White rot fungi have been useful source of enzymes for the degradation of environmental pollutants including polycyclic aromatic hydrocarbons (PAHs) and synthetic dyes. PAHs are widespread organic compounds present in fossil fuels and are routinely generated by incomplete fuel combustion. PAHs are some of the major toxic pollutants of water and soil environments. Synthetic dyes are major water-pollutants, which are toxic to organisms in water environments and interfere photosynthesis of water plants. Removal of PAHs and synthetic dyes has been of interests in the environmental science especially in the environmental microbiology. Mushrooms are fungal groups that function as primary degraders of wood polyphenolic lignin. The ligninolytic enzymes produced by mushroom, including manganese peroxidase, lignin peroxidase, and laccase, mediate the oxidative degradation of lignin. The catalytic power of these enzymes in the degradation of aromatic ring compounds has been sought for the degradation of various organic compounds. In this project, we have screened 60 wild mushroom strains for their degradation activity against two representative PAHs, naphthalene and anthracene, and five aromatic dyes, including alizarin red S, crystal violet, malachite green, methylene blue, rose bengal. The degradation of PAHs was measured by GC while the decolorization of dyes was measured by both UV spectrophotometer and HPLC. As results, 9 wild mushroom strains showed high activity in degradation of PAHs and textile dyes. We also describe the secretive enzyme activities, the transcription levels, and cloning of target genes. In conjunction with this, activities of degradative enzymes, including laccase, lignin peroxidase, and Mn peroxidase, were measured in the liquid medium in the presence of PAHs and dyes. Our results showed that the laccase activity was directed correlated with the degradation, indicating that the main enzyme acts on PAHs and dyes is the laccase. The laccase activity was further simulated by the addition of $Cu^{2+}$ ion. Detailed studies of the enzyme system should be sought for future applications.
스테인레스 스틸에 대한 합성된 폴리우레탄-에폭시 수지의 기계적 특성은 SEM, FT-IR, 인장특성, 그리고 EIS에 의한 특정질량손실량, 입도분석 등에 의해 물성을 측정하였다. 친환경적인 NATM 도료에 관한 관심이 고조됨에 따라 스테인레스 등의 금속에 코팅하는 무용제 도료를 합성하였다. 폴리올, IPDI, 충진제, 실리콘 계면활성제, 촉매 등이 함유된 기존 중방식수지보다 폴리올, MDI, 충진제, 실리콘 계면활성제, 촉매가 함유되어 합성된 중방식수지의 도료가 온도변화에 따른 인장강도가 증가하였고, 전해성이 높은 용액 속에서 저헝력이 크게 측정되었으며, 내구력과 강도가 양호하였다. 견고한 NATM 수지의 기계적 특성은 가교와 부식환경의 차단력이 증가함에 따라 강도가 증가하였다. 결론적으로 중방식의 가교된 미세조직은 방청코팅이 어려운 스테인레스 스틸 같은 금속물질 코팅에도 좋은 실험결과를 보여주었다.
스테인레스 스틸에 대한 합성된 폴리우레탄-에폭시 수지의 기계적 특성은 SEM, FT-IR, 인장특성, 그리고 EIS에 의한 특정질량손실량, 입도분석 등에 의해 물성을 측정하였다. 친환경적인 중방식 도료에 관한 관심이 고조됨에 따라 스테인레스 등의 금속에 코팅하는 무용제 도료를 합성하였다. 폴리올, IPDI, 충진제, 실리콘 계면활성제, 촉매 등이 함유된 기존 중방식수지보다 폴리올, MDI, 충진제, 실리콘 계면활성제, 촉매가 함유되어 합성된 중방식수지의 도료가 온도변화에 따른 인장강도가 증가하였고, 전해성이 높은 용액 속에서 저헝력이 크게 측정되었으며, 내구력과 강도가 양호하였다. 견고한 중방식수지의 기계적 특성은 가교와 부식환경의 차단력이 증가함에 따라 강도가 증가하였다. 결론적으로 중방식의 가교된 미세조직은 방청코팅이 어려운 스테인레스 스틸 같은 금속물질 코팅에도 좋은 실험결과를 보여주었다.
