• Bulletin of the Korean Chemical Society
• /
• 제15권7호
• /
• pp.568-571
• /
• 1994

Streptmyces fradiae NRRL B1195 and Streptomyces kanamyceticus IFO 13414 are highly resistant to the antibiotics they produce. The ribosomes of these organisms are found to be susceptible to the antibiotics, but the cell free extract of S fradiae is found to contain a phosphotransferase and an acetyltransferase which inactivate kanamycin and neomycin, and that of S. kanamyceticus an acetyltransferse which inactivates kanamycin and neomycin. The resistance of these organisms against streptomycin is found to be due to the resistant ribosomes; actually streptomycin activates their ribosomal systems for the synthesis of polyphenylalanine.

• KSBB Journal
• /
• 제19권4호
• /
• pp.308-314
• /
• 2004

모넨신, 니저리신, 사이클로스포린 등을 하이드록실레이션 시키는 균주인 S. benihana에 존재하는 여러 가지 CYP를 클로닝하기 위해, 방선균 CYP의 보존된 부분을 통해서 degenerate primer를 제작하였고, colony hybridization을 통해서 스크리닝 한 결과 총 5 종류의 CYP가 검색되었다. 아미노산 서열의 분석 결과 방선균의 CYP 들과 매우 높은 유사성을 가졌으며, 이들 CYP의 앞 뒤 서열의 검색 결과 이 중 4개의 CYP의 downstream에는 FD 유전자가 존재함을 알 수 있었다. CYP503의 경우 다른 나머지 4개의 CYP의 서열과 차이가 많았으며, 2차 대사산물의 변형과 관련되어 있을 것으로 예상되며, ChoP와 유사성을 보이는 나머지 4개의 CYP는 스테로이드 계열 물질의 하이드록실레이션과 밀접한 연관이 있을 것으로 추정된다.

• 미생물학회지
• /
• 제27권1호
• /
• pp.56-62
• /
• 1989

Chitin 분해 활성이 높은 Streptomyces 균주들을 인삼재배 토양에서 분리하고, 그 균주들이 인상뿌리 썩음 병균인 Fµsarium solani 에 미치는 길항효과와 그 작용을 조사하였다. 분리된 Streptomyces 중 몇 균주는 F. solani 의 포자발아와 발 아판의 생장을 억제하였고 균사를 분해하였으며, 동시에 세포벽 분해효소로 알려친 Chitinase를 생산하였다. 그중에서도 S alboniger ST 59 와 S. roseolilacinus ST 129 는 길항효과가 아주 좋았는데, 병원균의 분생포자를 두 Streptomyces 의 농축배 양여액에 14일간 처리하였을 때 포지숫자가 처음 정종 정도의 20%로 줄어을였다. 특히 S. alboniger ST 59는 뱅균인 F solani의 분생포자, 균사 뿐만 아니라 분해되기 어려운 후막포자까지도 분해하였다. 이것으로 비푸어 보건데, F. solani의 이 Streptomycetes에 의한 억제작용은 항생물질에 영향을 받은 병균이 Chitinase에 의해 분해된 것으로 생각된다.

• 한국생물공학회:학술대회논문집
• /
• 한국생물공학회 2003년도 생물공학의 동향(XII)
• /
• pp.577-581
• /
• 2003

Streptomyces lividans is one of the most commonly-used streptomyetes strain as a molecular cloning and expression host. Unlike its close relative S. coelicolor, however, S. lividans rarely produces secondary metabolite such as actinorhodin in a typical glucose-containing culture condition due to insufficient expression of some antibiotic regulatory genes including afsR2. Although multiple copies of afsR2 or a glycerol-specific culture condition stimulated actinorhodin production in S. lividans, both failed to stimulate actinorhodin production in S. lividans cultured in a typical glucose-containing medium. To generate a culture-condition-independent actinorhodin-overproducing S. lividans strain the afsR2 gene was integrated into the S. lividans TK21 chromosome via homologous recombination, followed by the genetic confirmation. This S. lividans strain produced a significant amount of actinorhodin in both glucose-containing liquid and plate cultures, with higher actinorhodin productivity compared to the S. lividans containing multiple copies of afsR2. These results suggest that a chromosomal integration of a single copy of an antibiotic regulatory gene is a promising method for the development of a stable antibiotic-overproducing streptomycetes strain.

• 한국미생물·생명공학회지
• /
• 제13권1호
• /
• pp.93-101
• /
• 1985

Much of the progress in genetic engineering has been accomplished by employing Escherichia coli as the host organism. For many reasons, however, some other organisms have greater potential as alternatives to E. coli. In particular, streptomycetes are attractive organisms as hosts especially for the producation of various secondary metabolites such as antibiotics. In this article, therefore, we reviewed the techniques for development of vector system and expression of genes for antibiotic biosynthesis in streptomycete hosts.

