Monoclonal antibodies (MAbs) reacting with the plasmalemma of Amoeba proteus were produced. Specificity of the 3 MAbs was determined by transfer blotting of the SDS polvacryfamide gel. AMS antibody reacted with the mucopolysaccharide bands of the spacer gel, 220 KD and 50 KD proteins of the resolving gel. The maior glycoprotein bands (175 KD, 165 KD) and 50 KD protein of the plasmalemma were recognized by AUG antibody. A third, AMP antibody reacted with the 50 KD protein only. In immunofluorescence microscopy of the enzyme treated cells, the antigens of these MAbs were sensitive to proteases, but not sensitive to neuraminidase. In the assay of cell to substratum attachment after binding with the antibody, AMG and AMP antibodies exerted no effect, but AMS hindered the attachment and cell spreading. Thus the effective components of the plasmalemma in cell to substratum attachment appear to be the mucopolysaccharides and 220 KD protein. The membranes of latex particle infested phagosomes did not show any distinction from the plasmalemma in fluorescence microscopy. Phagosome membranes of amoebae appear to be derived from the plasma membrane without selection in terms of the antigen composition. Amoeba Proteus의 세포막과 반응하는 단세포군 항체를 생산하였다. SDS polyacrylamide gel을 transfer blotting하여 이들 항체의 반응 특이성을 조사해 본 결과 AMS 단항체는 PAS로 염색되는 spacer gel의 mucopolysaccharide 린드, resolving gel의 220 KD 및 50 KD 단백질과 반응하였으며, 세포막의 주요 당단백질인 175 KD 및 165 KD 빈드와 50 KD 단백질은 AMG 단항체에 의해서 인지되었다. 그리고 AMP단항체는 공통인 50 KD 단백질과 특이하게 반응하였다. 효소처리한 아메바의 면역형광칠미경적 조사에서 이들 항체에 대한 항원분자들은 모두 단백질분해효소에 민감하였으며 neuraminidase에 대해서는 변화가 없었다. 이들 항체를 결합시킨 아메바의 용기표면 부착 가능성을 분석한 결과 AMP 및 AMG 단항체는 아무런 영향을 미치지 못하였으며 AMS 단항체는 세포의 용기표면 부착 및 세포의 펴짐을 저해하였다. 따라서 아메바의 용기표면 부착은 mucopolysaccharide 및 220 KD 단백질에 의해서 매게되는 것으로 나타났다. 그리고 latex particle을 담고 있는 식포막은 면역형광형미경적 조사에서 세포막과 차이가 없었다. 따라서 겐포막은 항원 조성에 있어서 비 선택적으로 세포막에서 유도되는 것으로 나타났다.
Statement of problem. Prior to determining an optimal width of micropatterned grooves provided on titanium substrata, we have done a pilot study using surface topographies in combined microm and submicrom levels. Purpose. The purpose of this study was twofold 1) to assess the proliferation and 2) to analyze the expression of genes encoding the intracellular signaling proteins involved in cell-substratum adhesions and adhesion-dependent G1 phase cell cycle progression of human gingival fibroblasts plated on smooth and microgrooved/acid-etched titanium substrata. Material and methods. Three groups of titanium discs as NE0 (smooth Ti substrata), E15 (Ti substrata with microgrooves of $15{\mu}m$ of spacing and $3.5{\mu}m$ in depth and with further acidetching), and E30 (Ti substrata with microgrooves of $30{\mu}m$ spacing and $3.5{\mu}m$ in depth and with further acid-etching) served as the human gingival fibroblasts' substrata. Viability and proliferation of fibroblasts were determined using an XTT assay. Gene expressions of fibronectin, ${\alpha}5$ integrin, CDK4, and $p27^{kip}$ were analyzed in RT-PCR. Cell-substratum interactions were analyzed in SEM. Results. From the XTT assay at 24 h incubation, the mean optical density (OD) value of E15 was significantly greater than the values of E30 and NE0. At 48 and 96 h however, the mean OD values of E30 were significantly greater than the values of E15 and NE0. No differences in the expression of PCR transcripts at 96 h incubations were noted between groups, whereas at 48 h, an unexpected increase in the expression of all the transcripts were noted in E15 compared with other two groups. Fibroblasts were observed to orient and adhere inside the microgrooves. Conclusion. Micropatterned grooves and acid-etching on Ti substrata alter viability and gene expression of adhered human gingival fibroblasts.
