• Clinical and Experimental Reproductive Medicine
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• 제48권3호
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• pp.221-228
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• 2021

Objective: This study investigated the effect of crocin in methylglyoxal (MGO)-induced diabetic male mice. Methods: Seventy 1-month-old male NMRI mice weighing 20-25 g were divided into seven groups (n=10): sham, MGO (600 mg/kg/day), MGO+crocin (15, 30, and 60 mg/kg/day), MGO+metformin (150 mg/kg/day), and crocin (60 mg/kg/day). MGO was administered orally for 30 days. Starting on day 14, after confirming hyperglycemia, metformin and crocin were administered orally. On day 31, plasma and tissue samples were prepared for experimental assessments. Results: Blood glucose and insulin levels in the MGO group were higher than those in the sham group (p<0.001), and decreased in response to metformin (p<0.001) and crocin treatment (not at all doses). Testis width and volume decreased in the MGO mice and improved in the crocin-treated mice (p<0.05), but not in the metformin group. Superoxide dismutase levels decreased in diabetic mice (p<0.05) and malondialdehyde levels increased (p<0.001). Crocin and metformin improved malondialdehyde and superoxide dismutase. Testosterone (p<0.001) and sperm count (p<0.05) decreased in the diabetic mice, and treatment with metformin and crocin recovered these variables. Luteinizing hormone levels increased in diabetic mice (p<0.001) and crocin treatment (but not metformin) attenuated this increase. Seminiferous diameter and height decreased in the diabetic mice and increased in the treatment groups. Vacuoles and ruptures were seen in diabetic testicular tissue, and crocin improved testicular morphology (p<0.01). Conclusion: MGO increased oxidative stress, reduced sex hormones, and induced histological problems in male reproductive organs. Crocin and metformin improved the reproductive damage caused by MGO-induced diabetes.

• Journal of Ginseng Research
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• 제35권3호
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• pp.272-282
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• 2011

Ginseng (Panax ginseng Meyer) has been shown to have anti-aging effects in animal and clinical studies. However, the molecular mechanisms by which ginseng exerts these effects remain unknown. Here, the anti-aging effect of Korean red ginseng (KRG) in rat testes was examined by system biology analysis. KRG water extract prepared in feed pellets was administered orally into 12 month old rats for 4 months, and gene expression in testes was determined by microarray analysis. Microarray analysis identified 33 genes that significantly changed. Compared to the 2 month old young rats, 13 genes (Rps9, Cyp11a1, RT1-A2, LOC365778, Sv2b, RGD1565959, RGD1304748, etc.) were up-regulated and 20 genes (RT1-Db1, Cldn5, Svs5, Degs1, Vdac3, Hbb, LOC684355, Svs5, Tmem97, Orai1, Insl3, LOC497959, etc.) were down-regulated by KRG in the older rats. Ingenuity Pathway Analysis of untreated aged rats versus aged rats treated with KRG showed that the affected most was Cyp11a1, responsible for C21-steroid hormone metabolism, and the top molecular and cellular functions are organ morphology and reproductive system development and function. When genes in young rat were compared with those in the aged rat, sperm capacitation related genes were down-regulated in the old rat. However, when genes in the old rat were compared with those in the old rat treated with KRG, KRG treatment up-regulated C21-steroid hormone metabolism. Taken together, Cyp11a1 expression is decreased in the aged rat, however, it is up-regulated by KRG suggesting that KRG seems enhance testes function via Cyp11a1.

• 한국수산과학회지
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• 제32권3호
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• pp.345-352
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• 1999

이 연구는 제주도 함덕연안에 분포하는 구멍연잎성게의 생태 및 번식생활사에 관한 연구보고서이다. 시료는 북제주군 함덕에서 SCUBA를 통하여 채집하였으며, 실험실로 옮긴 뒤, 크기 및 생식소에 대한 분석을 수행하였다. 구멍연잎성게의 크기는 각장 80$\~$200mm 이었으며, 각장 140$\~$170mm 의 개체가 주를 이루었다 (N=129). 구멍연잎성게는 세립질 또는 미립질 ($125\~250\mu$m ($2\~3\phi$))의 사질에 주로 분포하였으며, 퇴적물내의 유기물을 섭취하는 퇴적물식자로 확인되었다. 성숙한 암컷의 생식소는 보라색을 띠며, 수컷은 짙은 노란색을 띤다. 암, 수 모두 11$\~$3월 사이 휴지기를 거쳐 6월경에 성숙하며, 주 방란 방정은 7$\~$10월 사이에 이루어진 것으로 추정된다. 암컷의 경우 성숙한 난은 그 직경이 평균 381$\mu$m이었다.

