• 한국미생물·생명공학회지
• /
• 제20권5호
• /
• pp.534-542
• /
• 1992

Streptomyces S-217 균주가 생산하는 trypsin 저해물질의 생산 및 정제조건을 검토하였다. 저해물질의 생산은 500ml 후라스크의 배양에서 2 mannitol, 0.9, peptone의 배지와 초기 pH는 7.0 배양시간은 66시간 및 온도30$^{\circ}C$의 조건에서 제일 높았으며, 무기염의 효과는 크게 영향이 없었다. 정제는 column chromatography와 HPLC에 의하여 정제하였다. 정제된 trypsin 저해물질의 초대파장은 $\lambda_{max}$ 215nm이었고, 용해도는 물에는 95, methanol과 dimethylsulfoxide에서는 70% 및 75%이었다.Trypsin 저해물질 복합체 형성시간은 10분 정도였으며, trypsin 효소의 50% 저해농도($IC^{50}$)는 15$\mu$g/ml 이었다. 저해물질의 pH 안정성은 $100^{\circ}C$ 10분간 열처리시 pH 5~9에서 100% 활성이 유지되었으며, 산성측보다 알칼리측이 안정하였고, 열안정성은 $100^{\circ}C$, pH7.0에서 1시간 동안 50% 활성을 유지하였다.

• 한국미생물·생명공학회지
• /
• 제17권3호
• /
• pp.207-212
• /
• 1989

토양으로부터 분리 한 균주 YS-221-B로부터 $\alpha$-D-Glucosidase Inhibitor 생산조건을 검토한 결과는 다음과 같다. 최적 pH와 온도는 8.0, 3$0^{\circ}C$였으며, 탄소원으로는 mannitol, 1-Inositol, erythritol과 같은 당알코올이 양호하였으며, 질소원으로는 asparagine, beef extract가 양호하였다. Riboflavin, folic acid, thiamine과 같은 vitamin의 첨가에 의해서 저해물질 생산이 10~20% 증가되었으며, 금속이온 중에 $Zn^{++}$, $Mg^{++}$은 약 20% 정도 물질생산을 촉진시켰으나 Li$^+$, Co$^{++}$ $Ca^{++}$, Fe$^{++}$ 등은 감소시켰다. 그리고 pH8.0, 3$0^{\circ}C$에서 8~9일간 배양함으로써 저해물질 생산이 최고에 달하였다.

• 한국미생물·생명공학회지
• /
• 제17권4호
• /
• pp.358-364
• /
• 1989

토양으로부터 분리한 Streptomyces sp. YSA-130으로부터 활성이 좋은 결정화된 alkaline protease를 분리하였다. Alkaline protease 생산의 최적 배양조건은 2.0% soluble starch, 1.0% soytone, 0.3% $K_2$HPO$_4$, 0.02% MgSO$_4$.7$H_2O$, 0.8% $Na_2$CO$_3$ 3$0^{\circ}C$, pH 10.5에서 72 시간 배양하였을 때 였다. Alkaline protease이 정제는 (NH$_4$)$_2$SO$_4$. 분별침전, 투석, DEAE cellulose column chromatography, Sephadex G-75 gel filtration, crystallization으로 하였으며, 그 결과 비활성도 14,290unit/mg, 정제도 23.8 배였고, 수율은 20.0% 이었다. Alkaline protease의 반응 최적온도와 pH는 6$0^{\circ}C$ 와 11.5이었으며, 효소의 pH 안정성은 5.5-12.0에서 안정하였고, 온도 안정성은 5$0^{\circ}C$까지 안정하였으며, $Ca^{++}$ ion 첨가시 6$0^{\circ}C$까지 안정성이 증가하였다. Alkaline protease의 분자량은 30,000이었으며 금속이온, EDTA, 환원제는 활성에 영향이 없었고 DFP에 의해 저해되었다. 계면활성제에 저항성이 크고 $H_2O$$_2$에 대한 잔존활성은 60% 을 유지하였다.

• 한국미생물·생명공학회지
• /
• 제6권4호
• /
• pp.149-153
• /
• 1978

1) 토양에서 분리한 Streptomyces 속중에 chitinase를 강하게 분비하는 균 일주를 분리선별하여 그 효소학적 성질 및 생성조건을 조사하였다. 2) 3$0^{\circ}C$에서 진탕배양하면서 경시적으로 본효소 생산을 조사한 바 45시간만에 최대 생산을 보였으며 또한 배지내에 glucose를 0.375% 첨가하였을 때 효소생산이 최대에 달하였으며 그 이상의 농도에서는 효소생산에 오히려 조해현상이 일어났다. 3) 본효소의 최적 pH는 7.0, 최적온도는 5$0^{\circ}C$ 였으며 pH 6.5~8.0에서 비교적 안정하였고 7$0^{\circ}C$에서 20분간 열처리에서도 안정하였다. 4) 금속 이온에 대한 영향은 Co$^{2+}$ 에 의해 활성화 되었고 Hg$^{2+}$, Ni$^{2+}$, Pb$^{2+}$ 등 중금속인 경우 $10^{-2}$ M 정도의 고농도에서 약 50%정도 실활하였다. 또한 본효소는 Aspergillus oryzae에 대해서도 비교적 강하게 작용하였다.

