Objective: Numerous studies have indicated that the apoptosis and proliferation of granulosa cells (GCs) are closely related to the normal growth and development of follicles and ovaries. Previous evidence has suggested that miR-126-3p might get involved in the apoptosis and proliferation of GCs, and phosphatidylinositol 3-kinase regulatory subunit 2 (PIK3R2) gene has been predicted as one target of miR-126-3p. However, the molecular regulation of miR-126-3p on PIK3R2 and the effects of PIK3R2 on porcine GCs apoptosis and proliferation remain virtually unexplored. Methods: In this study, using porcine GCs as a cellular model, luciferase report assay, mutation and deletion were applied to verify the targeting relationship between miR-126-3p and PIK3R2. Annexin-V/PI staining and 5-ethynyl-2'-deoxyuridine assay were applied to explore the effect of PIK3R2 on GCs apoptosis and proliferation, respectively. Real-time quantitative polymerase chain reaction and Western Blot were applied to explore the regulation of miR-126-3p on PIK3R2 expression. Results: We found that miR-126-3p targeted at PIK3R2 and inhibited its mRNA and protein expression. Knockdown of PIK3R2 significantly inhibited the apoptosis and promoted the proliferation of porcine GCs, and significantly down-regulated the mRNA expression of several key genes of PI3K pathway such as insulin-like growth factor 1 receptor (IGF1R), insulin receptor (INSR), pyruvate dehydrogenase kinase 1 (PDK1), and serine/threonine kinase 1 (AKT1). Conclusion: MiR-126-3p might target and inhibit the mRNA and protein expressions of PIK3R2, thereby inhibiting GC apoptosis and promoting GC proliferation by down-regulating several key genes of the PI3K pathway, IGF1R, INSR, PDK1, and AKT1. These findings would provide great insight into further exploring the molecular regulation of miR-126-3p and PIK3R2 on the functions of GCs during the folliculogenesis in female mammals.
Kim, Hye-Rim;Kwon, Soo-Jeong;Roy, Swapan Kumar;Cho, Seong-Woo;Kim, Hag-Hyun;Moon, Young-Ja;Boo, Hee-Ock;Woo, Sun-Hee
KOREAN JOURNAL OF CROP SCIENCE
/
v.60
no.3
/
pp.394-400
/
2015
The roots of Platycodon grandiflorum species either dried or fresh, are used as an ingredient in salads and traditional cuisine in Korea. To interpret the root proteins, a systematical and targeting analysis were carried out from diploid and tetraploid roots. Two dimensional gels stained with CBB, a total of 39 differential expressed proteins were identified from the diploid root under in vivo condition using image analysis by Progenesis Same Spot software. Out of total differential expressed spots, 39 differential expressed protein spots (${\geq}\;1.5$-fold) were analyzed using LTQ-FTICR mass spectrometry. Except two proteins, the rest of the identified proteins were confirmed as down-regulated such as Isocitrate dehydrogenase, Proteasome subunit alpha type-2-B. However, the most of the identified proteins from the explants were mainly associated with the oxidoreductase activity, nucleic acid binding, transferase activity and catalytic activity. The exclusive protein profile may provide insight clues for better understanding the characteristics of proteins and metabolic activity in various explants of the economically important medicinal plant Platycodon grandiflorum.
Verticillium wilt disease is caused by a fungal plant pathogen Verticillium dahliae, which attacks commercial crops such as chrysanthemum. The conventional methods so far used to identify this fungal pathogen require high expertise and are time-consuming. Therefore, in this study, we developed an assay for the rapid and specific detection of V. dahliae infection using loop-mediated isothermal amplification (LAMP) method. For this assay, four primers for LAMP were designed for targeting cellulose-growth-specific protein partial mRNA gene in Verticillium dahliae. Under standard condition, the optimum reaction temperature for amplification is around 60 ℃ within 60 minutes. This LAMP assay was designed to amplify only present in V. dahliae. When this LAMP assay applied to the DNAs for four other soil-borne fungi and host plants, no amplification was detected. Therefore, this LAMP assay we developed for V. dahliae is expected to do detection at the early stage of its infection. The fast and reliable detection method will allow us to develop effective management system to monitor and control infection of this pathogen in chrysanthemum plant.