In order to evaluate the cytotoxicity of lead in cultures of Balb/c mouse 3T3 cell line, various cytotoxic assays were carried out after expose cells to various concentrations of lead nitrate. Cytotoxic assays using this study were included NR assay, MTT assay, measurement of LDH and protein, synthetic rate of DNA and UDS. Intrace!!ular Ca$^{2+}$ level was also measured. Light and electron microscopic studies were done for morphological changes of lead-treated cell cultures. The results were as follows; 1. The absorbances of NR and MTT were decreased dose-dependently, and NR, and MTT, values of lead nitrate were 3.4 mM and 1.5 mM, respectively. 2. Amount of LDH released into the medium was increased in dose-dependently and LDH activity at 5 mM concentration of lead nitrate was increased to 335 % of control. 3. Amount of total protein was decreased dose-dependently, and which was half of control at 2 mM concentration of lead nitrate. 4. The synthetic rate of DNA was decreased dose-dependently, and also which was remarkably decreased at 3 mM and 5 mM concentrations of lead nitrate. 5. The synthetic rate of UDS was increased at 1 mM concentration of lead nitrate, but which was remarkably decreased at 3 mM and 5 mM concentrations of lead nitrate. 6. Intrace!lular Ca$^{2+}$ level was remarkably increased at 1 mM concentration of lead nitrate, compared with control. 7. In light microscopy, number of cells and processes were decreased according to the increase of dosage of lead nitrate. Electron microscopic findings showed that many vacuoles and cisternal dilatation of rough endoplasmic reticulum were seen in the cytoplasm at 1 mM concentration of lead nittale. From the above results, high dosage treatment of lead nitrate (>3 mM) damaged genetic malerials and it also showed cytotoxicity in mouse 3T3 cell line cultures by injury of cell organelles and Ca$^{2+}$ channel.
본 연구는 가구류를 구성하는 주요 재료의 열적조건에 따른 반응특성과 화염전파해석에 필요한 열해리 물성을 제공하기 위해 열중량분석을 수행하였다. 실험대상 시편은 가구류에 널리 적용되는 MDF 판재와 코팅재, 합성피혁과 쿠션재 등이며 가열율 $10^{\circ}C/min$, 최대 온도 $600^{\circ}C$까지 실험을 수행하였다. 실험결과 MDF 소재의 경우 $324^{\circ}C$에서 피크 반응을 나타냈었으며 MDF 코팅재의 경우 초기 피크반응온도가 $270{\sim}280^{\circ}C$로 감소하였다. 합성피혁과 폼 소재의 경우 재료를 구성하는 폴리머의 종류에 따라 기준온도와 기준 반응율이 차이를 보였으나 기준온도는 $270^{\circ}C$와 $420^{\circ}C$ 정도로 비교적 유사한 경향을 나타냈다. Lyon 등이 제시한 방법에 의해 반응상수와 활성화 에너지를 산정하기 위해 시편의 기준 온도와 기준 반응율을 제시하였으며 이러한 기초 물성연구를 통해 화염전파특성을 이해함과 동시에 화재해석의 신뢰성을 향상시키는데 기여하고자 한다.
The purpose of this study is to analyze the characteristics of environment-friendliness of waterproof materials based on comprehensive experiments on waterproofness in terms of coefficients of permeability, harmfulness of waterproof materials and fish toxicity of Oryzias latipes mortality to verify eco-toxicity of each method of construction and waterproof material, which are to be applied by taking eco-toxicity into account when building ecological flows in upper areas on natural and artificial grounds. As a result, the following conclusions have been reached in this study: 1. In regard of the harmfulness analyzed, each material showed a different result of analytical value in each lab tank. Compared to input water, pH, COD, SS, T-P, and T-N values increased a little, but DO value decreased. The value of turbidity analyzed independent of the water quality standard of aquatic ecosystem set forth by the Ministry of Environment increased a little compared to the value in input water. 2. In the experiment of fish toxicity, compacted quicklime, cement fluid waterproof material, cement mortar waterproof material and bentonite powder were found to have 100% of fish mortality, respectively, and membrane waterproof material showed 83.3% of mortality, indicating strong fish toxicity. Improved asphalt sheet (63.3%) and synthetic rubber sheet (53.3%) were analyzed to have medium fish toxicity, while bentonite sheet (6.7%), Hwang-toh (6.7%) and clay (3.3%) showed relatively lower mortality and fish toxicity. 3. Regarding the analysis on waterproofness in terms of the coefficient of permeability of each waterproof material, improved asphalt sheet, synthetic rubber sheet, membrane waterproof material, cement fluid and mortar waterproof material and bentonite sheet were found impervious in case no leakage takes place in construction. Bentonite powder was found practically impervious based on the analytical results from the experiment done in compliance with weight ratios. So were the clay and Hwang-toh from the experimental results. To sum up such results as found in the experiment mentioned so far, the values of harmfulness and waterproofness analyzed were different in each lab tank, but there was absolutely little correlation with the mortality gained from the experiment on fish toxicity. In the experiment of fish toxicity, environment-friendly waterproof materials were analyzed, and it was found that clay, Hwang-toh and bentonite sheet are highly environment-friendly. In contrast, synthetic rubber and improved asphalt sheets were found to have medium-level environment-friendliness. Also, membrane water-proof materials, compacted quicklime, cement fluid and mortar waterproof material and bentonite powder were analyzed to have low environment-friendliness.
