본 연구에서는 닭의 정소 및 정자에 대한 기능 유전체 연구를 위한 자원을 확보할 수 있도록 정소 특이적유전자로 예상되는 후보 염기서열을 분석하였다. TIGR Gallus gallus Gene Index 상의 데이터베이스에서 닭의 정소에서만 나타나는 것으로 공개된 EST 염기서열을 검색하여 나온 총 292개의 서열을 선택하였으며, 이와 같이 선별된 서열들에 대하여 닭의 정소와 난소를 포함한 다양한 조직에서 전사체의 발현을 검증하였다. 결과에서, 총 292개의 염기서열 중 110개가 정소 특이적인 발현을 나타내었다. Tentative consensus sequence (TC) 상에서 집합된 EST의 수와 정소 특이적으로 발현하는 TCs의 수 사이의 상관관계는 발견되지 않았다. Gene Ontology 데이터베이스 용어를 이용하여 분류한 결과에서는 정소특이적인 TC는 닭의 전체 TC를 분류한 것과 비교하면 catalytic activity (Molecular Functionbranch)의 카테고리에 많은 수의 TC가 포함된 것으로 나타났다. 본 연구의 결과는 닭의 정소 특이적 유전자에 대한 연구와 그 기능 분석을 보다 더욱 촉진시킬 수 있을 것이다.
Kim, Min;Ki, Byeong Seong;Hong, Kwonho;Park, Se-pill;Ko, Jung-Jae;Choi, Youngsok
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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제29권7호
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pp.944-951
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2016
Tdrd12 is one of tudor domain containing (Tdrd) family members. However, the expression pattern of Tdrd12 has not been well studied. To compare the expression levels of Tdrd12 in various tissues, real time-polymerase chain reaction was performed using total RNAs from liver, small intestine, heart, brain, kidney, lung, spleen, stomach, uterus, ovary, and testis. Tdrd12 mRNA was highly expressed in testis. Antibody against mouse TDRD12 were generated using amino acid residues SQRPNEKPLRLTEKKDC of TDRD12 to investigate TDRD12 localization in testis. Immunostaining assay shows that TDRD12 is mainly localized at the spermatid in the seminiferous tubules of adult testes. During postnatal development, TDRD12 is differentially expressed. TDRD12 was detected in early spermatocytes at 2 weeks and TDRD12 was localized at acrosome of the round spermatids. TDRD12 expression was not co-localized with TDRD1 which is an important component of piRNA pathway in germ cells. Our results indicate that TDRD12 may play an important role in spermatids and function as a regulator of spermatogenesis in dependent of TDRD1.
To elucidate the relationship between steroidogenesis and sex differentiation in the duck, plasma, testicular and ovarian testosterone, estradiol-$17{\beta}$ and progesterone concentration in male and female embryo of day 11 to 27 (just before hatching) of incubation and in 1- to 7-day-old male and female duckling were investigated by radioimmunoassays. Plasma estradiol-$17{\beta}$ concentration in female embryos declined from very high at days 11 and 15 of incubation and remained at low levels after hatching. Male plasma estradiol-$17{\beta}$ concentration were always lower than those of the female throughout this period. Plasma testosterone and progesterone concentrations in both sexes were low during the embryonic stage, but then increased to peaks 3 days and 1 day after hatching, respectively. Estradiol-$17{\beta}$ contents were much higher in the left ovary than the right ovary or testes throughout the experimental period. The estradiol-$17{\beta}$ content of the left ovary was very high at day 15 of incubation, and decreased gradually thereafter. Both in right ovary and testes, estradiol-$17{\beta}$ contents were always low. Testosterone and progesterone contents in the left ovary were low from day 11 to 23 of incubation, and reached a peak 1 day after hatching. Progesterone content in the right ovary and testes were low levels over time period examined. Testosterone and progesterone contents were much higher in the left ovary than the right ovary and testes. The present results clearly demonstrate that the capacity of the embryonic left ovary of duck to synthesize estradiol-$17{\beta}$ and testosterone is much higher than that of the embryonic testis. It is suggested that estrogen secreted from the embryonic ovary earlier than day 15 of incubation has an important role in female sexual differentiation in the duck, and the sex of the avian species is basically male with homozygous sex chromosome (ZZ).
We analyzed the compositions of proximate and total fatty acids in the reproductive organs of male (testis, vas deferens, seminal vesicle, and spermatophore sac) and female (ovary, oviduct, oviducal gland, and nidamental gland) common squid. The protein contents were 12.1-22.7 and 13.2-19.4% for males and females, respectively, and the lipid contents were 1.0-2.7 and 2.1-8.0%, respectively. The prominent fatty acids in all reproductive organs were 22:6n-3, 20:5n-3, 16:0, 20:1n-9, 18:0, 18:1n-9, and 20:4n-6. Females had 28.6-32.0% of 22:6n-3 and 11.3-22.6% of 20:5n-3, while males had 20.8-26.8% of 22:6n-3 and 14.4-28.7% of 20:5n-3. These results indicate that the reproductive organs of both male and female squid are potential sources of n-3 polyunsaturated fatty acid.
