Kim, Sung Woo;Kim, Min Su;Kim, Chan-Lan;Hwang, In-Sul;Jeon, Ik Soo
Development and Reproduction
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v.21
no.3
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pp.229-235
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2017
In the field of reproductive medicine, assessment of sperm motility is a key factor for achieving successful artificial insemination, in vitro fertilization, or intracellular sperm injection. In this study, the motility of boar sperms was estimated using real-time imaging via confocal microscopy. To confirm this confocal imaging method, flagellar beats and whiplash-like movement angles were compared between fresh and low-temperature-preserved ($17^{\circ}C$ for 24 h) porcine sperms. Low-temperature preservation reduced the number of flagellar beats from $11.0{\pm}2.3beats/s$ (fresh sperm) to $5.7{\pm}1.8beats/s$ and increased the flagellar bending angle from $19.8^{\circ}{\pm}13.8^{\circ}$ (fresh) to $30.6^{\circ}{\pm}15.6^{\circ}$. These data suggest that sperm activity can be assessed using confocal microscopy. The observed motility patterns could be used to develop a sperm evaluation index and automated confocal microscopic sperm motility analysis techniques.
We examined the effects of serotonin on the spawning response, sperm motility, and D-shaped larva production in Eastern Gooeyduck clam Panopea sp. based on the sperm densities at fertilization and washing after mixing the eggs and sperm. The highest spawning induction was found showed in females and males injected with 1 mL of 2 mM serotonin. The spawning responses in females and males were higher at concentrations greater than 1 mM and 0.75 mM, respectively. Regarding the activities of sperm in sea water after serotonin injection, the sperm showed activity at >90.0% until 120 mins. We also examined the effects of sperm concentration at the fertilization and washing times after mixing the eggs and sperm. We confirmed that washing within 1 minute at a concentration of 1,500 sperms/mL or less can prevent egg destruction by polyspermy and secure a large number of D-phase larvae. These results should be useful for developing the aquaculture process for Eastern Gooeyduck clam, Panopea sp.
Seven rc mutant and seven normal male birds (Rhode Island Red suie, RIR) were used in this study to determine the effects of rc mutation on semen characteristics, testosterone profile and spermatogenic tissues. All birds were randomly selected at week 12 of age and housed in individual cages and were fed and watered ad libitum. The birds were exposed to a 14L:10D light cycle during experiment. Semen were collected at weeks 22 to 23 from each bird twice a week and evaluated for semen volume (SV), sperm concentration (SC), total sperm count (TSC), percent of sperm motility (%SM), dead sperm (%DS), and sperm metabolic activity (SMA). To determine the testosterone concentration (TC) in plasma, blood was collected at weeks 12, 16 and 18. Testicular tissue were collected, processed and evaluated for semineferous tubule diameter (STD), round spermatid number (RSN), percent elongated sperm (%ES) and semineferous tubules length (STL). Body weight (BW), comb weight (CW) and testes weight (TW) were weighted at the end of experiment (week 23). The SV, TSC and %SM were significantly higher in normal birds but the %DS was higher in blind birds (p<0.05). The SC did not differ significantly between the two groups but its value was higher in normal birds. The sperm metabolic activity in the first h of collection did not differ significantly between the two groups but after 24 h, the level of SMA in normal group was significantly higher (p<0.05). The level of TC did not differ significantly between the two genotype groups but normal birds had higher TC in all collections except the last one. The STD, RSN, %ES and STL in normal birds were higher when compared to blind birds but the differences were insignificant except for ES percent. The BW, CW and TW between the two groups did not differ significantly but the weights were higher in normal group compared to blind birds. Statistical analysis of semen characteristics, testosterone profile and histological factors were indicated detrimental effects of rc mutation in prepubertal RIR blind male birds due to lack of light.
