• 제목/요약/키워드: Sulfhydryl groups

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Chlorella의 생활사를 통한 -SH화합물 함량의 변화 (The changes in the Amounts of SH Compounds in Chlorella during the Synchronous Culture)

  • 최호형;이영녹
    • 미생물학회지
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    • 제19권1호
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    • pp.8-13
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    • 1981
  • The content of sulfhydryl compounds in Chlorella cells during the life cycle in the synchronous culture is determined spectrophotomatically at 250nm(pH7.0) using p-CMB as SH-reagent. The changes in the content of-SHl compounds and protein in Chlorella cells is measured during the life cycle in connection with cell division and analyzed. 1) The amounts of total ninhydrin reactive substance increased with growth of cells but increased the more at the $L_4$ stage(cytokinesis stage) than at the $L_2$ stage (nuclear division stage). 2) The sulfhydryl content of Chlorella cells increased strikingly at the $L_2$ stage and decreased markedly at the $L_4$ stage. 3) The amounts of values -SH/protein showed a peak at the $L_2$ stage. The increase of the amount of total-SH compounds of cells during the nuclear division period was considered to be caused by the weighty roles of protein-SH groups for the formation of nuclear division apparatus and for the enzyme activity.

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미강 저장 중 지방의 산패에 따라 생성된 산화 지질이 단백질의 기능기에 미치는 영향에 관한 연구 (Changes in Functional Groups of Protein by Lipid Deterioration in the Biological System of Rice Bran)

  • 송영옥;최홍식
    • 한국식품과학회지
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    • 제22권5호
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    • pp.596-601
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    • 1990
  • 미강의 산소 농도를 제한하고 상대습도 65% 온도 $35^{\circ}C$의 저장 조건하에서 함유 지방질의 가수분해를 최대한 유도한 시료와 온도 $25-30^{\circ}C$, 상대습도 70-80%인 공기중에 방치하여 함유 지방질의 가수분해와 지방질의 산화를 동시에 유도한 미강을 시료로 하여 지방의 산화양상에 따른 단백질의 물리 화학적인 변화 즉, sulfhydryl과 disulfide group, 단백질의 용해도, 유효성 lysine, protease의 활성변화 등을 실험하였다. 산소 농도를 제한한 system에서는 지방질의 가수분해는 급격히 일어난 반면 산화는 서서히 진행되었고, 공기 중에 방치한 system에서는 지방질의 가수분해와 자동산화가 현저하게 진행되었다. 이때 각종 단백질 기능기의 함량의 감소현상은 저장기간보다 지방의 산패 정도와 더 깊은 상관성을 보였다. 지방질의 산패와 주요 단백질 기능기함량과의 상관계수는 두 system 모두에서 -0.8 이상으로서, 지방질의 산패는 단백질의 이화학적인 변화에 중요한 영향을 미침이 관찰되었다(p<0.05).

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활성화 부위의 황화기가 화학적으로 변형된 Myosin Heavy Chain의 Calpain에 의한 선택적 분해 (Myosin Heavy Chain Covalenily Modified at Its Reactive Site Sulfhydryl Residues is Preferentially Degraded by Calpain)

  • 곽규봉;정성수;이창호;하두봉;정진하
    • 한국동물학회지
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    • 제36권3호
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    • pp.347-352
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    • 1993
  • N-ethylmaleimide는 낮은 농도에서 Myosin heavy chain의 활성화 부위에 존재하는 2개의 황화기에 선택적으로 결합하는 것으로 알려져 있다. 계 근조직에서 분리된 $Ca^2$+-의존성 단백질 분해효소, Calpain은 이와같이 알킬화된 Myosin heavy chain을 알킬화 되지 않은 것에 비하여 우선적으로 분해하는 것으로 나타났다. 또한, 황화기를 특이하게 산하시키는 KMnO$_4$가 처리된 Myosin heavy chain도 산화되지 않은 것에 비하여 훨씬 빠른 속도로 분해됨을 관찰하였다. 뿐만아니라, N-ethylmaleimide나 KMnO$_4$의 처리는 농도-의존적으로 myosin에 의한 ATP 분해를 불활성화 시키었다. 이러한 결과는 활성화 부위에 존재하는 황화기의 화학적 변형은 Myosin hsavy chain이 Calapin과 같은 세포내 단백질 분해효소에 의하여 인식되는 기구임을 시사한다.

