Proceedings of the Korea Society of Poultry Science Conference
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2005.11a
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pp.53-59
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2005
Sequences of candidate chicken testis-specific genes were analyzed in order to develop a resource for functional genomic studies of the testis and male germ cells. Tentative consensus sequences (TCs) containing ESTs expressed in testis libraries only were selected from the TIGR Gallus gallus Gene Index, resulting in a total of 292 TCs. The transcriptional expression of these genes were evaluated in a variety of chicken tissues, including testis and ovary, Of the panel of 292 TCs, 110 were expressed in a testis-specific manner. The correlation between the number of ESTs assembled into each TC and the number of testis-specific TCs was not significant. Annotation of the TCs using the Gene Ontology database terms showed that the proportion of testis-specific TCs that were classified as having catalytic activity (within the Molecular Function branch) was larger than the proportion of total chicken TCs classified in the same way. Our results might facilitate the investigation of testis-specific genes and their functional analysis in the chicken as well as in other avian species.
Hai Dang Sy;Kim Young-Pil;Choi Bum-Sun;Um Hyun-Ju;Kim Young-Chang
Proceedings of the Microbiological Society of Korea Conference
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2002.10a
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pp.175-179
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2002
The assemblies of our partial genomic sequence data of Sphingomonas chungbukensis DJ77, with the total size of 877,928 bp, was done by TIGR Assembler. The total size of our current obtained contigs was about 0.73 Mb. A comparative genome analysis between our uncompleted genome and the other completed genomes was performed by taking advantage of the availability of multiple complete genomes in COGs database (Clusters of Orthologous Groups of proteins) to produce the genomic prediction of our S. chungbukensis DJ77. This analysis based on homologues search among completed genomes provides good initial step to our better assigning putative function to predicted coding sequences.
Acetohydroxyacid synthase (E.C.2.2.1.6., AHAS) is the enzyme that catalyses the first step in the synthesis of the branched-chain amino acids valine, leucine and isoleucine. The AHAS gene (TIGR access code HI2585) from Heamophilus influenzae was cloned into the bacterial expression vector pET-28a and expressed in the Escherichia coli strain BL21(DE3). The expressed enzyme was purified by $Ni^{2+}-charged$ HiTrap chelating HP column. The purified enzyme appears as a single band on SDS-PAGE with a molecular mass of about 63.9 kDa. The enzyme exhibits absolute dependence on the three cofactors FAD, $MgCl_{2}$ and thiamine diphosphate for activity. Specific activity of purified enzyme has 3.22 unit/mg and optimum activity in the pH 7.5 at $37^{\circ}C$. This enzyme activity has an effect on the buffer. When comparing the enzyme activity against the organic solvent, it followed in type and the difference it is but even from the aqueous solution where the organic solvent is included with the fact that the enzyme activity is maintained.
Rice (Oryza sativa) is the most important staple crop in Korea. With its small genome size of 389Mb, rice is a model plant for genome research. We analyzed expressed sequence tag (EST) clones from immature seeds of rice (cv. Ilpum) at 20 days after heading. The 25,668 EST clones were clustered by using SeqMan program and 7,509 clones were selected as unique clones. We compared the 7,509 unique genes with KOME database including the 32,127 FL-cDNA in rice. Finally, 4,990 clones were homologous and 2,519 clones non-homologous to FL-cDNA clones. In addition, we mapped the 7,509 cDNA clones by using TIGR rice pseudomolecule version 5. Ultimately, 7,347 clones were matched to be significant clones related to the TIGR rice pseudomolecules, but 162 clones were unmapped. For the clustering of orthologous group genes, we further analyzed the 7,509 EST clones from immature seeds using NCBI clusters of orthologous groups database. Among the clones, 4,968 clones were categorized into information storage and processing, cellular processes and signaling, metabolism and poorly characterized genes, proportioning 799 (14.89%), 1,536 (28.3%), 1,148 (21.2%) and 1,936 (35.7%) clones to the previous four categories, respectively.
Successful control of Xanthomonas oryzae pv. oryzicola, the causal agent of bacterial leaf streak, requires a specific and reliable diagnostic tool. A pathovar-specific PCR assay was developed for the rapid and accurate detection ofthe plant pathogenic bacterium Xanthomonas oryzae pv. oryzicola in diseased plant. Based on differences in a membrane fusion protein gene of Xanthomonas oryzae pv. oryzicola and other microorganisms, which was generated from NCBI (http://www.ncbi.nlm.nih.gov/) and CMR (http://cmr.tigr.org/) BLAST searches, one pair of pathovar-specific primers, XOCMF/XOCMR, was synthesized. Primers XOCMF and XOCMR from a membrane fusion protein gene were used to amplity a 488-bp DNA fragment. The PCR product was only produced from 4 isolates of Xanthomonas oryzae pv. oryzicola among 37 isolates of other pathovars and species of Xanthomonas, Pectobacterium, Pseudomonas, Burkholderia, Escherichia coli, and Fusarium oxysporum f.sp. dianthi. The results suggested that the assay detected the pathogen more rapidly and accurately than standard isolation methods.
