The fusion between viral envelope and target cell membrane is a central step of viral infection, and the fusion proteins located at viral envelope mediate such process. Gp41 of HIV is one of the fusion proteins whose structure and mechanism of membrane fusion had been extensively studied. Functionally important motives of gp41 are the N-terminus fusion peptide, the coiled-coil and the membrane proximal C-peptide regions. The role of these regions during the fusion process had been thoroughly examined. Specially, insertion of the fusion peptide into membrane and conformational change of the coiled-coil and C-peptide regions are assumed to be critical for the fusion mechanism. In addition, the coiled-coil region has been shown to interact with membrane, and the C-peptide region regulates the interaction in a dose dependent manner. Furthermore, fusion defective mutations of the coiled-coil region dramatically changed its binding affinity to membrane. These results suggested that the membrane binding property of the coiled-coil region is important for the fusion activity of gp41, and such property could be modulated by the interaction with the C-peptide region.
Transformation-associated recombination (TAR) 클로닝 법은 복잡한 게놈으로부터 염색체 내의 특정부위나 유전자를 선택적으로 분리할 수 있다. 이 방법은 목적 유전자에 근접한 작은 게놈DNA 염기서열 정보를 필요로 한다. 이 기술은 효모의 spheroplast transformation을 시키는 동안 목적으로 하는 유전자의 5' 또는 3' 서열을 포함하고 있는 TAR vector와 게놈DNA사이에서 일어나는 상동성재조합에 의해 이루어진다. 본 연구에서는 plasmid 모델시스템을 이용하여 target hooks 내에 존재하는 비상동성 염기서 열이 상동성재조합에 미치는 영향을 조사하였다. plasmid에 존재하는HIS3유전자와 변형시킨 his3-TRP1-his3 단편 사이의 상동성재조합의 효율은 $Ura^+$ 형질전환체의 형질분석에 의해 이루어졌다. $Ura^+$ 형질전환체의 수는 7종류의 서로 달리 변형된 his3-TRP1-his3 단편들을 사용하였을 매 거의 동일하게 나타났다. 그러나 $Trp^+His^+$ positive recombinants의 빈도는 변형된 his3-TRP1-his3 단편 내에 비상동성 영역에 부정확한 간격을 지닐 때 현저한 감소를 나타내었다. 이러한 결과로서, 부정확한 간격이 target hook과 substrate DNA 사이에 일어나는 상동성재조합을 방해하는 것으로 사료된다. 그러므로 이종간의 상동유전자를 클로닝 할 때에는 target hook내의 비상동성 염기서열이 존재한다면 이것이 정확한 간격을 지니는지 여부를 중요란 요인으로 고려해야 한다.
In tihis paper an improved matching method using subtemplate of moving region and 3-step search algorithm is proposed It reduces heavy computational load of the conventional method. The proposed method is applied to an automatic target tracker using high speed 16 bit microprocessor in order to track one moving target in real time. Expericmental results show that the proposed method has better performance over the conventional methodin spite of greately reducing the computational load, even in came complex background.
Kim, Geun-Joong;Cheon, Young-Hoon;Park, Min-Soon;Park, Hee-Sung;Kim, Hak-Sung
한국미생물생명공학회:학술대회논문집
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한국미생물생명공학회 2001년도 Proceedings of 2001 International Symposium
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pp.77-80
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2001
A variety of different methods to generate diverse proteins, including random mutagenesis and recombination, are currently available, and most of them accumulate the mutations on the target gene of a protein, whose sequence space remains unchanged. On the other hand, a pool of diverse genes, which is generated by random insertions, deletions, and exchange of the homologous domains with different lengths in the target gene, would present the protein lineages resulting in new fitness landscapes. Here we report a method to generate a pool of protein variants with different sequence spaces by employing green fluorescent protein (GFP) as a model protein. This process, designated functional salvage screen (FSS), comprises the following procedures: a defective GFP template expressing no fluorescence is firstly constructed by genetically disrupting a predetermined region(s) of the protein, and a library of GFP variants is generated from the defective template by incorporating the randomly fragmented genomic DNA from E. coli into the defined region(s) of the target gene, followed by screening of the functionally salvaged, fluorescence-emitting GFPs. Two approaches, sequence-directed and PCR-coupled methods, were attempted to generate the library of GFP variants with new sequences derived from the genomic segments of E. coli. The functionally salvaged GFPs were selected and analyzed in terms of the sequence space and functional property. The results demonstrate that the functional salvage process not only can be a simple and effective method to create protein lineages with new sequence spaces, but also can be useful in elucidating the involvement of a specific region(s) or domain(s) in the structure and function of protein.
The literature indicates that LINC00174 promotes the growth of colorectal cancer (CRC) cells, but its research needs to be enriched. We tried to explore the function and mechanism of LINC00174 in CRC cell proliferation and migration. Bioinformatics analysis predicted the binding relationship and expressions of lncRNA, miRNA and mRNA. Clinical study analyzes the relationship between LINC00174 and clinical data characteristics of CRC patients. The expressions of LINC00174, miR-3127-5p and E2F7 were verified by RT-qPCR, and the combination of the two was verified by dual luciferase analysis and RNA immunoprecipitation as needed. Western blot was used to detect the expression of EMT-related protein and E2F7 protein. Functional experiments were used to evaluate the function of the target gene on CRC cells. LINC00174 was up-regulated in CRC clinical samples and cells and was related to the clinical characteristics of CRC patients. High-expression of LINC00174, contrary to the effect of siLINC00174, promoted cell viability, proliferation, migration and invasion, up-regulated the expressions of N-Cadherin, Vimentin, E2F7, and inhibited the expression of E-Cadherin. MiR-3127-5p was one of the targeted miRNAs of LINC00174 and was down-regulated in CRC samples. In addition, miR-3127-5p mimic partially reversed the malignant phenotype of CRC cells induced by LINC00174. Besides, E2F7 was a target gene of miR-3127-5p, and LINC00174 repressed miR-3127-5p to regulate E2F7. Our research reveals that LINC00174 affected the biological characteristics of CRC cells through regulated miR-3127-5p/ E2F7 axis.