• 한국발생생물학회지:발생과생식
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• 제2권1호
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• pp.89-99
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• 1998

본 연구는 미성숙 혹은 성숙된 3년생 무지개 송어(Oncorhynchus mykiss) 수컷 150마리의 뇌하수체와 정자형성세포의 형태적인 변화를 조사하기 위해서 실시되었다. 3월부터 그 이듬해 2월까지 번식주기에 따라 광학현미경, 투과 및 주사전자현미경으로 정자 형성과 정자완성시기의 미세구조적 변화를 연구하였다. 뇌하수체 호르몬 분비세포의 성숙은 휴지기 (3월부터 8월까지), 정자형성기 (9월부터 11월가지), 번식기 (12월부터 2월까지)의 3가지 시기로 구분되었다. 뇌하수체 호르몬 분비세포의 미세구조가 변하는 추세는 정소의 주기적 변화와 대체적으로 일치하였다. 정자형성초기에는 여러 단계의 세포군이 하나의 세정관안에 위치해 있었다. 정원세포로부터 정자세포까지 사류ㅕ볼 때 핵과 세포질의 크기는 각 발달단게마다 점진적으로 감소하였다. 제2차 정모세포 및 정자세포의 세포질 외측에 작은 크기의 미토콘드리아가 확인되었다. 정자세포의 2개의 미토콘드리아는 세포질의 한쪽에 위치하면서 길게 늘어지기 시작하였다. 정자의 경우, 핵의 크기가 감소하였고, 핵막과 세포질막은 두부의 핵과 근접해 있었따. 2개의 미토콘드리아는 다른 척추동물과 달리 그 수가 적었고, 축사로부터 분리되어 있었다. 무지개송어의 축사구조는 축추동물의 전형적인 "9+2"형을 나타내었다. 투과 및 주사전자현미경으로 여러 단계의 정자형성세포들을 관찰한 결과 그 두부의 크기와 형태의 구체적인 차이를 확인할 수 있었다.확인할 수 있었다.

• Reproductive and Developmental Biology
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• 제35권2호
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• pp.137-141
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• 2011

These study was to investigate the in vitro fertilization and viability of fresh and vitrified oocytes. Also, the developmental capacity of IVF and intracytoplasmic sperm injection (ICSI) oocytes were investigated. Then vitrification was performed with the use of 20% ethylene glycol + 20% DMSO + 0.5 M sucrose + 10% FCS + TCM-199 medium. Vitrification immature oocytes are cultured in vitrification solution for 10 min afterwards transferred to expose at room temperature for 5 min. and transferred to the ice water for 5 min. The oocytes were sealed in a 1.0 mm straw and placed in a $LN_2$ container. Frozen oocytes were rapidly thawed in a water bath at $30{\sim}35^{\circ}C$, and then placed in TCM-199 medium containing 0.5 M sucrose for 5 min each, respectively, at $38^{\circ}C$. After being washed for 2~3 times, using fresh medium the oocytes were cultured in TCM-l99 medium supplemented with 5% FCS at $38^{\circ}C$ in 5% $CO_2$ and air. The normal morphology of fresh and vitrified-thawed oocytes were $87.1{\pm}2.1%$ and $54.8{\pm}2.5%$, respectively. The viability rates of fresh and vitrified-thawed oocytes were $70.0{\pm}2.2%$ and $41.9{\pm}2.6%$, respectively. Viability rates of vitrified-thawed oocytes were lower than that of fresh follicular oocytes (p<0.05). The in vitro maturation rates of fresh and vitrified oocytes were $45.1{\pm}3.6%$ and $28.9{\pm}4.4%$, respectively. The IVF rates of fresh follicular and vitrified-thawed oocytes were 34.00.2% and $20.2{\pm}2.6%$, respectively. The in vitro maturation and fertilization rates of vitrified-thawed oocytes were lower than those of the fresh follicular oocytes (p<0.05). A total of 350 oocytes were fixed and stained after co-incubation with spermatozoa, of which 88 had identifiable nuclear material. After IVF for 20 hrs, $25.1{\pm}3.4%$ of the oocytes found to have been penetrated by spermatozoas. Oocytes were fixed and stained after ICSI, and 105 oocytes contained identifiable nuclear material. After IVF and ICSI for 20 hrs, $34.3{\pm}3.4%$ and $59.0{\pm}2.0%$ of the oocytes were found to have been penetrated by spermatozoas. The developmental rates upon ICSI were significantly higher than those of the IVF method (p<0.05).