Sixteen lactic acid bacterial strains were isolated from silage and cow dung samples, and characterized to identify their potential as silage additives. They were identified as the members of the genera Lactobacillus, Enterococcus, and Weissella, and clustered into nine groups based on the sequences of the genes for 16S rRNA, RNA polymerase alpha subunit, 60-kDa heat shock protein, and phenylalanyl-tRNA synthase alpha subunit. Among them, the three strains which were genetically similar to L. plantarum showed the fastest growth and pH decrease in MRS and rye extract media, the highest numbers of available carbohydrates, and the widest ranges of pH, temperature, and salinity for growth. In addition, they showed no amplified DNA products in the PCR examination targeting the genes for the production of biogenic amines, and the MRS media where they had been cultured showed relatively high inhibition effect against the growth of silage-spoiling microorganisms, including fungi, yeast, and clostridia. The results suggest that these strains are good candidates for silage additives. However, the rye extract media where the lactic acid bacteria had been cultured had no effect on or stimulated the growth of the silage-spoiling microorganisms, and the causes must be established for the practical use of the lactic acid bacteria as silage additives.
Wntless/GPR177 functions as WNT ligand carrier protein and activator of $WNT/{\beta}$-catenin signaling, however, its molecular role in gastric cancer (GC) has remained elusive. We investigated the role of GPR177 in gastric tumorigenesis and provided the therapeutic potential of a clinical development of anti-GPR177 monoclonal antibodies. GPR177 mRNA expression was assessed in GC transcriptome data sets (GSE15459, n = 184; GSE66229, n = 300); protein expression was assessed in independent patient tumor tissues (Yonsei TMA, n = 909). GPR177 expression were associated with unfavorable prognosis [log-rank test, GSE15459 (P = 0.00736), GSE66229 (P = 0.0142), and Yonsei TMA (P = 0.0334)] and identified as an independent risk predictor of clinical outcomes: GSE15459 [hazard ratio (HR) 1.731 (95% confidence interval; CI; 1.103-2.715), P = 0.017], GSE66229 [HR 1.54 (95% CI, 1.10-2.151), P = 0.011], and Yonsei TMA [HR 1.254 (95% CI, 1.049-1.500), P = 0.013]. Either antibody treatment or GPR177 knockdown suppressed proliferation of GC cells and sensitized cells to apoptosis. And also inhibition of GPR177 suppresses in vitro and in vivo tumorogenesis in GC cells and inhibits $WNT/{\beta}$-catenin signaling. Finally, targeting and inhibition of GPR177 with antibody suppressed tumorigenesis in PDX model. Together, these results suggest GPR177 as a novel candidate for prognostic marker as well as a promising target for treatment of GC patients.
Lee, Su-Yeon;Kang, Youn-Jung;Kwon, Jinie;Nishi, Yoshihiro;Yanase, Toshihiko;Lee, Kyung-Ah;Koong, Mi Kyoung
Clinical and Experimental Reproductive Medicine
/
v.47
no.3
/
pp.194-206
/
2020
Objective: The aim of this study was to investigate microRNAs (miRNAs) related to follicle-stimulating hormone (FSH) responsiveness using miRNA microarrays and to identify their target genes to determine the molecular regulatory pathways involved in FSH signaling in KGN cells. Methods: To change the cellular responsiveness to FSH, KGN cells were treated with FSH receptor (FSHR)-specific small interfering RNA (siRNA) followed by FSH. miRNA expression profiles were determined through miRNA microarray analysis. Potential target genes of selected miRNAs were predicted using bioinformatics tools, and their regulatory function was confirmed in KGN cells. Results: We found that six miRNAs (miR-1261, miR-130a-3p, miR-329-3p, miR-185-5p, miR-144-5p and miR-4463) were differentially expressed after FSHR siRNA treatment in KGN cells. Through a bioinformatics analysis, we showed that these miRNAs were predicted to regulate a large number of genes, which we narrowed down to cytochrome P450 family 19 subfamily A member 1 (CYP19A1) and estrogen receptor alpha (ESR1) as the main targets for miR-4463. Functional analysis revealed that miR-4463 is a regulatory factor for aromatase expression and function in KGN cells. Conclusion: In this study, we identified differentially expressed miRNAs related to FSH responsiveness. In particular, upregulation of miR-4463 expression by FSHR deficiency in human granulosa cells impaired 17β-estradiol synthesis by targeting CYP19A1 and ESR1. Therefore, our data might provide novel candidates for molecular biomarkers for use in research into poor responders.