인간의 상피세포로부터 유래된 암세포의 일종인 HeLa 세포는 거의 모든 기질분자에 부착하지만 spreading은 오직 collagen 혹은 gelatin에서만 일어난다. HeLa 세포의 spreading은 오직 collagen 결과 활성화된 phosphoipase $A_2$(PLA$_2$)에 의한 arachidonic acid(AA)의 형성으로 유도된다. PLA$_2$에 의해 분해되는 인지질을 확인하기 위해 각종 인지질의 농도변화를 spreading 과정에서 측정한 결과 단지 phosphatidylcoline 만이 감소하였으며, 또한 다양한 lysophospholipids 중 lysophosphatidylcholine 만이 spreading 과정에 생성되는 것으로 보아 phosphatidylcoline이 PLA$_2$에 의해 분해되어 AA가 형성되는 것으로 보인다. PLA$_2$의 활성화는 세포질 CA$_2$+의 농도변화 및 세포질 pH의 알칼리화에 기인하지 않으며, 또한 pertussis 혹은 cholera toxin-sensitive G protein 역시 PLA$_2$활성화와는 무관한 것으로 나타났다.
본 연구는 환경부에서 지정하여 보호받고 있는 멸종위기야생생물 II급인 기수갈고둥(Clihton retropictus (Martens, 1879))의 분포 및 생태를 파악하고, 종과 서식지에 대하여 효과적인 보전과 관리방안을 제시하고자 진행하였다. 먼저 기수갈고둥의 분포를 전국적으로 조사하였고, 본 종의 생태적 특성을 고려하여 염분도 및 하상재료 등 환경요인을 분석하였다. 또한, 조사구별 기수갈고둥의 개체크기, 밀도, 이동을 분석하였다. 기수역 일대에서 서식하는 본 종의 특성상 염분도 분석 결과, 간조 시 0.7 ~ 16.6‰, 만조 시 1.0 ~ 17.3‰로 분석되었다. 하상재료 분석결과, 조사대상 하천별 하상재료의 구성에는 다소 차이가 존재하나 대부분 자갈(Pebble, 16 ~ 64 mm) 이상의 구성비가 높게 나타나는 것으로 확인되었다. 한편, 개체크기는 각경의 길이를 측정하였고, 기수갈고둥이 서식하는 범위가 짧은 경우, 개체크기는 거의 변화가 없었으나, 서식범위가 길수록 개체크기가 켜지는 경향을 보였다. 개체밀도는 계절별로 측정하였으며, 하계(7월~8월) 및 추계조사(9월~10월) 시 상대적으로 높은 밀도로 확인되었고, 수온이 저하되는 동계(11월~12월)로 갈수록 개체수는 현저히 감소되는 것을 확인하였다. 보전 및 관리방안을 효과적으로 수립하기 위하여 이동거리를 측정하였고, 활동기인 하계 및 추계조사 시 동계조사 시보다 많은 거리를 이동하는 것으로 확인되었다. 이와 같은 연구결과를 활용하여 기수갈고둥의 서식지 조성, 불가피한 개발행위에 의한 이주사업 및 이주대상지 선정 등 효과적인 관리방안을 수립하기 위한 기초자료로 활용되길 기대한다.
Morphological features of the two Korean Acrosorium species, A. flabellatum Yamada and A. venulosum (Zanardini) Kylin (Delesseriaceae, Rhodophyta) are described based on specimens collected from several localities along the coasts of Korea. Acrosorium flabellatum is easily distinguished from other Acrosorium species in lacking rhizoids in branchlets for attachment to substratum. The flabellate branching is also characteristic for this species. By contrast, Acrosorium venulosum is distinct from others in having the unique hooked branchlets. Taxonomic features found in the Korean Acrosorium species are compared, and a key to the species is provided based on this and previous data.
