An important modification of thrombolytic agents is resistance to plasminogen activator inhibitor-1 (PAI-1). In previous studies, a new truncated PAI-1-resistant variant was developed based on deletion of the first three domains in t-PA and the substitution of KHRR 128-131 amino acids with AAAA in the truncated t-PA. The novel variant expressed in a static culture system of Chinese Hamster Ovary (CHO) DG44 cells exhibited a higher resistance to PAI-1 when compared with the full-length commercial drug; Actylase. In the present study, the truncated-mutant protein was expressed in CHO DG44 cells in 50 ml orbital shaking bioreactors. The final yield of the truncated-mutant in the culture was 752 IU/ml, representing a 63% increase compared with the static culture system. Therefore, these results suggest that using the combined features of a transient and stable expression system is feasible for the production of novel recombinant proteins in the quantities needed for preclinical studies.
This study was perfomed to examine the distribution of causative agent of piglets diarrhea in eastern Chonnam province from February 1994 to March 1995. The causative agents of diarrhea were examined by bacterial culture test, parasitological test and serological test against PED, TGE and Rota. The 35 isolated E. coli were tested for antibiotic sensitivity. The results obtained were as follows. 1. The incidence of 81 piglets with diarrhea was most prevalent as 39.5% in the age of 2 to 4 weeks, compare to 34.6% in the age of 5 to 8 weeks and 16.0% under 1 weeks and 9.9 % in the age of 9 to 11 weeks after birth. 2. The incidence of 81 piglets diarrhea showed bacterial diarrhea(75.3%), viral diarrhea (35.8%) and parasitological diarrhea(18.5%). When compared the isolation frequency of each etiological agent, enteropathogenic E. coli was most prevalent as 55.5% in bacterial diarrhea, rotavlrus enteritis as 18.5% in viral diarrhea and trichuriasis as 13.6% in parasitological diarrhea. 3. The complicated infection of piglets was most prevalent as 41.7% in rotavirus enteritis with enteropathogenic E coli in 24 complicated piglets diarrhea. 4. In antibiotic sensitivity test, isolates showed moderatly resistance to Tobramycin, Amikacin, Imipenem, Trimethoprim/Sulfamethoxazole, Gentamicin, Ampicillin but sensitivty to Ticarcillin/K. The 30 E. coli isolate showed multiple drug resistances in 3 different antibiotics.
Transmissible gastroenteritis (TGE) is a disease confined to pigs of all ages, and can be a significant cause of economic loss in breeding herds, primarily because of the very high piglet mortality. The causative agent is a coronavirus, an enveloped positive strand RNA virus and closely related but non-enteropathogenic porcine respiratory coronavirus (PRCV). Although the TGEV has declined with its innocent relative, PRCV, further genome changes could not be excluded. Therefore, the herd-level immunity against this virus is important for the prevention of disease and should be carefully monitored. The aim of this study is to develop monoclonal antibody capture enzyme-linked immunosorbent assay (MAC-ELISA) which can rapidly and accurately determine a large numbers of serum samples for surveillance purpose, and to compare the ELISA with a TGEV-specific serum neutralization test. The MAC-ELISA was sufficiently achieved, and the comparison with the virus-specific serum neutralization assays for 713 sera from pig farms showed a high correlation ($r^2=0.812$, P<0.001). The specificity and sensitivity of MAC-ELISA for the serum neutralization test 91.9% and 91.6%, respectively, which means that the antibody detected by the MAC-ELISA could be said to be protective antibodies. In conclusion, the developed MAC-ELISA would be very helpful in evaluating protective antibodies against TGEV.
The purpose of this study was to investigate to potective effects against transmissible gastyoenteritis virus (TGEV) infection in piglets by administration of the TGEV antiserum orally at 5 hrs, 24hrs and 36hrs after birth. five piglets administered the antiserum were experimentally infected with TGEV at four-day-old. Control group were four piglets infected with TGEV only. Serum antibody titers against TGEV were examined by serum neutralization(SN) test, dectection for TGEV or TGEV antigen from feces and small intestines was tested by reverse transcrption-polymerase chain reaction (RT-PCR) and indirect immunoflurescence (IFA). The results obtained were as follows; 1. The piglets administered the TGEV antiserum showed higher antibody titers than those of control group and sustained during the experimental period. 2. The detection rate of TGEV in feces and small intestines by RT- PCR were 24.5% and 20.0% in TGEV antiserum treated group and 44.0% and 75.0% in control group, respectively. 3 The detection rate of TGEV antigen in the small intestine by IFA were 26.7% in TGEV antiserum treated group and 75.0% in control group, respectively. It was concluded that oral administration of antiserum against TGEV to piglets was effective in preventing TGEV infection.
