Genetically-modified mesenchymal stem cells (GM-MSCs) have emerged as promising therapeutic tools for orthopedic degenerative diseases. GM-MSCs have been widely reported that they are able to increase bone and cartilage tissue regeneration not only by secreting transgene products such as growth factors in a long-term manner, also by inducing MSCs into tissue-specific cells. For example, MSCs modified with BMP-2 gene increased secretion of BMP-2 protein resulting in enhancement of bone regeneration, while MSCs with TGF-b gene did cartilage regeneration. In this review, we introduce several growth factors for gene delivery to MSCs and strategies for bone and cartilage tissue regeneration using GM-MSCs. Furthermore, we describe strategies for strengthening GM-MSCs to more intensively induce tissue regeneration by co-delivery system of multiple genes.
Kim, Sung-Wan;Yun, Eun-Young;Kim, Seong-Ryul;Park, Seung-Won;Kang, Seok-Woo;Lee, Kwang-Gill;Kwon, O-Yu;Goo, Tae-Won
International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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v.21
no.2
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pp.151-155
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2010
Protein disulfide isomerase (PDI) catalyzes the oxidation of disulfides and the isomerizatiob of incorrect disulfides in new polypeptides during folding in the oxidizing environment of the endoplasmic reticulum (ER). To increase recombinant protein hSCF (human stem cell factor) production, we have developed expression system using the Bombyx mori PDI (bPDI) as a fusion partner. bPDI gene fusion was found to improve the production of recombinant hSCFs. Thus, we conclude that bPDI gene fusion will be very useful for the large-scale production of biologically active recombinant proteins.
Objectives : Coriandrum sativum is a medicinal herb that is used to enhance organoleptic quality and food flavor and as source of natural antioxidants. This research investigated the anti-inflammatory activity of Coriandrum sativum stem methanol extract (CSSE) using RAW 264.7 cells. Methods : Production of tumor necrosis factor-${\alpha}$(TNF-${\alpha}$), interleukin (IL)-$1{\beta}$, IL-6, and nitric oxide (NO) in the culture supernatant, protein expression of inducible nitric oxide synthase (iNOS), cyclooxygenase-2 (COX-2), and nuclear factor-kappa B (NF-${\kappa}B$) in the extract were assayed. Results : Treatment with CSSE ($100{\mu}g/m{\ell}$) resulted in inhibited levels of protein expression of lipopolysaccharide- (LPS-) induced iNOS, COX-2, and NF-${\kappa}B$ as well as production of TNF-${\alpha}$, IL-$1{\beta}$, IL-6, and NO induced by LPS. Conclusions : These results demonstrate that CSSE exhibits anti-inflammatory activities via decreasing production of pro-inflammatory mediators through suppression of the pathways of NF-${\kappa}B$ in LPS-induced RAW 264.7 cells. Thus, CSSE may have therapeutic potential for a variety of inflammation-mediated diseases.
In order to provide the basis for developing practical mouse embryonic stem cells (mESCs) culture method, how the endogenous level of self-renewal-stimulating factor genes was altered in the mESCs by different extracellular signaling was investigated in this study. For different extracellular signaling, mESCs were cultured in 2 dimension (D), 3D and integrin-stimulating 3D culture system in the presence or absence of leukemia inhibitory factor (LIF) and transcriptional level of $Lif$, $Bmp4$ and $Wnt3a$ was evaluated in the mESCs cultured in each system. The expression of three genes was significantly increased in 3D system relative to 2D system under LIF-containing condition, while only $Wnt3a$ expression was increased by 3D culture under LIF-free condition. Stimulation of integrin signaling in mESCs within 3D system with exogenous LIF significantly up-regulated transcriptional level of $Bmp4$, but did not induce transcriptional regulation of $Lif$ and $Wnt3a$. In the absence of LIF inside 3D system, the expression of $Lif$ and $Bmp4$ was significantly increased by integrin signaling, while it significantly decreased $Wnt3a$ expression. Finally, the signal from exogenous LIF significantly caused increased expression of $Lif$ in 2D system, decreased expression of $Bmp4$ in both 2D and 3D system, and decreased expression of $Wnt3a$ in integrin-stimulating 3D system. From these results, we identified that endogenous expression level of self-renewal-stimulating factor genes in mESCs could be effectively regulated through artificial and proper manipulation of extracellular signaling. Moreover, synthetic 3D niche stimulating endogenous secretion of self-renewal-stimulating factors will be able to help develop growth factor-free maintenance system of mESCs.