Scholz, Christian;Doderlein, Gabriele;Simon, Horst H.
BMB Reports
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v.39
no.4
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pp.464-467
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2006
Recently, the nucleotide sequences of entire genomes became available. This information combined with older sequencing data discloses the exact chromosomal location of millions of nucleotide markers stored in the databases at NCBI, EMBO or DDBJ. Despite having resolved the intron/exon structures of all described genes within these genomes with a stroke of a pen, the sequencing data opens up other interesting possibilities. For example, the genomic mapping of the end sequences of the human, murine and rat BAC libraries generated at The Institute for Genomic Research (TIGR), reveals now the entire encompassed sequence of the inserts for more than a million of these clones. Since these clones are individually stored, they are now an invaluable source for experiments which depend on genomic DNA. Isolation of smaller fragments from such clones with standard methods is a time consuming process. We describe here a reliable one-step cloning technique to obtain a DNA fragment with a defined size and sequence from larger genomic clones in less than 48 hours using a standard vector with a multiple cloning site, and common restriction enzymes and equipment. The only prerequisites are the sequences of ends of the insert and of the underlying genome.
Aspergillus fumigatus is one of the most common fungi in the human environment, both in-doors and out-doors. It is the main causative agent of invasive aspergillosis, a life-threatening mycosis among immunocompromised patients. The genome has been sequenced by an international consortium, including the Wellcome Trust Sanger Institute (U.K.) and The Institute for Genomic Research (TIGR, U.S.A.), and a ten times whole genome shotgun sequence assembly has been made publicly available. In this study, we identified tricarboxylic acid (TCA) cycle enzymes of A. fumigatus by comparative analysis with four other fungal species. The open reading frames showed high amino acid sequence similarity with the other fungal citric acid enzymes and well-conserved functional domains. All genes present in Saccharomyces cerevisiae, Schizosaccharomyces pombe, Candida albicans, and Neurospora crassa were also found in A. fumigatus. In addition, we identified four A. fumigatus genes coding for enzymes in the glyoxylate shunt, which may be required for fungal virulence. The architecture of multi-gene encoded enzymes, such as isocitrate dehydrogenase, 2-ketoglutarate, succinyl-CoA synthetase, and succinate dehydrogenase was well conserved in A. fumigatus. Furthermore, our results show that genes of A. fumigatus can be detected reliably using GlimmerM.
Park, Jar-Yong;Park, Sun-Jung;Nam, Su-Jin;Ha, Yeong-Lae;Kim, Jeong-Hwan
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.12
no.5
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pp.716-721
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2002
The ldhL gene encoding the $_L$-(+) lactate dehydrogenase was cloned from Lactobacillus reuteri ATCC 55739 chromosomal DNA and characterized. An internal 750-bp fiagment of ldhL gene was amplified by PCR using primers based on the conserved region of lactobacilli ldhL genes. A genomic library off. reuteri ATCC 55739 was constructed using pBR322, and colony hybridization experiments were performed using the 750-bp fragment as aprobe. One clone harboring a 4.0-kb PstI fragment was identified, and nucleotide sequencing confirmed it as an open reading frame of 972 bp in size in the middle. In addition to IdhL gene, an ORF homologous to Streptococcus pneumoniae TIGR4 hydrolase gene and 3' part of phosphomevalonate kinase gene (mvaK2) were also found on the 4 kb fragment. $_L$-LDH of L. reuteri ATCC 55739 showed the highest degree of homology with the $_L$-LDH of Pediococcus acidilactici (62.4%), fullowed by the $_L$-LDH of Lactobacillus pentosus (58.7%). The size of IdhL transcript determined by Northern blot was 1 kb, indicating the monocistronic nature of IdhL.
The land surface temperature (LST) derived from the meteorological satellite can be used to investigate the urban heat island (UHI) and its temporal variations. In this study, we developed LST retrieval algorithm from MTSAT-1R by means of a statistical regression analysis from radiative transfer simulations using MODTRAN 4 for a wide range of atmospheric, satellite viewing angle (SVA) and lapse rate conditions. 535 sets of thermodynamic initial guess retrieval (TIGR) were used for the radiative transfer simulations. Sensitivity and intercomparison results showed that the algorithm, developed in this study, estimated the LST with a similar bias and root mean square errors to that of other algorithms. The magnitude, spatial extent, and seasonal and diurnal variations of the UBI of Korean peninsula were well demonstrated by the LST derived from MTSAT-1R data. In general, the temporal variations of UHI clearly depend on the weather conditions and geographic environment of urban.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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