버섯 균사체 혼합배양액을 이용하여 어류질병세균에 대한 항균 및, 항산화활성, 그리고 인체 암세포에 대한 항암 활성을 조사하였다. 항균활성 측정 결과 대부분의 시료에서 항균활성이 있는 것으로 나타났다. 그 중 YM broth에서 배양한 상황버섯과 운지버섯 균사체 배양 추출물이 가장 높은 활성을 띄었지만 10% 감귤추출물배지에서 배양한 상황버섯과 운지버섯 균사체 배양 추출물 또한 비교적 활성이 높아 합성배지가 고가임을 고려할 때 의의가 있다고 생각된다. 항산화 활성의 측정결과 10% 감귤추출물배지에서 배양한 상황버섯, 운지버섯, 꽃송이 버섯 균사체 배양추출물과 PD broth에서 배양한 상황버섯과 운지버섯 균사체 배양 추출물의 경우 1 mg/ml에서 90%에 가까운 라디컬 소거활성을 보였다. 항암활성 측정결과 10% 감귤추출액만을 첨가한 대조군보다 모든 실험구가 높은 활성을 나타냈으며 특히 10% 감귤추출물배지에서 배양한 상황버섯, 운지버섯 배양 추출액과 10% 감귤추출물배지에서 배양한 상황버섯, 운지버섯, 꽃송이버섯 균사체 배양 추출액이 높은 활성을 나타났다. 이러한 다양한 생리활성을 측정한 결과 최종적으로 감귤농축액이 첨가된 버섯균사체 배양 추출물들의 활성이 가장 좋은 것으로 나타났으며, 감귤의 천연배지로서의 이용가능성을 확인할 수 있었다. 따라서 감귤농축액 및 버섯균사체 혼합 배양을 이용한 다양한 사료첨가제 및 신소재의 개발이 가능할 것이다.
Polypeptide growth factor belong to a class of potent biologic mediator which regulate cell differentiation, proliferation, migration and metabolism. 1,25-dihydroxyvitamin $D_3$ decrease cell proliferation, and stimulate alkaline phosphatase activity which express in osteoblast during cell differentiation period. IGF-I is known to stimulate cell proliferation and differentiation too. 1,25-dihydroxyvitamin $D_3$ is known to increase IGF-I binding sites and IGF binding protein which inhibite the effect of IGF. The purpose of this study is to evaluate potential role of IGF-I as mediator that control the action of 1,25-dihydroxyvitamin $D_3$. MC3T3-E1 cell were seeded $5{\times}10^5/ml$ at 100mm culture plate in ${\alpha}-MEM$ containing 10% fetal bovine serum. After 48 hour incubation period, medium were changed ${\alpha}-MEM$ containing 5% fetal bovine serum. After 24 hours, $10^{-9}M$ 1,25-dihydroxyvitamin $D_3$ added. Total mRNA was extracted at 0, 6, 24, 48, 72 hour. PRPCR method was programed for the detection of IGF-I mRNA. In the both groups of 1,25-dihydroxy vitamin $D_3$ treated and control, alternative splicing form of IGF-I, IGF-IA and IGF-IB were expressed. In the 1,25-dihydroxyvitamin $D_3$ treated group, IGF-I mRNA expression was matained until 24 hour, there after expression was decresed. MC3T3-E1 cell were seeded $2.5{\times}10^4/ml$ at 24well plate in ${\alpha}-MEM$ containing 10% fetal bovine serum. After 48 hour incubation period, medium were changed ${\alpha}-MEM$ containing 3% fetal bovine serum. After 24 hours, $10^{-9}M$ 1,25-dihydroxyvitamin $D_3$ and 10 ng/ml IGF-I were added separately or together. Cell were cultured for 1 and 3 days, $2{\mu}Ci/ml\;[^3H]$ -thymidine was added for the last 24h of culture of each days. ${[^3H]}$-thymidine incorporation in to DNA was measured and expressed counter per minute(CPM). DNA synthetic activity was significantly decreased by 1,25-dihydroxyvitamin $D_3$ both at 1 day and 3 day, and in the combination group of 1,25-dihydroxyvitamin $D_3$ and IGF-I, DNA synthetic activity was also decreased both at 1 day and 3 days. IGF-I did not affect the DNA synthetic activity compared to control group both at 1 day and 3 day. From the above results, 1,25-dihydroxyvitamin $D_3$ was potent inhibitor of cell proliferaton in MC3T3-E1 cells. It assumed that the effect of 1,25-dihydroxyvitamin $D_3$ on osteoblast proliferation may be mediated in part by decreased level of IGF-I.
