• 한국수산과학회지
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• 제12권4호
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• pp.225-234
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• 1979

자원이 풍부한 해조류 단백질의 효율적인 이용과 이의 영양가를 구명하기 위하여 가장 효과적인 정제방법 및 추출용매를 결정하고 4종 식용해조 즉 둥근 돌김, 구멍갈파래, 미역 및 모자반의 추출 정제단백질의 아미노산 조성과 이의 영양가 및 소화율을 실험한 결과를 요약하면 다음과 같다. 1. 홍조류와 녹조류는 추출단백질을 TCA로 심전시킨 후 ethylether로 TCA를 충분히 제거하면 정제효과가 좋았고, 갈조류는 등전점을 이용한 정제방법의 효과가 좋았다. 2. 각종 용매로 추출한 단백질의 아미노산을 분석한 결과 홍조류와 녹조류는 물 또는 알칼리 추출한 단백질이 좋았고, 갈조류는 알코올-알칼리 혼합용매로 추출한 단백질이 좋았고, 3. 둥근돌김의 정제단백질은 lyeine의 함량이 전시료 중에서 가장 높았으며 구멍갈파래는 threonine의 함량이 월등히 높은 반면, lysine의 함량이 낮았으며 미역과 모자반의 아미노산 분포 양상은 둥근돌김과 구멍갈파래보다 좋지 못했다. 4. 둥근돌김과 구멍갈파래 원조분말의 chemical score는 35정도였으나 정제단백질은 56정도있고, 미역과 모자반은 원조분말이 $10\~16$정도로 극히 낮은 반면에 정제단백질은 $30\~35$ 정도를 나타내었고, protein score는 전시료가 정제단백질의 경우 $62\~73$ 정도를 나타내었다. 5. PPDRI를 이용한 소화율은 원조분말의 $25\~40$ 정도의 낮은 소화율을 보였으나 정제했을 경우에는 $1.3\~2.1$배 증가함을 보였고, 갈조류의 소화율은 일반적으로 극히 낮음을 알 수 있었다.

• 대한수의학회지
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• 제37권2호
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• pp.321-330
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• 1997

Enrofloxacin is one of the second-generation quinolones which have been widely used to treat bacterial infections in various species including chicken, pig, horse and cattle. The objective of the present study was to describe the serum bactericidal activity(SBA) of enrofloxacin, its pharmacokinetic behaviors after intramuscular or intravenous administration to Korean native goats in the dose rate of 5mg/kg b.w. The results obtained through this study were as follows : 1. Sera collected from both sexes of Korean native goats administered 5mg/kg i.v. or i.m. showed potent antibacterial activities up to the 12 hours by way of the serum bactericidal activity. 2. Concentrations of enrofloxacin in the biological samples were measured by high-performance liquid chromatography(HPLC) so as to study pharmacokinetic characteristics. For detection of enrofloxacin, 10% TCA was optimal for protein precipitation and the mobile phase was 0.01M citric acid/methanol/acetonitrile(7/2/1, pH 3.5) with solid phase being the $C_{18}$ reversephase column and detection wavelength being 278nm. The limit of detection of enrofloxacin on HPLC was $0.05{\mu}g/ml$. 3. Pharmacokinetic profile of enrofloxacin administered 5mg/kg i.v. in Korean native goats was best described by two-compartment open model and that administered i.m. the same rate by one-compartment model. There were no sex differences in pharmacokineticl parameters. In conclusion, enrofloxacin showed potent in vivo antibacterial activity and excellent pharmacokinetic properties in Korean native goats, hence it may be used as a potential antibacterial in the veterinary clinical settings.

• Applied Biological Chemistry
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• 제23권1호
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• pp.14-22
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• 1980

흰참깨에 20.5%, 검정참깨에 19.20%, 참박(粕)깨에 44.7%의 조단백질이 함유되어 있다. n-hexane을 용매로하여 지방을 추출한 것이 수율이 가장 높았다. 조단백질의 분리에 있어서 pH가 알칼리성으로 갈수록 수율이 좋았다. 참깨의 globulin은 70.9%이었고 prolamin는 1.6%였다. 전(全)참깨의 아미노산으로는 glutamic acid가 17.1%로 가장 많았고 globulin의 아미노산으로는 glutamic-acid 14.6%이었고 필수 아미노산도 다량 고루 함유되어 있었다. 흰참깨와 검정참깨의 albumin 및 globulin의 단백질은 Disc gel 전기영동상에서 각각 $12{\sim}13$개 그리고 2개의 band로 나타났다. 참깨박(粕) 단백질의 주단백질인 globulin의 Sephadex G-100 및 G-200 column 분리하고 이를 disc gel 전기영동으로 검색하였다.