• Applied Biological Chemistry
• /
• 제31권4호
• /
• pp.371-375
• /
• 1988

Streptomycetes are attractive microorganisms for their production of various secondary metabolites such as antibiotics. Now, the development of gene manipulation in this microorganisms enables the cloning and analysis of the genes which coding for antibiotic biosynthesis and resistance to the drug. In this article, we reviewed the studies with respect to the mechanisms of self-protection and cloning of the genes cloning for antibiotic biosynthesis, particularly, in microorganisms which produce antibiotic inhibitors of protein synthesis.

• 미생물과산업
• /
• 제27권2호
• /
• pp.13-22
• /
• 2001

방선균은 필라멘트 형태를 띤 대표적인 그램 양성 세균으로서, 다양한 자연환경에 존재하는 대표적인 토양 미생물이다. 방성균이 항생제를 포함한 다양한 구조의 많은 유용 생리활성물질을 생성하며, 이들의 생합성 시기가 세포의 배양상태 및 생장속도와관련이 있다는것은 이미 주지의 사살이다. 비록 방선균은 액체 배양 시에는 정체기((stationary phase)나 낮은 생장속도하에서만 항생제를 생성하며, 고체 배양 시에는 aerial mycelia 로 형태적분화(morphological differentiation)를 시작함과 동시에 생합성을 시작한다고 알려져 있으나, 각 방선균 및 항생제의 종류에 따른 특징적인 조절 기작은 매우 다양한 것으로 알려져 있다. 따라서 특징적인 조절 기작은 매우 다양한것으로 알려져 있다. 따라서 본 총성레서는 항생제 생합성이 조절되는 기작을 지금까지 밝혀진 방선균의 여러 생리적 인자 및 생합성 조절 유전자를 중심으로 정리해 보고자 한다. 항생제 생합성에 관하여 다양한 생리적 인자와 조절 유전자의 특정 및 이들의 상호관계에 대한 종합적인 이해는, 방선균 유래 항생제 조절 기작의 체계적인 규명뿐만 아니라, 방선균을 이용한 유용 생리활성물질의 생산성 향상에도 응용될수 있다는 점에서 매우 중요하다.

• 한국미생물생명공학회:학술대회논문집
• /
• 한국미생물생명공학회 2001년도 Proceedings of 2001 International Symposium
• /
• pp.118-119
• /
• 2001

A Southern-hybridization analysis and size-selected DNA library screening led to the isolation of a 6.3-kbp S. setonii DNA fragment, from which the Cl20-encoding genetic locus was found to be located within a 1.4-kbp DNA fragment. A complete nucleotide sequencing analysis of the 1.4-kbp DNA fragment revealed a 0.84-kbp ORF, which showed a strong overall amino acid similarity to the known high－G＋C gram-positive bacterial mesophilic C120s. The heterologous expression of the cloned 1.4-kbp DNA fragment in E. coli demonstrated that this Cl20 possessed a thermophilic activity within a broad temperature range and showed a higher activity against 3-methy1catechol than catechol or 4-methy-catechol, but no activity against protocatecuate.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
• /
• 제4권4호
• /
• pp.278-284
• /
• 1994

Streptomyces spp. purchased from American Type Culture Collection and Institute for Fermentation in Osaka, and donated from Northem Regional Research Laboratory, and those isolated from soil samples were assayed to isolate many plasmids harboring streptomycetes. Among these qrganisms, 5 small size-plasmid carrying organisms SNUS 8810-597A, 8810-600, 8810-754, 8811-344, and 8811-347 were characterized and their plasmids pSJ597, pSJ600, pSJ754, pSJ344, and pSJ347 were isolated in a large scale. The plasmid harboring organisms were sensitive to neomycin, kanamycin, gentamicin, and thiostreptone, but some of them showed weak or strong resistance against streptomycin, chloramphenicol, ampicillin, and tetracycline. It was confirmed that pSJ597 and pSJ600 do not carry antibiotic biosynthetic genes. pSJ600 showed a pock-forming character.

• 대한의생명과학회지
• /
• 제18권1호
• /
• pp.29-34
• /
• 2012

Streptomycetes are gram-positive filamentous bacteria that are well-known for producing a vast array of bioactive compounds, including more than 70 % of commercially important antibiotics. For the research about Streptomyces sp., the protoplast and electroporation transformation method have been the general techniques for the construction of transformants. However, these techniques have low efficiency and are time-consuming. Another option is intergenic conjugation, which is used for DNA transfer using methylation-deficient E. coli as a DNA donor to avoid the methylated-DNA-dependent restriction systems of actinomycetes. This conjugation method has been widely improved and applied to many other actinomycetes. In this research, an effective transformation procedure for the construction of expression vector by using gateway system was established to avoid limit of restriction enzyme site for cloning of target gene based on transconjugation by Escherichia coli ET12567/pUZ8002 with a pSET152 integration vector.