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Structural Arrangement for Functional Requirements of Brain Recombinant 4-Aminobutyrate Aminotransferase

  • Sung, Bo-Kyung;Kim, Young-Tae
    • BMB Reports
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    • 제33권1호
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    • pp.43-48
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    • 2000
  • 4-Aminobutyrate aminotransferase is a key enzyme of the 4-aminobutyric acid shunt. It converts the neurotransmitter 4-aminobutyric acid to succinic semialdehyde. In order to study the structural and functional aspects of catalytically active Cys residues of pig brain 4-aminobutyrate aminotransferase, we purified the active form in E. coli by coproduction of thioredoxin. The structural arrangement for functional requirements of a dimeric protein using a bifunctional sultbydryl reagent was then characterized, and the spatial proximity between the essential SH groups and a cofactor (pyridoxal-5'-phosphate) binding site was determined. The bifunctional sultbydryl reagent DMDS reacted with the enzyme at the ratio of one molecule per enzyme dimer. This resulted in an approximately 50% loss of enzymatic activity. The spatial proximity of the distance between the essential SH groups and the cofactor-binding site was determined by the energy transfer measurement technique. The result (approximate 20 ${\AA}$) suggested that cross-linking of two sulfhydryl groups with DMDS is not near a PLP binding site.

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단회(單回) 및 분획(分劃) X선(線) 조사(照射)가 가토(家兎)의 간(肝) 및 폐조직(肺組織)의 NP-SH 및 NP-SS에 미치는 영향(影響) (Effect of Single or Fractionated X-Irradiation on the NP-SH and NP-SS of Rabbit Liver and Lung Tissues)

  • 박수하;최경숙;김병권;권용주;이재복
    • The Korean Journal of Physiology
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    • 제4권2호
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    • pp.61-67
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    • 1970
  • In view of the importance of sulfhydryl groups in producing a chemical protection against ionizing radiation, an attempt was made to evaluate the changes of intrinsic non-protein sulfhydryl (NP-SH) and non-Protein disulfide(NP-SS) of the lung and liver tissues of rabbits following the whole body X-irradiation with 900 r either in single or fractionated $(300\;r{\times}3)$ dose. NP-SH was measured by Ellman's method, and NP-SS was measured by the electrolytic reduction method described by Dohan. Experiment was performed at 1,3,5,24 and 48 hours post·irradiation, and the results were compared with the control. The results thus obtained are summarized as follows; 1) Intrinsic levels of NP-SH and NP-SS of normal rabbits were $0.77{\pm}0.10$ and $0.61{\pm}0.07\;{\mu}mol/gm$ wet weight in liver, and $0.28{\pm}0.03$ and $0.54{\pm}0.03$ in lung tissues respectively. 2) NP-SH of liver after single X-irradiation showed no significant change in general, but at 48 hours post·irradiation, it was elevated comparing with the normal value. 3) Levels of NP-SS in liver was decreased than the normal value in the irradiated groups, and the lowest level was observed at 3 hours after single X-irradiation and at 5 hours after fractionated irradiation. 4) In lung tissues, levels of NP-SS showed no significant change from the control at earlier experimental hours, but a great decrease was observed at later Part of the experiment.

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Copper-Phenanthroline 복합체에 의해 유도되는 DNA 손상에 대한 양파와 마늘의 억제효과 (The Effects of Onion and Garlic on Copper-Phenanthroline Complex Induced DNA Degradation)

  • 박평심;이명렬
    • 한국식품영양과학회지
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    • 제21권4호
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    • pp.367-371
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    • 1992
  • 양파와 마늘이 산화적 DNA 손상에 미치는 영향을 시험관내에서 $Cu^{2+}$와 phenanthroline에 의해 유리된 TBA반응물을 측정하여 관찰한 결과 양파가 마늘보다 더 강한 TBA반응물 억제효과를 나타냈으며, 양파의 효과는 시료를 가열하여도 변화가 적엇다. 항산화효소인 SOD활성은 마늘에서, catalase와 glutathione peroxidase 활성도는 양파에서 더 높았고, -SH 기는 마늘에서 더 많았다. $Cu^{2+}$와 phenanthroline에 의한 산화적 DNA 손상에 대해 SOD와 catalase는 영향이 적고, glutathione은 영향이 비교적 큰것으로 나타나 양파의 마늘보다 더 큰 DNA손상 억제효과는 항산화 효소나, -SH 기에 의한것이 아니며, 특히 양파에 열을 가해도 DNA손상 억제 효과의 감소가 적은점으로 보아 비교적 고온에서 안정된 물질이 $Cu^{2+}$와 phenanthroline에 의한 DNA손상 억제효과를 나타내는 것으로 사료된다.

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Dimethylglutarylation에 의한 변형대두단백질의 물리화학적 특성 (The Physicochemical Properties of Modified Soybean Protein Isolate by Dimethylglutarylation)

  • 최원균;정철원
    • 한국식생활문화학회지
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    • 제14권5호
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    • pp.467-476
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    • 1999
  • We studied to improve the functional properties of soybean protein isolate by dimethylglutarylation and acetylation. Soybean protein isolate was acylated rapidly up to 80% modification and more of 80% modification was proceed slowly. Electrophoretic analysis showed that more changes in modified protein. Also, modification of soybean protein produced more ionizable tyrosines and exposed more hydrophobic groups, while modified protein exhibited a loss of reactive sulfhydryl groups. Spectrophoretic studies demonstrated that the shift was occurred at the UV 278nm and fluorescence 333nm, respectively, and the intensity decreased as the degree of modification was increased.