Field test was conducted to investigate primary factors reducing rapeseed harvesting using a reciprocating cutter-bar of combine. The results showed that the correlation between crop moisture content and yield loss had a U-type, which indicated that the yield reduction increased at too high and too low crop moisture contents. The proper ranges of crop moisture contents were 27${\sim}$35%, 21${\sim}$56%, and 62${\sim}$73% in case of grain, pod and stem, respectively. Crop moisture content was negatively correlated with header loss, but positively correlated with threshing loss. In contrary, stem moisture content showed positive correlations with total loss, threshing loss and separation loss. Working speed was positively correlated with header loss. Total flow rate, pod flow rate and stem flow rate were highly correlated with threshing loss and separation loss. However, grain flow rate did not show any correlation with total loss. According to the principal component analysis, two principal components were derived as components with eigenvalues greater than 1.0. The contribution rates of the first and the second components were 52.7% and 38.9%, which accounted for 91.6% of total variance. As a contributive factor influencing total loss of rapeseed mechanical harvesting, a crop moisture content factor was greater than a crop flow rate factor. The stepwise multiple regression analysis for total loss was conducted using crop moisture content factor, crop flow rate factor and coefficient. However, the model did not show any correlation among independent and dependent factors ($R^2$=0.060).
Jung, Sung Cheol;Lumbres, Roscinto Ian C.;Won, Hyun Kyu;Seo, Yeon Ok
Journal of Ecology and Environment
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v.37
no.4
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pp.177-184
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2014
This study was conducted to develop allometric equations and to determine the stem density and biomass expansion factor (BEF) for the estimation of the aboveground and belowground biomass of Cryptomeria japonica in Jeju Island, Korea. A total of 18 trees were harvested from the 40-year-old C. japonica stands in Hannam experimental forest, Jeju Island. The mean biomass of the C. japonica was $50.4Mg\;ha^{-1}$ in stem wood, $23.1Mg\;ha^{-1}$ in root, $9.6Mg\;ha^{-1}$ in branch, $4.6Mg\;ha^{-1}$ in needle and $4.3Mg\;ha^{-1}$ in stem bark. The diameter at breast height (DBH) was selected as independent variable for the development of allometric equations. To evaluate the performance of these equations, coefficient of determination ($R^2$) and root mean square error (RMSE) were used and results of the evaluation showed that $R^2$ ranged from 71% (root biomass equation) to 96% (aboveground biomass equation) and the RMSE ranged from 0.10 (aboveground biomass equation) to 0.33 (root biomass equation). The mean stem density of C. japonica was $0.37g\;cm^{-3}$ and the mean aboveground BEF was $1.28g\;g^{-1}$. Furthermore, the ratio of the root biomass to aboveground biomass was 0.32.
Mac-2BP is a ligand of the galectin family that has been suggested to affect tumor proliferation and metastasis formation. We assessed Mac-2BP expression at the transcriptional and translational levels to evaluate nerve growth factor (NGF)-induced Mac-2BP expression. A time kinetic analysis using reverse transcription-polymerase chain reaction showed that NGF-induced Mac-2BP transcript levels were 4-5 times higher than in controls. Mac-2BP enzyme-linked immunosorbent assay and immuno-fluorescence staining showed a 2-3-fold increase in intracellular and secreted Mac-2BP as a result of NGF stimulation. This increase was regulated by Akt activation and NF-${\kappa}B$ binding. p65 and p50-NF-${\kappa}B$ are major transcriptional factors in the Mac-2BP promoter region, and were shown to be regulated in accordance with the Akt activation states. Collectively, these results suggest that NGF induces Mac-2BP expression via the PI3K/Akt/NF-${\kappa}B$ pathway.