Objective: Apoptosis of ovarian granulosa cells (GCs) affects mammalian follicular development and fecundity. This study aimed to explore the regulatory relationship between microRNA-26a (miR-26a) and the 3β-hydroxysteroid-Δ24-reductase gene (DHCR24) gene in porcine follicular granular cells (pGCs), and to provide empirical data for the development of methods to improve the reproductive capacity of pigs. Methods: The pGCs were transfected with miR-26a mimic, miR-26a inhibitor and DHCR24-siRNA in vitro. The cell apoptosis rate of pGCs was detected by the flow cytometry. The secretion levels of estradiol (E2) and progesterone (P) in pGCs were detected by enzyme-linked immunosorbent assay. Double luciferase validation system was used to detect the binding sites between miR-26a and DHCR24 3'-UTR region. Qualitative real-time polymerase chain reaction and Western blotting were used to verify the DHCR24 mRNA and protein expression in pGCs, respectively, after transfecting with miR-26a mimic and miR-26a inhibitor. Results: Results showed that enhancement of miR-26a promoted apoptosis, and inhibited E2 and P secretion in pGCs. Meanwhile, inhibition of DHCR24 also upregulated the Caspase-3 expression, reduced the BCL-2 expression, promoted pGCs apoptosis, and inhibited E2 and P secretion in pGCs. There were the binding sites of miR-26a located within DHCR24 3'-UTR. Up-regulation of miR-26a inhibited DHCR24 mRNA and protein expression in pGCs. Conclusion: This study demonstrates that miR-26a can promote cell apoptosis and inhibit E2 and P secretion by inhibiting the expression of DHCR24 in pGCs.
Previously, two events (H15 and B20) of transgenic pepper (Capsicum annuum L.) that enhanced resistance to Cucumber mosaic virus (CMV) by the introduction of CMV coat protein (CP) gene were constructed. Presently, a single copy number of the CP gene was revealed in H15 and B20 by Southern blot. To predict possible unintended effects due to transgene insertion in an endogenous gene, we carried out sequencing of the 5'-flanking region of the CP gene and a Blastbased search. The results revealed that insertion of the transgene into genes encoding putative proteins may occur in the H15 and B20 transgenic event. Mutiplex polymerase chain reaction (PCR) for simultaneous detection and identification of transgenic pepper was conducted with a set of nine primers. Both transgenic event were differentiated from non-transgenic event by the presence of 267 bp and 430 bp PCR products indicative of CP gene specific primer pairs and primer pairs targeting the CP gene and 35S promoter. H15 and B20 uniquely possessed a 390 bp and 596 bp PCR product, respectively. The presence of a 1115 bp product corresponding to intrinsic pepper actin gene confirmed the use of pepper DNA as the PCR template. The primer set and PCR conditions used presently may allow the accurate and simple identification of CMV resistant transgenic pepper.