• 대한핵의학회지
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• 제28권1호
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• pp.106-111
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• 1994

2-iminothiolane is known to bind $NH_2$ group of lysine in the protein and deliver SH group, which can be used to label protein with $^{99m}Tc$. In this study, we looked for the best reaction condition in which 2-iminothiolane is conjugated to human polyclonal IgG and labeling condition with $^{99m}Tc$-glucoheptonate. Labeling yield was measured with TSK G4000SW column and HPLC or precipitation with 10% TCA (trichloroacetic acid) and 1% HSA. In vivo distribution was investigated with Staphylococcal abscess bearing rats. With decreasing glucoheptonate, the labeling yield decreased. Without 2-iminothiolane, $^{99m}Tc$-glucoheptonate was bound to IgG, which seemed to be direct labeling. With increasing 2-iminothiolane upto 20 times higher than IgG, the labeling yield increased, and plateau was seen with higher molar excess of 2-iminothiolane. Polymer formation was not observed. The pH for the conjugation of 2-iminothiolane and IgG was best around 6.4. $^{99m}Tc$-2-iminothiolane-IgG showed faster blood clearance, higher renal activity and lower hepatic and splenic activity than $^{99m}Tc$-DTPA-IgG. The biodistribution of $^{99m}Tc$-2-iminothiolane-IgG with higher molar excess of 2-iminothiolane was not different from that with lower molar excess. Labeling antibodies with $^{99m}Tc$ using 2-iminothiolane can afford a possible route to simple labeling and wide clinical use of the immunoscintigraphy.

• 한국수산과학회지
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• 제9권3호
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• pp.155-162
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• 1976

미이용해조류를 주로 한 33종류 41개시료(홍조류 15종 19개시료, 갈조류 14종 18개시료, 녹조류 3종 3개 시료, 해산현화직물 1종 1개시료)의 조단백질, 조지방, 조섬유, 조회분, 가용성무질소물, 아미노태질소 및 총 아미노산의 조성을 조사하였고, 이 중 조단백질 함량이 높은 지충이, 지누아리 및 조단백질함량이 낮은 거머리말, 알쏭이모자반의 4종류를 시료로 하여 조류단백질의 추출율과 추출액중의 단백질의 침전조건에 대하여 조사 검토하였다. 1. 일반적으로 홍조류에는 조단백질함량이 높고 조지방함량이 낮은 것이 많은데 비하여 갈조류 및 녹조류에는 조단백질함량이 낮고 조지방함량이 높은 것이 많은 경향을 보였다. 2. 조단백질함량과 총아미노산량으로 보아 단백질자원으로서 유용한 조류로는 지충이, 부채꼴아크로소리움, 꿩꼬리, 오카무라서실, 검은서실, 지누아리, 진두발, 불등가사리, 돌가사리, 디크티오타, 고리매 등을 들 수 있고, 반대로 큰디크티오타, 코르다리아, 비틀 대모자반, 알쏭이모자반, 외톨개모자반, 도박, 털도박, 미끌도박, 남작파래, 구명갈파래, 거머리말 등은 그 함량이 극히 낮았다. 5. 분말시료를 물로 추출할 때 8시간 동안에 조체의 총조단백류외 $30\~40\%$ 추출되었으며, 조체단백질함량의 다과에 따른 추출율의 차는 별로 없었다. 또한 조류단백질의 추출속도는 4시간 동안에 총추출단백질의 3이상이 추출되었다. 4. 추출액중의 단백질침전법으로서는 methanol 처리법이 가장 효과적이었고, 다음이 가열처리법, TCA 처리법의 순이였으며, pH 조절법이 가장 못하였다. pH 조절법에 있어서는 pH5 부근으로 조절하는 것이 효과저인 경향을 보였다. 5. 추출액중의 단백질의 침전율은 알쏭이모자반의 것이 가장 좋았고 다음이 지누아리. 거머리말의 순이였으며 지충이의 것이 가장 못하였다.

