditions for the induction of hairy roots in ginseng(Panax ginseng C.A. Meyer) by Agrobacterium spp. We were examined the antibiotics resistance of Agrobacterium spp and various ginseng parts, and the media for induction of hairy roots. The optimum concentration of NaOCl for sterilization of ginseng root segments without tissue damage with reduce of contamination was 7% NaOCl for 15-20 min and 9% NaOCl for 5 min, respectively. The more ginseng ages, the more contamination of ginseng root segment by sterilized in 7% NaOCl for 20 min, and especially in ginseng root segments with epidermis in six-year old roots. The growth of Agrobacterium spp were inhibited, but ginseng root segments was death in 30mg/L tetracycline. In 500mg/L cefotaxime or 500mg/L carbenicillin, the growth of Agrobacterium sup were inhibited, and root segments was grown normally. The optimum conditions for induction of hairy roots were using the root segments of three-year old ginseng cultured in 1/2MS medium supplemented with 500mg/L cefotaxime, and inoculation of Agrobacterium to root segments were better co-culture than smear method. After 2 weeks co-culture, the callus induced in cambium of root segments cultured in 1/2MS solid medium with 500mg/L cefotaxime. And then after 2 weeks, ginseng hairy roots were induced in callus of root segments. PCR analysis of rot C gene fragment confirmed that hairy roots were transgenic tissues.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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