• 한국발생생물학회지:발생과생식
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• 제3권1호
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• pp.53-58
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• 1999

대부분의 연갑류에서 androgenic gland (AG)는 수컷의 성 분화와 성징의 발달에 관여하는 호르몬을 분비하는 것으로 알려져 있다. 징거미새우, M. nipponense의 AG는 제5보각 (fifth waking legs)의 저절 (coxopodite)내에 위치한 사정관과 수정관의 말단부 (distat vas deferens)사이에 위치하고 있었다. AG는 단일 세포 가닥 (simple cellular strand)들로 이루어져 있고 이들 세포 가닥의 바깥은 섬유성 외피 (fibrious sheath)로 둘러싸여 있었다. 특히, 각 세포 가닥의 가장자리를 둘러싸고 있는 섬유성 외피에는 미세융모 (microvilli)들이 존재하고 있었다. AG 세포의 핵은 난구형으로 관찰되었고, 핵 내에는 전자밀도가 높은 2∼3개의 핵소체 (nucleolus)와 전자밀도가 다소 낮은 과립상의 염색질 (chromatin)들이 분산되어 존재하였다. 세포질 내에는 매우 잘 발달된 조면소포체와 Golgi 복합체 그리고 횡 방향의 크리스테를 갖는 미토콘드리아가 존재하는 점으로 보아 본 종의 AG 세포는 단백-생산세포 (protein-production cell)로 판단되었다. 하지만, 단백-생산세포의 구조를 가짐에도 불구하고 이들 세포로부터 분비과립과 같은 어떠한 물질도 관찰할 수 없었다. 이러한 분비물질이 관찰되지 않는 점은 생합성된 물질이 세포 내 축적없이 혈강으로 분비되기 때문인 것으로 판단되었다.

• Applied Microscopy
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• 제41권1호
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• pp.37-45
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• 2011

암컷호르몬으로 알려져 있는 에스트로겐이 실제로는 수컷 생식기관에도 영향을 미친다. 에스트로겐은 수용체와 결합하여 그 작용을 나타낸다. Propyl pyrazole triol (PPT)은 에스트로겐 수용체 베타에 비해 상대적으로 알파에 410배 혹은 1,000배 더 높은 선택적 친화성으로 결합하는 에스트로겐 수용체 알파 촉진제이다. 본 연구에서는 성체 수컷 생쥐를 대상으로 castor oil에 각각 0.01 mg, 0.1 mg, 1 mg, 4mg의 농도로 희석한 PPT를 1주에 1회씩 8주 동안 피하주사 하였다. 대조군은 castor oil을 주 1회씩 동일한 기간 동안 생쥐에 피하주사 하였다. 정소, 수출소관, 부정소의 조직학적 변화를 현미경으로 관찰하였다. PPT 4mg의 고농도 투여군에서는 체중, 정소, 부정소의 무게가 뚜렷하게 감소되었다. 실험기간 동안 PPT에 의해 세정관의 직경, 부정소의 상피세포 높이가 감소되었다. 부정소에 붙어 있던 지방세포의 크기는 PPT에 의해 줄어들었다. PPT 4 mg 투여군의 경우, 부정소의 꼬리 부위에 저장되는 정자가 관찰되지 않았다. 결론적으로 고농도의 PPT 투여로 인해 성체 수컷 생쥐의 정자형성 억제와 같은 생리학적 변화가 유발되었고 동시에 생식기관의 조직학적 변화도 유발되었다.