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설프히드릴 변형 화합물질들에 의한 양배추 포스포리파제 D의 시스테인 잔기의 특성 (Characterization of Cysteine Residues in Cabbage Phospholipase D by Sulfhydryl Group Modifying Chemicals)

  • 고은희
    • 대한화학회지
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    • 제50권5호
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    • pp.362-368
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    • 2006
  • 포스포리파아제 D(PLD)의 8개의 시스테인 잔기들의 특성을 파악하기 위해 설프히드릴(SH)기와 반응하는 각종 화학물질들을 동원하였다. 5,5-다이티오비스(2-니트로벤조산) (DTNB)는 시스테인 잔기의 SH기를 적정하기 위해 이용하였으며, 412nm에서의 환원된 DTNB의 값으로부터 자연 상태의 PLD는 1몰 당 4개의 SH기가 있는 것으로 나타났으나, 8 M의 요소 등으로 3차원 구조를 교란 시킨 변성된 PLD는 8개의 SH기가 적정되었다. 이 결과로 시스테인 잔기의 반(4개)은 외부에 노출되어 있고 그 나머지 반은 내부에 가려져 있다고 추정할 수 있다. SH기 변형 시약인 p-클로로머큐리벤조산(PCMB), 요오드아세트산, 요오드아세트아미드, 그리고 N-에칠마레이미드 등은 모두 PLD를 비활성화 시켰다. 이들 중 다이티오스라이톨(DTT)로 처리했을 때 유일하게 PCMB에 의해 비활성화 된 PLD는 가역적으로 그 활성이 회복되었다. 다양한 작용기를 갖는 다이설파이드들을 이용한 노출된 SH기의 주위 환경을 검토한 결과 음전하나 전하를 띄지 않은 다이설파이드들이 양전하를 띈 시스타민 보다 더 효과적으로 PLD를 비활성화 시키는 것으로 나타났다. 그 이외 시스테인 잔기의 산화-환원 전환이 PLD 활성에 미치는 영향을 과산화수소를 이용하여 검토하였다. 과산화수소 산화에 의해 70% 이상 잃은 PLD 활성은 대부분 DTT에 의해 복원되었다. 이들 결과로부터 양배추 PLD의 시스테인 잔기들이 모두 SH기로 존재한다는 것을 반응을 통해 확인 할 수 있었으며, 또한 외부에 노출된 4개의SH기는 PLD 활성 조절에 지대한 영향을 미치고 있는 것으로 나타났다.

X-선(線) 조사(照射)가 Ehrlich 암세포(癌細胞)의 용적(容積), 단백양(蛋白量) 및 수종(數種) Sulfhydryl 기(基)에 미치는 영향(影響)에 관(關)하여 (Effect of X-Irradiation on the Levels of some Sulfhydryl Groups, Protein and Cell Volume of Ehrlich Ascites Tumour Cells)