P7C3 and its derivatives, 1-(3,6-dibromo-9H-carbazol-9-yl)-3-(p-tolylamino)propan-2-ol (1) and N-(3-(3,6-dibromo-9H-carbazol-9-yl)-2-hydroxypropyl)-N-(3-methoxyphenyl)-4-methylbenzenesulfonamide (2), were previously reported to increase neurogenesis in rat neural stem cells (NSCs). Although P7C3 is known to increase neurogenesis by protecting newborn neurons, it is not known whether its derivatives also have protective effects to increase neurogenesis. In the current study, we examined how 1 induces neurogenesis. The treatment of 1 in NSCs increased numbers of cells in the absence of epidermal growth factor (EGF) and fibroblast growth factor 2 (FGF2), while not affecting those in the presence of growth factors. Compound 1 did not induce astrocytogenesis during NSC differentiation. 5-Bromo-2'-deoxyuridine (BrdU) pulsing experiments showed that 1 significantly enhanced BrdU-positive neurons. Taken together, our data suggest that 1 promotes neurogenesis by the induction of final cell division during NSC differentiation.
Adipose-derived stem cells (ADSCs) are considered promising tools for tissue regeneration. However, ADSCs have very poor proliferation capacity. Therefore, fetal bovine serum (FBS) is generally added to the culture media of ADSCs. As FBS contains many uncharacterized components that may affect cellular functions, methods for serum-free cultures of ADSCs have been widely investigated. In this study, to develop an efficient method for a serum-free culture of ADSC-T, we used an ADSC line established by introducing the simian virus 40 (SV40) T gene into primary ADSCs. We then investigated the effect of amino acids, vitamins, and other components on the growth of ADSC-T. When the ADSC-T cells were plated with DMEM/F12 serum-free medium, the cells did not proliferate, and the mixture of amino acids, vitamins, and B27 supplement did not increase the growth of the cells. However, when the ADSC-T cells were provided with serum-free DMEM/F12 after they had been cultured with serum-supplemented DMEM for 24 h, the cells proliferated, and the vitamins and B27 supplement increased the cell growth. Stem-Pro serum-free medium also appeared to be useful as a suspension culture for the ADSC-T cells. The ADSC-T cells secreted large amounts of proteins of around 70 kDa. Insulin-like growth factor (IGF) and fibroblast growth factor basic (FGF basic) were secreted by ADSC-T in larger amounts in the serum-free culture than in the serum-supplemented culture.
Park, Sangkyu;Kim, Seung-Han;Back, Chang-Gi;Lee, Seung-Yeol;Kang, In-Kyu;Jung, Hee-Young
Research in Plant Disease
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v.22
no.2
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pp.116-121
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2016
In 2015, stem blight of Rubus crataegifolius was observed in Pohang, Korea. The symptoms began as dark red spots in the stem, which led to stem blight, then leaf blight, and eventually resulted in death. A fungal isolate was obtained from a symptomatic stem and incubated on a potato dextrose agar plate. The isolated fungus produced white, cloudy mycelia turned black in 3 days. Based on the morphological characteristics, the causal fungus was assumed to be Botryosphaeria sp. A pathogenicity test was conducted according to Koch's postulates. To identify the causal agent, the combined sequence of the internal transcribed spacer, ${\beta}$-tubulin, and translation elongation factor $1{\alpha}$ genes were used for phylogenetic analysis. Approximately 1,200 bp of the combined sequence clearly suggested that the isolated pathogen was Botryosphaeria parva. This is the first report on stem blight in R. crataegifolius caused by B. parva in Korea.
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