• Archives of Pharmacal Research
• /
• 제20권4호
• /
• pp.372-374
• /
• 1997

In order to develop new anti-inflammatory agents having different action mechanisms compared with nonsteroidal and steroidal anti-inflammatory drugs, the culture broths of various actinomycetes isolated from soil were screened using an in vivo mouse ear edma assay and one strain (Streptomyces sp. MT 2705-4: KCTC 8651 P) was selected. Activity-guided purification led to the isolation of a polyether compound, dianemycin. Topically, dianemycin showed a potent anti-inflammatory activity in mouse ear edema induced by croton-oil or arachidonic acid.$ED_{50}$value of dianemycin was found to be 0.8 mg,/ear compared to 0.4 mg/ear of prednisolone in croton-oil ear edema. However, dianemycin did not show the inhibitory activity in UV-erythema and delayed hypersensitivity reaction. These results indicate that dianemycin is a potential topical anti-inflammatory agent.

• Current Research on Agriculture and Life Sciences
• /
• 제20권
• /
• pp.49-54
• /
• 2002

본 연구는 팽이버섯의 병재배용 폐배지를 이용하여 폐상퇴비를 제조하고 퇴비의 이화학성 및 미생물을 분석한 내용이다. 폐상퇴비의 유기물 함량은 43.29%, 유기물함량/질소비는 27.00, 전질소함량은 1.60%, 수분함량은 46.48%, 염농도는 0,64%, $P_2O_5$는 1.32%, $K_2O$ 1.18%로 나타났다. 퇴비내 존재하는 미생물의 수는 $1.6{\times}10^{10}$(cfu/g)으로 나타났으며, 이들 미생물을 동정한 결과 대부분이 Bacillus sp.으로 나타났고 주로 B. lentimobus, B. coagulans, B. brevis, Clostridium thermocellum, Escherichia coli 등이 존재하였고, 방선균류는 주로 Streptomyces thermovulgaris, S. thermofuscus 등 Streptomyce sp.가 주종이며, Micropolyspora faeni도 존재하였다. 곰팡이류는 Aspergillus sp. 나 Penicillum sp. 등이 존재하는 것으로 확인되었다.

• 한국미생물·생명공학회지
• /
• 제20권5호
• /
• pp.551-558
• /
• 1992

Streptomyces sp. S56으로부터 endoinulase를 생산하고 정제하여 물화학적으로 성질을 조사하였다. 조효소는 DEAE-cellulose column chromatography 및 Sephadex G-200 gel filtration에 의하여 정제하였으며, 정제된 효소는 polyacrylamide gel 전기영동결과 단일 band로 나타나서 전기영동상 순수하게 분리되었다. 정제효소의 최적 pH는 5.5-6.0, 최적온도는 $50^{\circ}C$였으며, 최적 온도에서의 열안정성은 1시간 처리후 42%의 잔류활성을 보였다. 정제효소는 금속이온 중 $Mn^{2+}$에 의해서는 활성이 증가되었으나, $Ag^{+}$, $Hg^{+}$, $Cu^{2+}$, $Zn^{2+}$, $Fe^{3+}$, $Mo^{6+}$ 에 의해서는 활성이 50% 이상 감소하였다. EH한 EDTA, 8-hydroxyquinoline에 의하여 활성이 저해되는 것으로 보아 metalloenzyme인 것으로 추정되었다. 본 효소는 inulin 내부의 $\beta$-2,1 결합을 가수분해하여 fructose oligomer를 생산하는 inulase 활성만을 가지고 있었으며 invertase 및 $\alpha$-glucosidase 활성은 나타내지 않았다. Inulin에 대한 Km값은 0.287mM, $V_{max}$ $0.109{\mu}mol/min$이었다. 효소의 촉매작용에 관하여는 amino acid residue는 tryptophan로 추정되었으며 그 외에 arginine, tyrosine, lysine, methionine, histidine, cysteine 및 cystine의 chemical modification 실험결과 효소활성저해가 나타나지 않아 이들 amino acid residue는 효소작용에 직접적으로 관여하지 않는 것으로 추정되며 carboxyl기도 효소활성에 영향을 미치지 않는 것으로 나타났다.