Park, Kyun-Hee;Jang, Jun-Bock;Lee, Kyung-Sub;Cho, Jung-Hoon
The Journal of Korean Obstetrics and Gynecology
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v.19
no.1
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pp.111-124
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2006
Purpose : This study was conducted to investigate the dose dependent effects of Panax Ginseng on the reproductive functions in mice. Methods : We used the 8-week-old mice, and administered 0.2ml extract solution of Panax Ginseng in the different concentration once a day for 60 days. The control group was administered 0.2ml normal saline in the same way and duration. We counted the total, motile and normal sperm number of the cauda epididymis and measured the activities of sperm hyaluronidase, peroxidase and catalase of the isolated testis tissues. And we observed histological changes of surgically isolated testis by histochemical methods. Results : All Panax Ginseng extract solution groups showed significantly dose dependent differences in the total number, the motility and normality of sperms compared with the control group, respectively. In the histological analysis of the testicular tissues, all Panax Ginseng extract solution groups showed the enlargement of testicular lobe diameter and apparent angiogenesis between seminiferous tubules. And the activity of typical sperm enzyme, hyaluronidase, was significantly increased in the Panax Ginseng extract solution groups compared to the control group. In the antioxidant activity analysis, the activities of peroxidase and catalase were significantly increased in the Panax Ginseng extract solution groups compared to the control group. Conclusion : This study shows that Panax Giseng has the beneficial effects on the concentration, morphology and motility of sperm, the activities of sperm hyaluronidase, testicular peroxidase and catalase. We can suggest that Panax Ginseng be useful for the treatment of male infertility.
Various cryoprotective agents (CPA) were tested to establish the best conditions for the cryopreservation of sperm from black porgy Acanthopagrus schlegeli acclimated and raised in freshwater (BFW). Survival rates of frozen/thawed sperm from BFW were higher in the order of dimethy sulfoxide (DMSO), glycerol, ethylene glycol (EG) and methanol. Sperm motility was higher in the order of glycerol, DMSO, EG and methanol. These effects were the same in thawed sperm from black porgy raised in seawater (BSW). Thus, optimum CPA for sperm cryopreservation of BFW and BSW were DMSO and glycerol where the highest survival rates and sperm motility were found at the concentration of 10%. In particular, the survival rates and motility of thawed sperm from BFW and BSW after cryopreservation using 10% DMSO were better than when cryopreserved using 10% glycerol. On the other hand, for the thawed sperm from both BFW and BSW, the longer the preservation period was, the lower the survival rates and sperm motility were. Notably, the higher the concentration of CPA was, the lower the survival rates and sperm motility were.
This study was performed to determine the effects of nitric oxide on human sperm cell function. Semen samples were obtained from normal healthy volunteers. Motile spermatozoas collected by swim-up method were incubated up to 24 hours in Ham's F-10 medium supplemented with a various concentration of sodium nitroprusside (nitric oxide releasing agent). Sperm motility, hyperactivation, acrosome reaction rate, and acrosin activity were determined. The results are as follows; 1. 1mM of SNP resulted in a significant decrease in sperm motility ($44.8%{\pm}8.9%:78.1%{\pm}6.3%$, and hyperactivation $(10.4%{\pm}6.4%:47.7%:{\pm}9.5%)$ after incubation for 3 hours compared with the control group (Ham's F-10 alone), but had no effect on acrosome reaction. 2. At $100{\mu}M$ SNP, sperm motility was reduced after incubation for 6 hours $(54.8%{\pm}3.2%)$ compared with that of the control group $(82.7%{\pm}8.9%)$, but hyperactivation and acrosome reaction were not affected. 3. However, a lower concentration (less than $10{\mu}M$) of SNP had no effect on sperm motility and hyperactivation for 8 hours of incubation but significantly decreased them when incubation periods were increased up to 24 hours compared with the control group. On the other hand, $1{\mu}M$ and $10{\mu}M$ SNP significantly increased the acrosome reaction rate in both acrosomal status ($17.3%{\pm}5.2%$, $23.5%{\pm}4.7%$, respectively) and acrosin activity ($34.3{\mu}IU{\pm}10.5{\mu}IU,\;45.6{\mu}IU{\pm}5.6{\mu}IU$, respectively) as compared with the control group $(7.0%{\pm}4.0%,\;9.5{\mu}IU{\pm}3.4{\mu}IU)$. These results indicate that SNP, NO releasing agent, has a dose-dependent effects on the sperm cell function. Therefore it may positively affect the fertilization by promoting acrosomal reaction at a lower concentration (less than $10{\mu}M$).
The effects of diluents composition on cold storage for Scapharca broughtonii (Schrenck) sperm were examined in the percentage of sperm activity and survival rate. Various diluents of glucose solutions (10 mM Hepes-pH 7.8), 600 mM NaCl, stein solution, Ringer's solution (230 mM NaCl, 8 mM KCl, 2 mM $CaCl_2$, 3.7 mM $MgCl_2$, 0.2 mM $NaHCO_3$, 10 mM Hepes-pH 7.8), 20%, 25% ASW (NaCl 2.7 g + KCl 0.07 g + $CaCl_2$ 0.12 g + $MgCl_2$ 0.46 g + $NaHCO_3$ 0.05 g + distilled water 100 ml) were used to store th sperm at $4^{\circ}C$. The storage effect was evaluated using sperm activity and survival rate. Ringer's solution was found to be better diluents which maintained high activity and survival rate of sperm for a storage period of 7 days. Optimal pH of diluents to store the sperm at $4^{\circ}C$ is 7.5.