• 한국수산과학회지
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• 제10권3호
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• pp.151-162
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• 1977

분포량이 많고 식용되고 있는 중요 해조의 효율적인 이용과 영양학적인 의의를 구명하기 위한 기초자료를 얻기 위하여 동근돌김(Porphyra suborciculata). 잎파래(Enteromorpha linza). 톳(Hizikia jusiforme). 모자반(Sargassum fulvllum), 미역(Undaria pinnatifida), 청각(Codim fragile), 셀만모자반(Sargassum kjellmanianum), 구멍갈파래(Ulva pertusa)등 8종을 선정하여, 이들 해조의 불용성 단백질 추출에 영향을 주는 제요소 즉 조체처리별, 추출온도와 시간별, 시료일추출용매화, pH의 영향등을 검토하고 또한 추출액중의 단백질 심전조건에 대하여 검토하였다. 1. 식용 해조의 조단백질 함량은 둥근돌김(Porphyra suborbiculat) $24.14\%$, 미역(Undaria pinnatifida) $15.7\%$, 톳(Hizikia jusiforme) $7.66\%$, 모자반(Sargasum fulvellum) $12.61\%$, 셀만모자반(Sargassum kjellmanianum) $14.08\%$, 잎파래(Enteromorpha linza) $10.86\%$, 구멍갈파래(Ulva Pertusa) $16.60\%$, 청각(Codium fragile)$9.89\%$이었다. 2. 시료의 처리조건에 따른 추출효과는 dry icemethanol 한제 중에서 동결시켜, 해사를 첨가하여 마쇄한 시료가 수용성 단백질 추출성적이 월등하게 좋아, 막지사발에서 마쇄한 $1.5\~2.5$배의 추출성적을 보였다. 3. 시료일추출용매비는 점질물이 적은 구멍갈파래, 잎파래는 1:20(w/v)에서, 점질물량이 많은 청각,미역, 톳, 모자반, 둥근돌김 등은 1:30(w/v)에서, 셀만모자반은 1:40(w/v)일 때 추출성적이 좋았다. 4. 추출시간은 구멍갈파래, 잎파래는 1시간, 둥근돌김, 톳, 미역, 모자반, 셀만모자반은 2시간, 청각은 3시간 정도에서 가장 효과적이었다. 5. 추출온도는 톳이 $40^{\circ}C, 둥근돌김, 청각, 잎파래 미역, 모자반, 셀만모자반 $50\%$에서, 구멍갈파래는 $60^{\circ}C$에서 최고의 추출성적을 보였다. 6. pH의 영향은 각 시료마다 대동소이하여 $pH9\~12$에서 가장 좋은 결과를 얻었다. 7. 추출 최적조건에서의 수용성 단백질 추출율은 1차 추출에서 전조단백질에 대하여 평균 $63\%$, 2차 유출에서 평균 $8.6\%$ 합계 $74\%$ 정도의 수용성 단백질 추출이 가능했으며, 1차에 대한 2차의 추출비율이 7.5:1이었다. 8. 단백질 침전분리 조작으로는 Barnstein method, methanol 처리법, TCA 처리법, 가열처리법 순으로 침전효과가 있었다.

• 한국축산식품학회지
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• 제29권5호
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• pp.633-639
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• 2009

본 연구는 유단백질에 단백질 분해효소를 처리하여 가수분해 후 저분자 peptide를 ABTS법을 이용하여 항산화 활성을 측정하여 유단백질 유래 저분자 peptide의 항산화력을 측정하고자 하였다. Chymotrypsin 처리한 유청단백질의 가수분해도가 가장 높았으며, 유청단백질의 락트알부민 및 락토글로브린이 분해되어 분자량 20 kDa 이하의 저분자 단백질이 생성된 것을 전기영동을 통하여 확인하였다. 유단백질의 농도에 따른 항산화 활성을 측정한 결과, 카제인의 항산화 활성이 유청단백질보다 높게 나타났다. 유단백질을 효소에 의하여 가수분해 시 항산화 활성이 증가하였으며, 카제인 가수분해물이 유청단백질 가수분해물과 비교하여 항산화 활성이 더 높았으나, 가수분해도와 항산화 활성도의 관계는 일치하지 않았다. Trypsin에 의한 카제인 가수분해 물의 항산화 활성이 80.7%로 가장 높았다. 본 연구에서는 chymotrypsin과 trypsin에 의한 분자량 3 kDa의 카제인 분획물의 항산화 활성이 가장 우수 하였으며, 유청단백질을 trypsin으로 분해하였을 때 항산화 활성이 증가하였다.