• 미생물학회지
• /
• 제40권3호
• /
• pp.183-188
• /
• 2004

TNT 분해 세균 Stenotrophomonas sp. OK-5는 세 개의 다른 NAD(P)H-nitroreductase의 활성 fractions (NTR fractions I, II, III)을 갖고 있는 것으로 확인된 바 있다. 본 연구에서는 NTR fractions I, II, III에 대한 생리학적 특성과 분자생물학적 특성을 규명하고자 하였다. TNT에 대한 균주 OK-5의 NTR fractions I, II, 그리고 III의 활성은 억제 물질인 $\beta$-mercaptoethanol의 첨가 시에 효소의 활성 이 모두 억제되는 것으로 확인되었다. TNT와 그 유사 기질을 이용하여 균주 OK-5에서 분리된 NTR의 기질 특이성을 조사한 결과, nitrobenzene, 그리고 RDX에 대 해서는 비교적 활성 이 높게 나타났으나 2,6-DNT와 2,4-DNT에서는 낮은 활성을 나타내는 것으로 확인되었다. 균주 OK-5에서 정제된 NTR fraction I의 N-말단 아미노산 서 열은 $^1MSDLLNADAVVQLFRTARDS^20$로 분석되었고, Xanthomonas campestris의 NTR과 X. axonopodis의 NTR에서 각각 70%와 65%로 비교적 높은 유사성을 가지는 것으로 나타났다. 균주 OK-5의 NTR fraction I의 효소를 암호화하는 SmOK5nrI 유전자의 염기서열을 확인하고 분석된 유전자로부터 유추되는 아미노산 서열을 각각 비교한 결과 X. campestris의 NTR과 81%, X. axonopodis의 NTR과 75%,그리고 Streptomyces avermitilis의 NTR과 30%의 유사성이 있는 것으로 조사되었으나, Pseudomonas putida KT2440의 NTR (pnrB)과는 16%로 낮은 유사성이 있는 것으로 확인되었다.

• KSBB Journal
• /
• 제14권6호
• /
• pp.682-687
• /
• 1999

Streptomyces virginiae 유래의 virginiamycin 생합성 유도인자인 VB-C를 이용하여 다른 방선균에의 항생물질 생산 유도 기능을 검토하였다. Erythromycin 생산균인 Streptomyces erythraeus를 공시균주로 사용하였으며, VB-C 결합 receptor 유전자가 포함된 plasmid(pARS 701, 9 kb)를 공시균주에 도입하여 transformant로 사용하였다. Parent와 transformant 모두 유도인자인 VB류를 생산하였으며, VB-C의 signal 전달에 관여하는 결합 단백질의 존재가 확인되었다. Parent는 본배양 0, 20, 44시간째에 합성 VB-C 300 ng/ml를 첨가시 초기 항생물질 생산시기가 약 8시간 이상 단축되었다. Transformant는 본배양 44시간에 첨가시 6시간 이상 항생물질 생산시기가 단축되었고 항생물질 생산량도 증가되었으며, parent에 비해 B. subtilis에도 강한 항균력을 나타내었다. 또한 항균 spectrum은 parent보다는 transformant가 생산한 항생물질의 항균호과가 더 큰 것으로 나타났으며, VB-C를 첨가한 경우 미첨가 경우보다 넓은 항균 spectrum을 보였다. 이들 결과에서 공시균인 S. erythraeus에서 VB signal 전달에 따른 항생물질 생산유도가 입증되었으며, VB-C receptor gene의 도입에 따른 발현과 함께 VBs의 유도, 항생물질의 생산시기의 단축 및 생산량의 증가가 예상됨에 따라 다양한 Streptomyces sp. 균주를 대상으로 항생물질의 대량생산을 비롯한 새로운 2차 대사산물 생산에의 응용이 예상되었다.

• 한국미생물·생명공학회지
• /
• 제27권4호
• /
• pp.339-343
• /
• 1999

Pasteurella haemolytica is well known to cause severe pneumonia, consolidation and oedema of the lung, and fibrinous pleurisy under the stress and infection of virus in the cattle. In the course of our screening for antimicrobial agents against P.haemloytica, compound 51086 has been isolated from the fermentation broth of Streptimyces sp. 51086. The compound 51086 was purified by SiO2, Sephadex LH-20 and ODS column chromatographies and HPLC, subsequently. The structure of compound 51086 was determined as hygromycin A by combination of 1H NMR, 13C NMR, HMBC, and ESI-MS. This compound showed significant antibacterial activity against P.haemolytica and P.multocida.