Lim, Han Kyu;Irfan, Zidni;Lee, Hyo Bin;Song, Ji Hoon;Lee, Yun Ho
Fisheries and Aquatic Sciences
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v.24
no.2
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pp.63-77
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2021
The aim of this research was to investigate different factors, including cryoprotective agents (CPAs), diluents, dilution ratios, equilibrium times, freezing rates, and thawing methods to optimize cryopreservation protocols for large yellow croaker (Larimichthys crocea). The parameters evaluated were sperm motility, sperm activity index (SAI), survival rate, and DNA damage. Different types of CPAs, such as dimethyl sulfoxide (DMSO), propylene glycol (PG), ethylene glycol (EG), methanol, and glycerol, were tested for sperm preservation. The highest motility, SAI, and survival rate were observed when EG was used. Different diluents such as Stein's solution, Hank's balanced salt solution, marine fish Ringer's solution, artificial seminal plasma (ASP) of small yellow croaker, and Cortland solution were investigated. The highest post-thaw motility was observed upon using ASP as the diluent. Different concentrations of EG were then mixed with ASP to identify the optimal EG concentration. Experimental results showed that the motility (70.33 ± 1.20%), SAI (5), and survival rate (78.30 ± 0.42%) of post-thaw sperm were optimum when 10% EG and ASP were used as the CPA and diluent of cryopreservation, respectively. Post-thaw sperm motility was high at equilibration times below 150 s and at an optimum dilution ratio of 1:1 (sperm: CPA + diluent) and was not significantly different compared with fresh sperm motility. The freezing rate was found to be slow below -10℃/min. The thawing temperature of 45℃ was identified as ideal. The percentage of tail DNA in post-thaw sperm at 10% EG and ASP was also investigated and was found to have more significant DNA damage than that in fresh sperm but significantly lower damage than that in post-thaw sperm at EG concentrations of 5%, 15%, and 20% (p < 0.05). The cryopreservation protocols obtained in this study will be useful in large yellow croaker hatcheries.
The objectives of present study is to investigate genetic damage of radiation in mammalian male germ cell and. to establish available screening method for determining genetic hazard by radiation. Several methods were employed to measure the genetic damage of radiation as follows: Sperm head counts, frequency occurrence of sperm with abnormal head shape, fertility, activity of LDH-X, and the induction of unscheduled DNA synthesis (U.D.S.) in male mouse were performed with the passing of time after irradiation by making use of the sequence of event that occurs during spermatogenesis. Sperm head counts and activity of LDH-X in testes were gradually reduced by increased radiation dose and with the passing of the time after irradiation. Frequency occurrence of sperm with abnormal head shape, sterile period, and the induction of unscheduled DNA synthesis were increased by increased radiation dose. It is suggested that since germ cell is a direct reflection of genetic complement, the use of male germ cell is rapid and convenient method for measuring genetic damage by radiation.
The comparison of the chemical properties of semen of black porgy Acanthopagrus schlegelii long-term acclimated reared in freshwater (BFW) and seawater (BSW) with sperm activity of salinity and ion composition. The chemical properties of seminal plasma on BFW of the factors that most there was not significant difference in the BSW. However, osmolality in seminal plasma of BFW and BSW was $307.0{\pm}4.6$ and $337.3{\pm}10.1$ mOsm/kg, respectively, where BFW showed significant lower concentration in contrast to BSW. Salinity effect on sperm motility of BFW and BSW in 0 psu solution, no sperm motility was observed, whereas in 10 psu solution, both BFW and BSW sperms showed low motility and short time post sperm activation. However, diluted in 20 and 32 psu solutions, highest motility and long time post sperm activation were observed in BFW and BSW sperm. SAI of BFW and BSW varied in depend on the osmolality regardless of ion kind and it showed the highest value in the similar osmolality of artificial seawater (956 mOsm/kg). Accordingly, even in sperm released from BFW, factors initiating sperm motility are determined by osmolality.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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