Kim, Kidae;Park, Sung Goo;Park, Byoung Chul;Kim, Jeong-Hoon;Kim, Sunhong
BMB Reports
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제53권7호
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pp.373-378
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2020
Phosphorylation of the signaling component by protein kinase often leads to a kinase cascade or feedback loop. 3-Phosphoinositide-dependent kinase 1 (PDK1) signaling pathway diverges into various kinases including Akt and p70 S6 kinase (p70S6k). However, the PDK1 feedback mechanism remains elusive. Here, we demonstrated that UNC-51-like kinase (ULK1), an autophagy initiator kinase downstream of mechanistic target of rapamycin (mTOR), directly phosphorylated PDK1 on serine 389 at the linker region. Furthermore, our data showed that this phosphorylation affected the kinase activity of PDK1 toward downstream substrates. These results suggest a possible negative feedback loop between PDK1 and ULK1.
Nam, Seungyoon;Kim, Young-Kook;Kim, Pora;Kim, V. Narry;Shin, Seokmin;Lee, Sanghyuk
Genomics & Informatics
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제3권3호
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pp.53-62
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2005
MicroRNAs play an important role in regulating gene expression, but their target identification is a difficult task due to their short length and imperfect complementarity. Burge and coworkers developed a program called TargetScan that allowed imperfect complementarity and established a procedure favoring targets with multiple binding sites conserved in multiple organisms. We improved their algorithm in two major aspects - (i) using well-defined UTR (untranslated region) database, (ii) examining the extent of conservation inside the 3' UTR specifically. Average length in our UTR database, based on the ECgene annotation, is more than twice longer than the Ensembl. Then, TargetScan was used to identify putative binding sites. The extent of conservation varies significantly inside the 3' UTR. We used the 'tight' tracks in the UCSC genome browser to select the conserved binding sites in multiple species. By combining the longer 3' UTR data, TargetScan, and tightly conserved blocks of genomic DNA, we identified 107 putative target genes with multiple binding sites conserved in multiple species, of which 85 putative targets are novel.
Kim, Jai-Soon;Yoon, Jin-Kyung;Lee, Ho-Chan;Lee, Jai-Hyung;Kim, Hye-Kyung;Lee, Seung-Churl;Ahn, Keun-Ok
Journal of the Optical Society of Korea
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제8권4호
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pp.174-181
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2004
Various kinds of systems, that can do target recognition and position detection simultaneously by using infrared sensing detectors, have been developed. In this paper, the detection system TRSS (Thermal target Recognition by Spiral Scanning) adopts linear array shaped uncooled IR detector and uses spiral type fast scanning method for relative position detection of target objects, which radiate an IR region wavelength spectrum. It can detect thermal energy radiating from a 9 m-size target object as far as 200 m distance. And the maximum field of a detector is fully filled with the same size of target object at the minimum approaching distance 50 m. We investigate two types of lens systems. One is a singlet lens and the other is a doublet lens system. Every system includes one aspheric surface and free positioned aperture stop. Many designs of F/1.5 system with ${\pm}5.2^{\circ}$ field at the Efl=20, 30 mm conditions for single element and double elements lens system respectively are compared in their resolution performance [MTF] according to the aspheric surface and stop position changing on their optimization process. Optimum design is established including mechanical boundary conditions and manufacturing considerations.
Doyoung Lee;Duk-jin Kim;Hwisong Kim;Juyoung Song;Junwoo Kim
대한원격탐사학회지
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제40권2호
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pp.167-177
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2024
With advancements in satellite technology, interest in target detection and identification is increasing quantitatively and qualitatively. Synthetic Aperture Radar(SAR) images, which can be acquired regardless of weather conditions, have been applied to various areas combined with machine learning based detection algorithms. However, conventional studies primarily focused on the detection of stationary targets. In this study, we proposed a method to identify moving targets using an algorithm that integrates sub-aperture SAR images and cosine similarity calculations. Utilizing a transformer-based deep learning target detection model, we extracted the bounding box of each target, designated the area as a region of interest (ROI), estimated the similarity between sub-aperture SAR images, and determined movement based on a predefined similarity threshold. Through the proposed algorithm, the quantitative evaluation of target identification capability enhanced its accuracy compared to when training with the targets with two different classes. It signified the effectiveness of our approach in maintaining accuracy while reliably discerning whether a target is in motion.
Spatiograms are histograms augmented with spatial means and covariances to capture a richer description of the target. We present a particle filtering framework for region-based tracking using spatiograms. Unlike mean shift, the framework allows for non-differentiable similarity measures to compare two spatiograms; we present one such similarity measure, a combination of a recent weighting scheme and histogram intersection. Experimental results show improved performance with the new measure as well as the importance of global spatial information for tracking. The performance of spatiograms is compared with color histograms and several texture histogram methods.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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