Kim, Jae-hoon;Hwang, Eui-kyung;Bae, You-chan;Son, Hyun-joo;Park, Jung-won;Yoon, Yong-dhuk
Korean Journal of Veterinary Research
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v.35
no.3
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pp.575-581
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1995
Both immunoelectron microscopy(IEM) and immunogold conjugate immunoelectron microscopy (IGC-IEM) techniques were developed for the detection of porcine epidemic diarrhea virus(PEDV) from the feces. Fecal samples were incubated sequentially with anti-PEDV monoclonal antibody(MoAb) and immunogold conjugated goat anti-mouse IgG+IgM. Then negatively stained, mounted on the formvar carbon-coated copper EM grids and observed by the transmission electron microscope. By the direct electron microscopy(DEM), coronavirus particles were observed from 17 cases of total 33 fecal samples of grower pigs and sows. The virons of coronavirus were moderately pleomorphic but mostly spherical, with a diameter ranged from 90 to 190nm. PED virus particles were identified from 15 cases of 17 DEM positive samples by the IEM and IGC-IEM techniques. Aggregates of PED virus coated with specific antibody were seen in fecal samples incubated with homologous anti-PED virus MoAb but not in control samples incubated with anti-TGE virus MoAb. Following incubation with immunogold-conjugated secondary antibody, the gold granules were usually distributed around and among the virus particles and soluble and viral particle-associated antigen. So, IEM and IGC-IEM techniques were proved a rapid and sensitive methods for detection and identification of PED virus from fecal and intestinal contents.
To determine the effect of canons on growth and major components of hot pepper fruit, various combinations of K, Ca and Mh concentration in culture media were employed. The results analyzed by using binary interaction method were: 1. For the ideal condition for growth, the plant height was found by 57% K-435 Ca in KCa group and $58.5%\;K^++41.5%\;Mg^{++}$ in KMg group. The number of node was showed by $59%\;K^++41%\;Ca^{++}$ and $60%\;K^++40%\;Mg^{++}$. 2. The ideal condition for the maximum yield was by $60%\;K^++40%\;Ca^{++}$ and $62%\;K^++38% Mg^{++}$. For matured fruit yield, $57%\;K^++43%\;Ca^{++}$ and $63%\;K^++37%\;Mg^{++}$ was found ideal. 3. There were no significant differences in the amount of free sugars and capsaicin between tge treatments. 4. The nitrogen level was almost constant in all treatments however, the ratio of Fe/Mn in each treatment was showed from 2 to 3.
Swine whipworm(Trichuris suis) is cosmopolitan nematode which can cause serious pathology in immature stage(larva2~larva5) of infected pigs, such as anorexia, diarrhea, anemia, and death in heavy infections. In this larval stages, it is very difficult to diagnose the infection of whipworm and to differentiate from other common swine gastrointestinal disorders such as 21 day scours which are associated with TGE virus, rota virus, coccidium, and the stress of weaning. In this experiment, the isolated antigens of Trichuris spp. were carried out to examine the structure and specificity of antigens and to select the reasonable antigens which would be used in serological diagnosis by electrophoresis, Western blotting, ELISA. The results of this experiment were as follows; 1. The common fractions of each Trichuris suis antigen were identified 28,32,45, 80kDa by SDS-PAGE with silver stain and four major fractions could be detected in positive swine sera by Western blot analysis. 2. The OD(optical density) values of somatic and excretory-secretory antigens which were reacted against positive(negative) sera from pigs infected with Trichuris suis by ELISA reader were; 1) OD values($mean{\pm}SD$) of adult somatic antigen against positive(negative) sera were $0.30{\pm}0.12(0.09{\pm}0.006)$ and third-stage larva of somatic antigen were $0.28{\pm}0.038(0.10{\pm}0.005)$. And OD values of excretory-secretory antigens of adult and third-stage larva were $0.24{\pm}0.031(0.11{\pm}0.005)$ and $0.08{\pm}0.013(0.10{\pm}0.003)$, respectively. 2) OD values of adult somatic, larval somatic antigen and adult excretory-secretory antigen response to positive sera were significantly (p<0.01) associated with negative swine sera. And the Cut-off OD values(minimum positive value) were determined to be mean negative value plus 3 SD that would minimized the risk of false positives. 3. The OD values of somatic antigens of T suis and T vulpis against swine positive(negative) sera were $0.30{\pm}0.120(0.09{\pm}0.006)$ and $0.25{\pm}0.141(0.09{\pm}0.003)$. These data mean that the somatic antigens of T suis and T vulpis were able to diagnose T vulpis infection in dogs as well as T suis infection in pigs. These results suggest that somatic antigen of third-stage larva and excretory-secretory antigen of adult T suis could be used the diagnostic antigen by serological test(ELISA) in immature Trichuris spp. infection.