• Applied Microscopy
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• 제35권2호
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• pp.89-96
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• 2005

카라신과(Characidae)에 속하는 Hemigrammus ocellifer, Gymnocorymbus ternetzi 및 Hemigrammus caudovittatus 의 경우 동물극 쪽에 정자의 통로인 난문 (micropyle)이 있으며, 3종 모두 난문 주위에 난막의 융기선이 방사형으로 위치하여 공통적인 특징을 보이지만 난막의 단면구조는 종에 따라서 서로 다른 것으로 알려져 있다. 그러나 난문의 구조가 카라신과 어류의 공통적인 과의 특성인지는 아직 밝혀져 있지 않다. 따라서 본 연구는 카라신과 어류에서 난문의 구조가 과의 공통적인 특징인지 아니면 종만이 가지는 종특성인지를 확인하고 계통분류학적 기초 자료를 얻기 위하여 Hyphessobrycon serpae의 수정란과 난막의 외부 및 내부형태를 광학현미경, 주사전자현미경 및 투과전자현미경을 이용하여 관찰하고자 하였다. Hyphessobrycon serpae의 수정란은 구형의 무색투명한 부착성 및 침성란으로 유적 (oil droplet)과 부속사는 관찰되지 않았다. 동물극 쪽에 수정을 위한 정자의 통로인 한 개의 난문 (micropyle)이 관찰되었고, 난문 주위에는 난막의 융기선이 방사형으로 배열하고 있었으며 난막의 융기선은 $13{\sim}15$개로 수정란마다 약간의 차이를 보였다. 난막의 표면은 산란상에 부착하는 기능을 수행하는 것으로 생각되는 망상형의 섬유상 구조물들이 분포하고 있었으며 이 망상구조물 내부에 pore canal이 산재하고 있었다. 수정란 난막의 두께는 $0.9{\sim}1.0{\mu}m$였으며 3층으로 구성되어 있었다. 외층은 부착기능을 하는 전자밀도가 가장 높은 섬유상층이었고, 중층은 표면에서 관찰되었던 pore canal들이 중층이 끊어진 형태로 완전히 관통되어 있었으며 내층은 전자밀도가 서로 다른 $6{\sim}7$층의 다층구조를 하고 있었다. 이상과 같이 Hyphessobrycon serpae의 수정란 난막의 미세구조적 특징은 이 종만이 가지는 독특한 형태학적 형질로서 종을 분류하는데 사용될 수 있으며 난문 주위에 난막의 융기선이 방사형으로 배열하고 있는 것은 카라신과 어류의 공통적인 과 (Family)의 특성으로 생각된다.

• 한국수산과학회지
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• 제33권5호
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• pp.403-407
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• 2000

징거미새우의 정소는 간췌장의 배면 측상부에서 심장사이에 위치하며, 한 쌍의 소엽으로 이루어져 있고 각 소엽의 선단은 서로 연결되어 있다. 그리고 각 소엽은 수많은 세정관이 결합조직으로 연결되어 있다. 각 세정관은 생식세포와 지주세포가 밀착되어 있는 생식세포대를 제외한 부분은 낮은 입방상피에 의해 내강이 형성되어 있고, 세정관의 제일 바깥은 단층편평상피로 둘러싸여 있다. 세정관 사이에는 결합조직 외에 Leydig cell-like cell도 관찰된다. 단층편평상피세포는 얇은 측면으로 연결되어 있고 종종 이웃한 세포와 포개져 있다. 지주세포는 생식세포에 비해 그 수가 현저히 적고, 대부분 생식세포대의 가장자리에 위치하고 있다. 지주세포의 세포질은 기저판과 접해 있어 기저면과 생식세포 사이는 지주세포의 원형질에 의해 분리되어 있다. 지주세포의 핵은 대부분 각져 있고, 크고 현저한 인이 핵의 중심부에 위치하고 있다. 낮은 입방상피세포는 세정관의 기저판과 접하고 있는 기저면과 일부는 생식세포대와 내강 사이에 위치하고 있다. 입방상피세포의 세포질에서는 횡 방향의 크리스테가 발달된 미토콘드리아, 층상구조의 조면소포체 그리고 Golgi 복합체들이 매우 발달되어 있다. 그리고 조면소포체와 Golgi 복합체의 볼록한 형성면 사이에는 전이소낭이, Golgi 복합체의 성숙면에서는 분비소낭이 관찰되며, 상피세포의 선단에 수많은 홈들이 존재하는 점으로 보아 exocytosis에 의해 내강으로의 물질 분비가 이루어지는 것으로 판단된다.