• Journal of Periodontal and Implant Science
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• 제27권2호
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• pp.425-441
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• 1997

The neuropeptide substance P(SP) has been implicated in the mediation of inflammation and immune-mediated disease such as arthritis. Recently, it was reported that SP was markedly increased around the blood vessels in inflamed gingiva as well as in close association with the inflammatory cell infiltrate. These results support that SP may contribute to the pathophysiology of neuronal inflammation in human periodontal tissues. SP may regulate inflammatory/immune responses by stimulating the proliferation of human T cells, differentiation and antibody-secreting potential of B cells, macrophage respiratory burst, connective tissue proliferation, and the secretion of cytokines from monocytes and T cells. Here, I studied potential role of SP as a costimulatory chemical signal in inflammatory/immune responses, by determining the released proinflammatory cytokines such as $MIP-1{\alpha}$, $IL-1{\beta}$, and IL-6 from culture supernatants of homogeneous immune cell lines. Serum free cell supernatants were concentrated with TCA precipitation, fractionated with SDS-PAGE, and subjected into western blot analysis. Among 15 cell lines tested, macrophage/monocyte cell line RAW264.7 and WRl9m.1 showed the highest level of induction of $MIP-1{\alpha}$ when stimulated with LPS. Discrete IL-6 bands with multiple forms of molecular mass were detected from supernatants of B cell lines A20(32kDa), Daudi(32, 35kDa), and SKW6.4(29kDa), which were expressed constitutively. $IL-1{\beta}$ could not be detected by the method of western blot analysis from supernatants of all cell lines tested except RAW264.7, WRl9m.1, and erythroid cell line K562 which showed the least amount of $IL-{\beta}$ secretion. SP $10^{-9}M$ with suboptimal dose of LPS treatment showed synergistic induction of $MIP-1{\alpha}$ release from RAW264.7 or WR19m.1, and also IL-6 release from A20, but this synergism is not the case in costimulation of RAW264.7 or WRl9m.1 with SP $10^{-9}M$ and TPA. Although treatment of T cell line CTLL-R8 with SP $10^{-7}M$ or PHA+TPA induced modest level of $MIP-1{\alpha}$ secretion, synergism was not observed when they are applied together. These findings all together suggest the possibility of a regulatory role of SP in inflammatory/immune reaction through differential modulation of bioactivities of other chemical cosignals.

• 한국응용약물학회:학술대회논문집
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• 한국응용약물학회 1995년도 춘계학술대회
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• pp.89-89
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• 1995

Surface epithelial cells isolated from hamster tracheas and grown on a thick collagen gel become a highly enriched population of mucus-secreting cells. Epithelial cells from tracheas of hamsters were collected using enzymatic procedures and cultured under various conditions. The medium used consisted of a 1:1 mixture of medium 199 and Dulbecco's modified Eagle's (DME) medium which was conditioned before use. Insulin, transferrin, hydrocortisone, epidermal growth factor, and extract from bovine hypothalamus were used as supplement. Due to relatively low basal rates of min secretion from in vitro cultures, cultures are generally radiolabeled using $^3$H-glucosamine as a metabolic precursor. The radiolabeled mucinsreleased are quantitated by precipitation with TCA/PTA. Using this cell culture system, we investigated mucin release of goblet cells by altering the media bathing the apical surface of hamster tracheal surface epithelial(HTSE) cells. Acidic media added sulfuric acid caused sigcificant increases in mucin relesse (155${\pm}$20% at pH 4 and 146${\pm}$16% at, pH 5). Ammonium hydroxide also increased mucin release at pH 9.0(156${\pm}$17%) and pH 10(295${\pm}$9%) respectively. This additional mucin release seems to be associated with cell membrane damage as indicated by release of cellular LDH. SP stimulates secretion of mucin in cultured HTSE cells(154${\pm}$16% at 1${\times}$10$\^$-6/M and 165${\pm}$25% at 1${\times}$10$\^$-5/M. PAF at 5${\times}$10$\^$-6/M and 5${\times}$10$\^$-5/M enhanced by HTSE cells in vitro 168${\pm}$34% and 259${\pm}$30% of mucin secretion, respectively. The increase in mucin release by PAF and SP was not secondary to cell damage or necrosis. SP and PAF may be in mediating mucous secretion induced by inflammation irritantion and infection.