The Transactions of the Korea Information Processing Society
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v.4
no.2
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pp.563-572
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1997
E-mail has been eidely used for unformation delivery as an Inernet serive. As multimedia etchnologies are developed rapidly, most of the recent Unternet infornation servies support multimedia data. E-mail system also needs to suport multimedia nesage. But Internet mail servise using simple maiol transfer protocol(SMTP) speci-fied in RFC 821/822 handles only ASCII text messages repressented with 7-bit code. Each line the message has the length limitation as well. Those are why it cannot satisfy the diverse user'w demands. Multipuepose Unternet mail extensions(MIMZE), which is a modification and supplement of RFC 822,was proposed for supporting transportation of multimedia data.It can solve the limitations of sizes and types in contents of a message. In this study the E-mail system has been designed and implemented according to the MIME standard in order to solve the limitations of transpotation of messages regardless of the message content type. Hypertext markup language(HTML)syntax is applied to the mail system, and so it is possible to display a message consisting of differnt media as an intergrated from for the purpose of better understanding a message. No application program is needed for displaying a message including image data,and convenience for user is considered in the system. The futuer work is to improve the E-mail system so that it may support motion pictures and sound information,Thereby tge perfor multimeda E-mail system providing inergrated user's wiew will be developed.
Previous studies showed that epigallocatechin gallate(EGCG) have substantial effects of suppressing the N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine(MNNG)-initiated cell transformation process on the bases of foci formation frequency and loss of anchorage dependency. In this study we tried to clarify the molecular mechanism of suppressing the cell transformation process. Mouse cell line balb/c 3T3 A31-1-1 was exposed 2 days to MNNG followed by 15 days 12-O-tetradecanoylphorbol-13-acetate(TPA) treatment for our transformation process. EGCG was added after the time point of 24 hours exposure to TPA and incubated for 19 days. 2029 genes were selected in our transformation process that showed fold change value of 1.5 or more in the microarray gene expression analysis covering the mouse full genome. These genes were found to be involved mainly in the cell cycle pathway, focal adhesion, adherens junction, TGE-$\beta$ signaling, apoptosis, lysine degradation, insulin signaling, ECM-receptor interaction. Among the genes, we focused on the 631 genes(FC>0.5) reciprocally affected by EGCG treatment. Our study suggest that EGCG down-regulate the gene expressions of up stream signaling factors such as nemo like kinase with MAPK activity and PI3-Kinase, Ras GTPase and down stream factors such as cyclin D1, D2, H, T2, cdk6.
Yoon Sei C;Suh Tge S;Kim Sung W;Kang Ki M;Kim Yun S;Choi Byung O;Jang Hong S;Choi Kyo H;Kim Moon C;Shinn Kyung S
Radiation Oncology Journal
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v.11
no.2
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pp.241-247
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1993
Between July 1988 and December 1992, we treated 45 patients who had deep seated inoperable or residual and/or recurrent intracranial tumors using LINAC based stereotactic radiosurgery at the Department of Therapeutic Radiology, Kangnam St. Mary's Hospital, Catholic University Medical College. Treated intracranial tumors included pituitary tumors (n=15), acoustic neurinomas (n=8), meningiomas (n=7), gliomas (n=6), craniopharyngiomas (n=4), pinealomas (n=3), hemangioblastomas (n=2), and solitary metastatic tumor from lung cancer (n=1). The dimension of treatment field varied from 0.23 to 42.88 $cm^3\;(mean;\;7.26\;cm^3)$. The maximum tumor doses ranging from 5 to 35.5 Gy (mean; 29.9 Gy) were given, and depended on patients' age, target volume, location of lesion and previous history of irradiation. There were 22 male and 23 female patients. The age was varied from 5 to 74 years of age (a median age; 43 years). The mean duration of follow-up was 35 months (2~55 months). To date, 18 $(39.1\%)$ of 46 intracranial tumors treated with SRS showed absent or decrease of the tumor by serial follow-up CT and/or MRI and 16 $(34.8\%)$ were stationary, e.g. growth arrest. From the view point of the clinical aspects, 34 $(73.9\%)$ of 46 tumors were considered improved status, that is, alive with no evidence of active tumor and 8 $(17.4\%)$ of them were stable, alive with disease but no deterioration as compared with before SRS. Although there showed slight increase of the tumor in size according to follow-up imagings of 4 cases (pituitary tumor 1, acoustic neurinomas 2, pinealoma 1), they still represented clinically stable status. Clinically, two $(4.4\%)$ Patients who were anaplastic astrocytoma (n=1) and metastatic brain tumor (n=1) were worsened following SRS treatment. So far, no serious complications were found after treatment. The minor degree headache which could be relieved by steroid or analgesics and transient focal hair loss were observed in a few cases. There should be meticulous long term follow-up inall cases.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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