Exposure of the skin to ultraviolet radiation can cause skin damage with various pathological changes including inflammation. In the present study, we identified the skin-protective activity of 1,2,3,4,6-penta-O-galloyl-${\beta}$-D-glucose (pentagalloyl glucose, PGG) in ultraviolet B (UVB) radiation-induced human dermal fibroblasts and mouse skin. PGG exhibited antioxidant activity with regard to intracellular reactive oxygen species (ROS) generation as well as ROS and reactive nitrogen species (RNS) scavenging. Furthermore, PGG exhibited anti-inflammatory activity, inhibiting the activation of nuclear factor-kappaB (NF-${\kappa}B$) and mitogen-activated protein kinase (MAPK) signaling, resulting in inhibition of the expression of pro-inflammatory mediators. Topical application of PGG followed by chronic exposure to UVB radiation in the dorsal skin of hairless mice resulted in a significant decrease in the progression of inflammatory skin damages, leading to inhibited activation of NF-${\kappa}B$ signaling and expression of pro-inflammatory mediators. The present study demonstrated that PGG protected from skin damage induced by UVB radiation, and thus, may be a potential candidate for the prevention of environmental stimuli-induced inflammatory skin damage.
Currently, many available anti-cancer therapies are targeting apoptosis. However, many cancer cells have acquired resistance to apoptosis. To overcome this problem, simultaneous induction of other types of programmed cell death in addition to apoptosis of cancer cells might be an attractive strategy. For this purpose, we initially investigated the inhibitory role of TRIP-Br1/XIAP in necroptosis, a regulated form of necrosis, under nutrient/serum starvation. Our data showed that necroptosis was significantly induced in all tested 9 different types of cancer cell lines in response to prolonged serum starvation. Among them, necroptosis was induced at a relatively lower level in MCF-7 breast cancer line that was highly resistant to apoptosis than that in other cancer cell lines. Interestingly, TRIP-Br1 oncogenic protein level was found to be very high in this cell line. Up-regulated TRIP-Br1 suppressed necroptosis by repressing reactive oxygen species generation. Such suppression of necroptosis was greatly enhanced by XIAP, a potent inhibitor of apoptosis. Our data also showed that TRIP-Br1 increased XIAP phosphorylation at serine87, an active form of XIAP. Our mitochondrial fractionation data revealed that TRIP-Br1 protein level was greatly increased in the mitochondria upon serum starvation. It suppressed the export of CypD, a vital regulator in mitochondria-mediated necroptosis, from mitochondria to cytosol. TRIP-Br1 also suppressed shikonin-mediated necroptosis, but not TNF-α-mediated necroptosis, implying possible presence of another signaling pathway in necroptosis. Taken together, our results suggest that TRIP-Br1/XIAP can function as onco-proteins by suppressing necroptosis of cancer cells under nutrient/serum starvation.
본 웹사이트에 게시된 이메일 주소가 전자우편 수집 프로그램이나
그 밖의 기술적 장치를 이용하여 무단으로 수집되는 것을 거부하며,
이를 위반시 정보통신망법에 의해 형사 처벌됨을 유념하시기 바랍니다.
[게시일 2004년 10월 1일]
이용약관
제 1 장 총칙
제 1 조 (목적)
이 이용약관은 KoreaScience 홈페이지(이하 “당 사이트”)에서 제공하는 인터넷 서비스(이하 '서비스')의 가입조건 및 이용에 관한 제반 사항과 기타 필요한 사항을 구체적으로 규정함을 목적으로 합니다.
제 2 조 (용어의 정의)
① "이용자"라 함은 당 사이트에 접속하여 이 약관에 따라 당 사이트가 제공하는 서비스를 받는 회원 및 비회원을
말합니다.
② "회원"이라 함은 서비스를 이용하기 위하여 당 사이트에 개인정보를 제공하여 아이디(ID)와 비밀번호를 부여
받은 자를 말합니다.
③ "회원 아이디(ID)"라 함은 회원의 식별 및 서비스 이용을 위하여 자신이 선정한 문자 및 숫자의 조합을
말합니다.
④ "비밀번호(패스워드)"라 함은 회원이 자신의 비밀보호를 위하여 선정한 문자 및 숫자의 조합을 말합니다.
제 3 조 (이용약관의 효력 및 변경)
① 이 약관은 당 사이트에 게시하거나 기타의 방법으로 회원에게 공지함으로써 효력이 발생합니다.