• 한국수정란이식학회지
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• 제21권3호
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• pp.255-262
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• 2006

본 연구는 Open Pulled Straw(OPS)방법에 의해 동결-융해한 돼지 수정란의 체외 생존 능력을 검토하기 위하여 수행되었다. 미성숙 난자의 체외 성숙을 위하여, 돼지 난소는 도축장에서 회수하였으며, 난구세포로 쌓여있는 난자는 직경 $2{\sim}6mm$의 난포로부터 난포액과 함께 흡입에 의하여 회수하였다. 회수된 미성숙 난자의 체외 성숙을 위하여 5 mM hypotaurine, 0.57 mM cysteine, 10% 난포액, 10 IU/ml PMSG 및 10 IU/ml hCG가 함유된 NCSU-23 배양액 내에서 $21{\sim}22$ 시간 배양 후, 호르몬 물질을 제거한 성숙 배양액 내에서 $21{\sim}22$ 시간 동안 추가 배양하였다. 한편 체외 수정을 위하여 동결-융해한 정액은 5.56 mM glucose, 0.33 mM na-pyruvate, 100 IU/ml penicillin, $100 {\mu}g/ml$ streptomycin 및 4 mg/ml BSA가 첨가된 D-PBS 액을 가지고 1,500 rpm에서 10분간 2회 원심분리를 실시하여 세척하였다. 체외 수정을 위한 배양액은 pH $7.2{\sim}7.4$에서 2 mM caffeine과 2 mg/ml BSA가 첨가된 mTBM 배양액을 이용하였다. 체외 수정시 정자의 최종 농도는 $2.5{\times}10^6cells/ml$로 조정하였다. 수정 8시간 후, 체외 발육을 위하여 5.0 mM hypo-taurine, 4 mg/ml BSA 및 10 ng/ml EGF가 첨가된 NCSU- 23액으로 옮겨 7일간 배양을 계속하였다. 그 후 배반포의 여러 단계에서 OPS 법에 의해 동결-보존하였다. 그 결과, 동결-융해 후 형태학적으로 정상적인 수정란의 비율은 초기 배반포(28.3%)보다는 확장 배반포(38.9%)단계에서 동결했을 때 유의적으로 높게 나타났다(p<0.05). 한편, 동결-융해 후 상해를 입은 수정란의 비율은 확장 배반포보다는 초기 배반포 단계에서 동결된 수정란에서 유의적으로 높은 성적을 보였다(p<0.05). 또 다른 실험에서, 수정란의 동결-융해 후 형태학적으로 정상인 수정란을 48시간 추가 배양했을 때, Hatching 된 수정란의 비율은 초기 배반포, 배반포 및 확장배반포기 단계에서 동결-융해한 수정란에서 각각 6.7, 20.0 및 33.3%로 발육 단계가 높을수록 동결-융해 후의 생존율도 높게 나타났다. 본 연구의 결과로부터, 돼지에서 수정란의 동결-융해 후 생존성의 향상을 위해서는 발육 단계가 높은 배반포기 단계에서의 동결이 요구되며 본 연구에서 이용된 OPS 동결 방법이 폭넓게 활용될 것으로 사료된다.