Two new species of the genus Psammocinia (Dictyoceratida, Irciniidae), P. conulosa n. sp. and P. ulleungensis n. sp., are described from Namhaedo Island and Ulleungdo Island, Korea. Psammocinia conulosa n. sp. seems to be close to both P. amodes Cook and Bergquist, 1998 and P. hawere Cook and Bergquist, 1996 on the basis of the skeletal structure. However, these three species are clearly separated by the following differences: Shape of P. amodes is spatulate and thin, with a broad blade narrowing to a semi-cylindrical stalk; P. hawere forms cups with a shallow excavated bowl, and attached to the substratum by a narrow base. The whole surface of the new species is very finely conulose. Psammocinia ulleungensis n. sp. is similar to P. gageoensis Sim and Lee, 2001 in shape, but this species is easily distinguished from P. gageoensis by the simple skeletal structure.
Microstructural examinations were performed on the anaerobic biofilm from reactor filled with PE support media. Optical microscope, SEM and fluorescent microscope were used for qualitative and morphological studies on the attached microorganism under anaerobic condition. Microorganisms were attached in crevices where protection from shear forces of surfaces where easy to contact with support media surface. A hypothesis for biofilm accumulation occurs on a surface such as polymer support media is presented schematically : 1st step ; cell-support media attachment, 2nd step ; cell-support media attachment and cell-cell attachment, 3rd step ; attached biofilm from neighboring crevices joins together and growing, 4th step ; mature and irregualar biofilm was formed. In SEM photographs, shape and structures of biofilm were observed, but microorganism species and methanogens were not identified. A large number of methanogenic bacteria were identified on the surface of PE substratum by fluorescence under 480nm of radiation and it was estimated that methanogenic bacteria was related to initial attachment of bacteria under anaerobic condition.
2003년 11월과 2004년 4월의 2회에 걸쳐 상용조류발전소 건설 예정지인 울돌목에서 발전소 건설로 인해 야기될 주변생태환경의 변화를 파악하기 위해 4개 지점의 주변 암반조간대에 형성된 기존의 부착생물상 조사가 수행됐다. 울돌목 주변의 암반조간대에 형성된 부착생물상은 서식 형태에 따라 크게 대형해조류(Macroalgae)를 포함한 고착생물, 소 이동성 부착동물, 이동성 소형 무척추동물 등으로 구분된다 부착생물상은 서식양상에 있어 각각의 정점별 특이성이 관찰되었으며, 이는 각기 다른 비생물학적 요인에 따라 지역 특유의 서식환경이 조성되어 있음을 시사하는 간접적인 결과로 간주된다. 이같은 지역 간 생물상 차이는 조위에 따른 수직분포 분석결과 주로 중부조간대를 중심으로 형성된 생물상에 따라 대별되고 있음이 발견되었다.
Spherical multicellular aggregates of adult rat hepatocytes (spheroid) which have tissue like structure, were formed and immobilized in the pores of polyurethane foam (PUF) which was used as a culture substratum. These hepatocyte/spheroids, about 100 $\mu\textrm{m}$ in diameter, have maintained higher differentiated functions than those of hepatocyte/monolayer for about 3 weeks in serum-free medium. Then, we designed a prototype module of an artificial liver support system using a PUF/spheroid packed-bed, in which hepatocyte/spheroids were immobilized at high density. The urea synthesis activity of the artificial liver was maintained at least 10 days in 100% rat blood plasma. We start examining the performance of hybrid artificial liver in an ex vivo extracorporeal experiment with an acute hepatic failure rat.
본 연구에서는 대기 습도변화에 의한 콘크리트 보수체(기층 콘크리트/보수 모르터)의 파괴현상을 조사하기 휘해서 보수체내의 비정상적인 습도분포를 계산하였다. 계산된 습도분포에 의해서 기층과 보수층 경계면 부위의 습도차이가 보수층 두께(0.5~2.5cm)와 보수작업전 기층 콘크리트 표면의 습윤처리시간(0~72hr)을 주요 변수로 하여 조사되었고, 이는 주로 시멘트 모르터로 보수된 접촉면이 없는 보수체에서 수행되었다. 계산 및 조사결과 보수층 두께가 감소하고 습윤 처리시간이 증가할수록 경계면 부위의 습도차이는 감소하는 경향을 보였고, 특히 보수후 습도차이가 음수값이 될 때의 시간을 하나의 수식으로 표시하였다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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