  • 유춘식;주영은
    • The Korean Journal of Physiology
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    • 제3권2호
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    • pp.9-16
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    • 1969
  • It is well known that a number of -SH and -SS containing substances afford a certain measure of protection against radiation effects in many biological systems, and it is conceivable that inherent -SH levels in Ehrlich ascites tumour (ELD)cells may be of decisive improtance with respect to the development of cellular radiation injury. So far, little effort has been directed to elucidate the changes in levels of different -SH and -SS groups in ELD cells when the tumour-bearing whole animal was subjected to the sublethal dose of X-irradiation. The present study was designed to bring some lights in the possible changes of and relationship between various sulfhydryl levels, such as P-SH, NP-SH and NP-SS, as well as the content of protein and cell volume of ELD cells, after subjecting the ELD mice to 1,200 r of X-irradiation. The animals used in this experiment were all mixed bred mice of $20{\sim}25\;gm$ in body weight (approximately 2 months old) irrespective of sex. 12 mice in one experiment were inoculated intraperitoneally with 0.2 ml of ascites tumour cells $(2{\times}10^6\;cells)$, and on the 7th day of the tumour growth, they were X-irradiated with 1,200 r, using the conventional X-ray machine under the following conditions: 200 Kv at 15 mA, 0.5 mm Cu filter, target-skin distance: 50 cm. Radiation dose was measured with the the Philip integrating dosimeter. At 24, 36, 48 and 60 hours after the X-irradiation, the mice were killed by cervical dislocation, and the tumours were taken out. Freshly withdrawn ascites tumours were placed in ice, and immediately the cell concentration was measured with the Coulter Cell Counter (Model B), and the hematocrit of the tumour cells were also determined. Cell volume was thus calculated by the cell concentration and hematocrit value. P-SH content of ELD cells was measured potentiometrically according to the method of Calcutt & Doxey, and NP-SH and NP-SS contents were measured spectrophotometrically by the method described by Ellman. Protein content of ELD cells was determined with the Folin phenol reagent by Lowry et al. Altogether, 48 experimental mice were used, and 12 mice with the only exception of X-irradiation were used as the control. Results obtained indicate that the contents of all the cellular sulfhydryl groups as well as cell volume and protein content of the ELD cells increase significantly as time progresses after the sub-lethal X-ray dose of 1,200 r was given and that all the increase is in a lineal fashion. The regression lines of the relative values, (i. e., taking each control value as 1) of all the values obtained, and the regression lines of cell volume, protein and NP-SH are identical, whereas those of NP-SS and P-SH appear to be widely seperated. However, the difference of those two lines (NP-SS & P-SH) were found to be not significant statistically (p>0.05). Therefore, it can be concluded from the above results that all the values examined increase in a lineal fashion with no statistically significant difference among them. Also, with the radiation dose of 1,200 r, the ELD cell becomes enlarged and swollen progressively up to 60 hours post-irradiation and it becomes more than two times of the original normal size at 60 hours after the irradiation, and up to this stage, it seems apparent that the cell division has been slow due to the X-irradiation applied in this experiment. It is well understandable that the contents of NP-SH, NP-SS, P-SH and protein of the ELD cells increase in parallel with the increase of the cell volume by the X-ray does used, but it also seems interesting to note that all the cellular substances tested show no appreciable difference in the pattern of increase.

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우유의 가열처리에 따른 지표물질의 변화 (Changes of Indicative Substances According to Heat Treatment of Milk)

  • 김경미;홍윤호;이용규
    • 한국식품영양과학회지
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    • 제21권4호
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    • pp.390-397
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    • 1992
  • 본 실험에서는 우유의 열처리 방법을 저온살균 (LTLT), 고온살균(HTST), 초고온(UHT)살균, 초고온 (UHT)멸균 등으로 나누어 열처리 정도를 파악할 수 있는 지표들-HMF, 유효성 Iysine, 유청단백질, sulfhy-dryl과 disulfide groups, ascorbic acid함량을 중심으로 열처리에 따른 이화학적 특성을 분석, 비교하였다. HMF함량은 저온 살균유에서 0.66~1.62$\mu$M/1, 고온 살균유에서 0.90~1.78$\mu$M/1, 초고온 살균유에서는 7.43~8.97$\mu$M/1, 초고온 멸균유에서는 3.53$\mu$M/1로 측정되었다. 유효성 Iysine함량은 원유에서 293.2mg/100m1 이었으며 저온 살균유에서 0.7~1.4%, 고온 살균유에서 0.3~1.7%, 초고온 살균유에서 7.1~10.8% 그리고 초고온 멸균유에서 5.2%가 각각 감소하였다. 유청 단백질의 변성율은 저온 살균유에서 9.5~11.4%, 고온 살균유에서 9.5~17.1%, 초고온 살균유는 89.3~95.0%, 그리고 초고온 멸균유에서 62.7%를 각각 나타내었다 Sulfhydryl과 disulfide groups은 sulfhydryl기가 원유에서 2.86$\mu$M/g protein이었으며 저온 살균유에서 3.1~10.1%, 고온살균유에서 7.6~11.2%, 초고온 살균유에서 14.0~19.6%, 초고온 멸균유에서 17.5%가 증가되었으며 disulfide groups은 원유가 28.93$\mu$M/g protein으로 저온 살균유에서 11.1~8.4%, 고온 살균유에서 7.0~7.4%, 초고온 살균유에서 18.2~20.4% 그리고 초고온멸균유에서 14.7%가 각각 감소하였다. Ascorbic acid 함량은 원유에서 6.05mg/1이었으며 저온 살균유에서 73~76%, 고온 살균유에서 36.4~58.7%, 초고온 살균유에서 39~53% 그리고 초고온 멸균유에서 26%의 감소율을 각각 나타냈다. 이와 같이 열처리에 따른 변화를 보면 열처리 온도가 높아짐에 따라 HMF 함량과 유청단백질의 변성율은 증가되고 Iysine함량은 감소되었으며 sulfhydryl기가 증가됨에 따라서 disulfide groups은 감소되는 경향을 보였고 ascorbic acid는 열처리 온도뿐만 아니라 시간과도 관련이 있음을 알 수 있었다. 저온 살균유와 초고온 살균유 사이에서는 지표물질들의 함량이 다소 차이가 있음을 볼 수 있었다.

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