② 당 사이트는 이 약관을 개정할 경우에 적용일자 및 개정사유를 명시하여 현행 약관과 함께 당 사이트의
초기화면에 그 적용일자 7일 이전부터 적용일자 전일까지 공지합니다. 다만, 회원에게 불리하게 약관내용을
변경하는 경우에는 최소한 30일 이상의 사전 유예기간을 두고 공지합니다. 이 경우 당 사이트는 개정 전
내용과 개정 후 내용을 명확하게 비교하여 이용자가 알기 쉽도록 표시합니다.
제 4 조(약관 외 준칙)
① 이 약관은 당 사이트가 제공하는 서비스에 관한 이용안내와 함께 적용됩니다.
② 이 약관에 명시되지 아니한 사항은 관계법령의 규정이 적용됩니다.
제 2 장 이용계약의 체결
제 5 조 (이용계약의 성립 등)
① 이용계약은 이용고객이 당 사이트가 정한 약관에 「동의합니다」를 선택하고, 당 사이트가 정한
온라인신청양식을 작성하여 서비스 이용을 신청한 후, 당 사이트가 이를 승낙함으로써 성립합니다.
② 제1항의 승낙은 당 사이트가 제공하는 과학기술정보검색, 맞춤정보, 서지정보 등 다른 서비스의 이용승낙을
포함합니다.
제 6 조 (회원가입)
서비스를 이용하고자 하는 고객은 당 사이트에서 정한 회원가입양식에 개인정보를 기재하여 가입을 하여야 합니다.
제 7 조 (개인정보의 보호 및 사용)
당 사이트는 관계법령이 정하는 바에 따라 회원 등록정보를 포함한 회원의 개인정보를 보호하기 위해 노력합니다. 회원 개인정보의 보호 및 사용에 대해서는 관련법령 및 당 사이트의 개인정보 보호정책이 적용됩니다.
제 8 조 (이용 신청의 승낙과 제한)
① 당 사이트는 제6조의 규정에 의한 이용신청고객에 대하여 서비스 이용을 승낙합니다.
② 당 사이트는 아래사항에 해당하는 경우에 대해서 승낙하지 아니 합니다.
- 이용계약 신청서의 내용을 허위로 기재한 경우
- 기타 규정한 제반사항을 위반하며 신청하는 경우
제 9 조 (회원 ID 부여 및 변경 등)
① 당 사이트는 이용고객에 대하여 약관에 정하는 바에 따라 자신이 선정한 회원 ID를 부여합니다.
② 회원 ID는 원칙적으로 변경이 불가하며 부득이한 사유로 인하여 변경 하고자 하는 경우에는 해당 ID를
해지하고 재가입해야 합니다.
③ 기타 회원 개인정보 관리 및 변경 등에 관한 사항은 서비스별 안내에 정하는 바에 의합니다.
제 3 장 계약 당사자의 의무
제 10 조 (KISTI의 의무)
① 당 사이트는 이용고객이 희망한 서비스 제공 개시일에 특별한 사정이 없는 한 서비스를 이용할 수 있도록
하여야 합니다.
② 당 사이트는 개인정보 보호를 위해 보안시스템을 구축하며 개인정보 보호정책을 공시하고 준수합니다.
③ 당 사이트는 회원으로부터 제기되는 의견이나 불만이 정당하다고 객관적으로 인정될 경우에는 적절한 절차를
거쳐 즉시 처리하여야 합니다. 다만, 즉시 처리가 곤란한 경우는 회원에게 그 사유와 처리일정을 통보하여야
합니다.
제 11 조 (회원의 의무)
① 이용자는 회원가입 신청 또는 회원정보 변경 시 실명으로 모든 사항을 사실에 근거하여 작성하여야 하며,
허위 또는 타인의 정보를 등록할 경우 일체의 권리를 주장할 수 없습니다.
② 당 사이트가 관계법령 및 개인정보 보호정책에 의거하여 그 책임을 지는 경우를 제외하고 회원에게 부여된
ID의 비밀번호 관리소홀, 부정사용에 의하여 발생하는 모든 결과에 대한 책임은 회원에게 있습니다.