본 연구는 돼지에서 특이적으로 만들어지는 것으로 알려진 19-nortestosterone(nandrolone) 및 여성호르몬(estrogen)의 합성에 관여하는 효소인 Cytochrome P450 aromatase에 대한 유전자의 발현 양상을 밝혀내기 위해 실시되었다. RT-PCR과 최근에 개발된 DHPLC(Denature High Performance Liquid Chromatography 또는 WAVE라고 함) 분석 장치를 이용하여 정소와 난소에서 어떤 isoform의 aromatase 유전자가 발현되는지에 관해 조사하였다. 이러한 방법을 통해 같은 양의 RNA 중에 존재하는 정소내 aromatase mRNA가 난소보다 상대적으로 많이 존재한다는 것이 밝혀졌으며, 이는 돼지의 경우 수컷이 암컷 보다 혈중 여성호르몬이 더 높게 나타난다는 이전의 연구 발표가 돼지에서 여성호르몬을 만드는 aromatase 유전자가 난소에 비해 정소에서 더 많이 만들어지기 때문이라는 사실을 입증하였다. 또한, 정소와 난소에서 발현되는 aromatse 유전자를 PCR를 이용하여 증폭한 후 DHPLC를 이용하여 분석한 결과 type II, III와 다르다는 것을 확인하였다. RT-PCR에 의해 증폭된 aromatase DNA 단편을 plasmid vector에 cloning한 후에 그 염기 서열을 분석한 결과, 정소 및 난소에서 발현되는 aromatse는 모두 type I(난소형)으로 밝혀졌다. 이는 어떻게 정소와 난소의 두 다른 조직에서 같은 aromatase 효소로부터 다른 steroid가 만들어 질 수 있는지에 대한 새로운 의문을 제시하는 연구결과이며, 현재 추가적인 연구가 진행 중이다. 또한, DHPLC 기술을 활용하여 염기서열이 매우 유사한 isoform 유전자들의 발현을 관찰할 수 있다는 사실이 증명되었다.
목 적: 본 연구에서는 EST Clustering 방법을 이용하여 이전의 연구에서 발굴한 B357 EST의 염기서열을 포함하는 유전자를 동정하고, 이 유전자의 발현을 생쥐의 난소와 정소를 포함한 여러 가지 조직들에서 살펴보고자 하였다. 연구방법: EST Clustering으로 얻어진 전체 염기서열을 5-day-ovary-specific gene-1 (5DOS1)이라고 명명하여 GenBank에 등록하였으며 (AY751521), northern blotting, real-time RT-PCR, in situ hybridization, western blotting, immunohistochemistry 등의 방법을 이용하여 생쥐 난소와 고환의 발달단계에 따라 그 발현양상을 관찰하였다. 결 과: 5DOS1의 전사체는 성장한 정소, 뇌, 근육에서 높게 발현하였으며, 난소의 경우에서는 원시난포시기부터 모든 난자에서 발현하였으며 특히 생후 5일째 높게 발현하였고 그 이후로는 점차 감소하였다. 반면 정소의 경우는 발달과 함께 계속 증가하였으며, 정모세포를 제외한 모든 발달단계별 정자에서 발현함을 관찰하였다. 결 론: 본 연구결과는 5DOS1에 대한 발견과 동정에 대한 첫 보고로써, 유전자 및 단백질이 생쥐의 난소 및 정소의 생식세포에서 발현하는 것을 관찰하였다. 앞으로 생식세포 발생 및 분화에 관련된 5DOS1의 기능에 대한 심층 연구가 더 필요하다고 사료된다.
Ki, Byeong Seong;Park, Miree;Woo, Yunmi;Lee, Woo Sik;Ko, Jung Jae;Choi, Youngsok
Reproductive and Developmental Biology
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제39권2호
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pp.43-47
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2015
Sirtuin proteins are evolutionary conserved Sir2-related $NAD^+$-dependent deacetylases and regulate many of cellular processes such as metabolism, inflammation, transcription, and aging. Sirtuin contains activity of either ADP-ribosyltransferase or deacetyltranfease and their activity is dependent on the localization in cells. However, the expression pattern of Sirtuins has not been well studied. To examine the expression levels of Sirtuins, RT-PCR was performed using total RNAs from various tissues including liver, small intestine, heart, brain, kidney, lung, spleen, stomach, uterus, ovary, and testis. Sirtuins were highly expressed in most of tissues including the testis. Immunostaining assay showed that Sirt1 and Sirt6 were mainly located in the nucleus of germ cells, spermatocytes, and spermatids in the seminiferous tubules, whereas Sirt2 and Sirt5 were exclusively present in the cytoplasm of germ cells and spermatocytes. Our results indicate that Sirtuins may function as regulators of spermatogenesis and their activities might be dependent on their location in the seminiferous tubules.
The weekly liveweight gain, growing and stress parameters of quails bred using two different types of lighting for 6 weeks following hatching were examined in this study. The first type of lighting was 23 L:1 D, continuous lighting (CL), widely used in the commercial system and the second was a self-photoperiod (SP) system consisting of a continuously lit chamber and a dark chamber the quails could move to as they wished. On the first 15 days, no difference was found in liveweight gain between the two breeding systems. On the $6^{th}$ week when the trial was completed, the liveweight of the male quails upon which CL lighting was used was 159.03 g while the weight of males in the SP group was 174.43 g; these values in female quails of the CL group were 179.15 g and in the SP group were 200.68 g. The CL group had lower testis volume (TVOM, $cm^{3}$) and testis weight (TW, g) than the SP group, however there was no difference between the groups in testis weight/body weight rate (BWTW %). In female quails, the ovary weight (OW, g) and the ovary weight/body weight rate (BWOW, %) values were higher in the SP group. The CL light regime was concluded to cause stress in male quails (CL, Heterophil/Lymphocyte ratio (H/L): 0.27; SP, H/L: 0.17). In conclusion; the SP system allowing the quails to regulate their light periods increased liveweight gain and enabled sexual maturity to be gained at an earlier period than in quail on the CL system and improved their welfare.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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