The current processer of the textile wastewater treatment are mostly consisted of a combination of a physico-chemical and a biological treatment. The overall efficiency of these processes is, however, assessed to be fairly low. It is even worse during the summer season when temperature of the wastewater rises above 40$\circ $C. Therefore, a feasible process of the textile wastewater treatment which can work efficiently at higher temperatures was investigated in this work. We used a bench scale reactor consisted of one 4 liter anaerobic and one 8 liter aerobic tank, and the thermophilic symbiotic PVA degraders, Pasteruella hemolytica KMG1 and Pseudomonas sp. KMG6 that had been isolated in our laboratory. In the preliminary flask experiments, we observed that the thermophilic symbiotic PVA degraders could not grow in the wastewater substrate. Then, we isolated the mutant strains by acclimating the KMG1and KMG6 strains to the wastewater medium. The mutant symbionts (KMG1-1 and KMG6-1) were isolated through 6 times successive transfers into the fresh wastewater medium after 5 days culture for each. The mutant strains obtained grew well in the mixed medium composed of 75% wastewater and 25% synthetic medium, and supplemented with 0.5% PVA as a sole carbon source. During the culture for 14 days at pH 7.0 and 40$\CIRC $C, the bacteria assimilated about 89% of the added PVA. The symbionts degraded equally well all the PVA substrates of different molecular weight (nd=500~30000). In contrast to the flask experiments, in the reactor system the mutant strains showed very low levels of the PVA and COD removal rates. However, the new reactor system with an additional aerobic tank attained 82% removal rate of COD, 94% of PVA degradation and 71% of color index under the conditions of 5% inoculm on the tank 2, incubation temperature of 40$\circ $C, dissolved oxygen level of 2~3 mg/l and retention time of 30 hours. This result ensures that the process described above could be an efficient and feasible treatment for the PVA contained textile wastewater at higher temperatures.
The study was conducted to determine the optimal hormone and glucose levels during the in vitro culture of bovine oocytes matured and fertilized in vitro for blastocyst development. Oocytes matured in TCM 199 + 10% FCS + hormones and glucose were fertilized in vitro in a TALP medium with swim up separated and heparin-treated epididymal cauda spermatozoa. Oocytes were cultured for 2~5 days in synthetic oviduct fluid medium (SOFM) supplemented with 10% FGS and with different hormone and glucose levels, and further cultured 5 days same medium in SOFM. The results are summarized as follows : The in vitro maturation and penetration rates of porcine oocytes cultured in TCM 199 media containing PMSG, hCG, PMSG + hCG, hCG + $\beta$ estradiol, PMSG + $\beta$ estradiol 0 to20 hours after insemination were 88.0% and 81.8%, 82.6% and 68.4%, 80.0% and 75.0%, 80.0% and 65.0%, 77.3% and 64.7%, respectively. The in vitro maturation and penetration rates of porcine oocytes cultured in TCM 199 media containing PMSG, hCG, PMSG + hCG, hCG + $\beta$ estradiol, PMSG + $\beta$ estradiol 20 to 40 hours after insemination were 92.0% and 87.0%, 92.0% and 82.6%, 91.3% and 81.0%, 85.2% and 73.9%, 87.5% and 81.0%, respectively. The cleavage and in vitro developmental rates to blastocyst of porcine oocytes cultured in TCM 199 media containing 0.05 mM, 0.10 mM, 0.30 mM, 0.50 mM, 1.00 mM, and 3.00 mM glucose lelvels 0~3 days after insemination were 31.5~48.1% and 10.0~16.7%, respectively. The cleavage and in vitro developmental rates to blastocyst of porcine oocytes cultured in TCM 199 media containing 0.05 mM, 0.10 mM, 0.30 mM, 0.50 mM, 1.00 mM, and 3.00 mM glucose levels 4~8 days after insemination were 30.0~53.8% and 8.7~19.2%, respectively. The cleavage and in vitro developmental rates to blastocyst were higher in TCM 199 media containing various glucose levels 0~3 days after insemination than 4~8 days.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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