③ 회원은 당 사이트 및 제 3자의 지적 재산권을 침해해서는 안 됩니다.
제 4 장 서비스의 이용
제 12 조 (서비스 이용 시간)
① 서비스 이용은 당 사이트의 업무상 또는 기술상 특별한 지장이 없는 한 연중무휴, 1일 24시간 운영을
원칙으로 합니다. 단, 당 사이트는 시스템 정기점검, 증설 및 교체를 위해 당 사이트가 정한 날이나 시간에
서비스를 일시 중단할 수 있으며, 예정되어 있는 작업으로 인한 서비스 일시중단은 당 사이트 홈페이지를
통해 사전에 공지합니다.
② 당 사이트는 서비스를 특정범위로 분할하여 각 범위별로 이용가능시간을 별도로 지정할 수 있습니다. 다만
이 경우 그 내용을 공지합니다.
제 13 조 (홈페이지 저작권)
① NDSL에서 제공하는 모든 저작물의 저작권은 원저작자에게 있으며, KISTI는 복제/배포/전송권을 확보하고
있습니다.
② NDSL에서 제공하는 콘텐츠를 상업적 및 기타 영리목적으로 복제/배포/전송할 경우 사전에 KISTI의 허락을
받아야 합니다.
③ NDSL에서 제공하는 콘텐츠를 보도, 비평, 교육, 연구 등을 위하여 정당한 범위 안에서 공정한 관행에
합치되게 인용할 수 있습니다.
④ NDSL에서 제공하는 콘텐츠를 무단 복제, 전송, 배포 기타 저작권법에 위반되는 방법으로 이용할 경우
저작권법 제136조에 따라 5년 이하의 징역 또는 5천만 원 이하의 벌금에 처해질 수 있습니다.
제 14 조 (유료서비스)
① 당 사이트 및 협력기관이 정한 유료서비스(원문복사 등)는 별도로 정해진 바에 따르며, 변경사항은 시행 전에
당 사이트 홈페이지를 통하여 회원에게 공지합니다.
② 유료서비스를 이용하려는 회원은 정해진 요금체계에 따라 요금을 납부해야 합니다.
제 5 장 계약 해지 및 이용 제한
제 15 조 (계약 해지)
회원이 이용계약을 해지하고자 하는 때에는 [가입해지] 메뉴를 이용해 직접 해지해야 합니다.
제 16 조 (서비스 이용제한)
① 당 사이트는 회원이 서비스 이용내용에 있어서 본 약관 제 11조 내용을 위반하거나, 다음 각 호에 해당하는
경우 서비스 이용을 제한할 수 있습니다.
- 2년 이상 서비스를 이용한 적이 없는 경우
- 기타 정상적인 서비스 운영에 방해가 될 경우
② 상기 이용제한 규정에 따라 서비스를 이용하는 회원에게 서비스 이용에 대하여 별도 공지 없이 서비스 이용의
일시정지, 이용계약 해지 할 수 있습니다.
제 17 조 (전자우편주소 수집 금지)
회원은 전자우편주소 추출기 등을 이용하여 전자우편주소를 수집 또는 제3자에게 제공할 수 없습니다.
제 6 장 손해배상 및 기타사항
제 18 조 (손해배상)
당 사이트는 무료로 제공되는 서비스와 관련하여 회원에게 어떠한 손해가 발생하더라도 당 사이트가 고의 또는 과실로 인한 손해발생을 제외하고는 이에 대하여 책임을 부담하지 아니합니다.
제 19 조 (관할 법원)
서비스 이용으로 발생한 분쟁에 대해 소송이 제기되는 경우 민사 소송법상의 관할 법원에 제기합니다.
[부 칙]
1. (시행일) 이 약관은 2016년 9월 5일부터 적용되며, 종전 약관은 본 약관으로 대체되며, 개정된 약관의 적용일 이전 가입자도 개정된 약관의 적용을 받습니다.