As next-generation sequencing technologies have advanced, enormous amounts of whole-genome sequence information in various species have been released. However, it is still difficult to assemble the whole genome precisely, due to inherent limitations of short-read sequencing technologies. In particular, the complexities of plants are incomparable to those of microorganisms or animals because of whole-genome duplications, repeat insertions, and Numt insertions, etc. In this study, we describe a new method for detecting misassembly sequence regions of Brassica rapa with genotyping-by-sequencing, followed by MadMapper clustering. The misassembly candidate regions were cross-checked with BAC clone paired-ends library sequences that have been mapped to the reference genome. The results were further verified with gene synteny relations between Brassica rapa and Arabidopsis thaliana. We conclude that this method will help detect misassembly regions and be applicable to incompletely assembled reference genomes from a variety of species.
This study was to examine expression of the recombinant full-length adiponectin (recombinant adiponectin) in insect ovarian cell culture system and to characterize structural properties of the recombinant adiponectin secreted in medium. Gene construct encoding the recombinant adiponectin contained N-terminal collagen-like domain (110 Amino Acids, AAs), C-terminal globular domain (137 AAs) and C-terminal peptides for detection with V5 antibody (26 AAs included adaptor peptide) and purification using the 6xHis tag (6 AAs). The approximate molecular weight of the product (monomer) was 35 kDa. Molecular mass species of the expressed recombinant adiponectin were monomer (~35 kDa), dimer (~70 kDa), trimer (~105 kDa) and hexamer (~210 kDa). The major secreted species were the LMW forms, such as monomer, dimer, and trimer. There was MMW of hexamer as minor form. HMW multimers (~300 kDa) were shown as a tracer or not detected on the SDS-PAGE in several experiments (data not shown). The multimer forms in this study were not compatible to those in animal or human serum and adipose tissue by other researcher's study in which the major multimer forms were HMW. By protein denaturing experiments with reducing reagent (${\beta}$-MeOH), anionic detergent (SDS) and heat ($95^{\circ}C$) on the SDS-PAGE, not all adiponectin multimers seemed to have disulfide bond linked structure to form multimers. The recombinant adiponectin which expressed in insect ovarian cell culture system seemed to have the limitation as full physiological regulator for the application to animal and human study.
최근에는 러브레터 ,백오리피스와 같은 웜바이러스, 트로이목마, 리눅스바이러스 등과 같은 네트워크 상의 대규모 PC를 대상으로 막대한 피해를 줄 수 있는 악성 신종 바이러스가 출현함에 따라 국내외적으로 증가추세에 있는 신종 바이러스에 대하여 보다 신속하고 능동적으로 대처하기 위해서는 인공지능기법을 적용한 새로운 형태의 차세대 악성 컴퓨터바이러스에 대한 연구가 요구된다. 이를 위해서 미확인된 차세대 악성 바이러스에 대한 신속한 자동탐지 및 제거기능을 갖는 해외의 디지털 면역시스템을 분석한다.
A simple process of fabricating micropillar structure and its influence upon enhancing electrochemical biosensor response were studied in this work. Conducting polymer PEDOT was used as a base material in formulating a composite with PVA. Micro porous PC membrane filter was used as a template for the micropillar of the composite on ITO electrode. This structure could provide plenty of encapsulating space for enzyme species. After dosing enzyme solution into this space, Nafion film tent was cast over the pillar structure to complete the micropillar cavity structure. In this way, the encapsulation of enzyme could be accomplished without any chemical modification. The amount of enzyme species was easily controllable by varying the concentration of the dosing solution. The more amount of enzyme is stored in the sensor, the higher the electrochemical response is produced. One more reason for the sensitivity improvement comes from the large surface area of the micropillar structure. Application of 0.7 V produced the best current response under the condition of pH 7.4. This biosensor showed linear response to the glucose in 0.1~1 mM range with the average sensitivity of $14.06{\mu}A/mMcm^2$. Detection limit was 0.01 mM based on S/N = 3.
Two infectious species of Streptococcosis pathogens were detected by multiplex PCR assay. Detection rates of Streptococcus iniae and S. parauberis could reach 44.9% and 55.1% respectively for one year during 2004 to 2005 in Jeju island. These findings showed that S. parauberis strains were important pathogen with streptococcosis of olive flounder in Jeju island. These findings showed that S. parauberis strains were important pathogen with streptococcosis of olive flounder in Jeiu island. In the present study we have investigated the interspecific relationship of all Jeju area of S. parauberis by RAPD analysis. Represent strains divided to four groups by RAPD fingerprints. The important differences observed between the olive flounder isolates suggest that they could constitute a well-differentiated group or a separate clonal line within this bacterial species. Though, serological research of S. parauberis strains in Jeju island not exist yet. These strains doing the serological evolution.
The aim of this study is to determine the exposure concentration of tetrabromobisphenol A(TBBPA) in southwestern coast and their photodecomposition rate. Also, it is to identify the radical species of the photodecomposition of TBBPA and their reactive byproducts using the electron spin resonance(ESR) method. TBBPA was not detected in any of the sea water samples from Mokpo, Gunsan, or Goheung. The sediment samples from Mokpo contained not detection(N.D)~50.0 ng/g dry wt., while those from Gunsan contained N.D~28.5 ng/g dry wt. and those from Goheung contained N.D~7.3 ng/g dry wt. The photodecomposition rates were $2.56{\times}10^{-6}/hr$ by visible light(400 nm), $7.98{\times}10^{-6}/hr$ by ultraviolet light(300 nm <), and $6.78{\times}10^{-6}/hr$ by sunlight. Also, we confirmed that singlet oxygen and hydroxyl radicals are the key reactive oxygen species at wavelengths greater than 400 and 300 nm, respectively. This study shows that the main byproducts formed during irradiation at wavelengths above 300 nm are 2,6-dibromobenzosemiquinone radical(2,6-$DBSQ{\cdot}^-$) and g-value 2.0048 doublet spectrum.
From 2006 to 2010, hospitals in Hanoi treated 10 human patients for dirofilariasis. The worms were collected from parasitic places, and identification of the species was completed by morphology and molecular methods. Ten parasites were recovered either from the conjunctiva (n=9) or subcutaneous tissue (n=1). The parasites were 4.0-12.5 cm in length and 0.5-0.6 mm in width. Morphological observations suggested all parasites as Dirofilaria repens. Three of the 10 parasites (1 from subcutaneous tissue and 2 from eyes) were used for molecular confirmation of the species identification. A portion of the mitochondrial cox1 (461 bp) was amplified and sequenced. Nucleotide and amino acid homologies were 95% and 99-100%, respectively, when compared with D. repens (Italian origin, GenBank AJ271614; DQ358814). This is the first report of eye dirofilariasis and the second report of subcutaneous tissue dirofilariasis due to D. repens in Vietnam.
Munang'andu, Hetron Mweemba;Munyeme, Musso;Nambota, Andrew Mubila;Nalubamba, King Shimumbo;Siamudaala, Victor M.
Parasites, Hosts and Diseases
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제49권4호
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pp.437-440
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2011
Babesia spp. were detected from 4 asymptomatic pukus captured on a game ranch in central Zambia in October 2008. Blood smears were examined in 4 species of aymptomatic free-ranging antelopes, namely the puku (Kobus vordanii), reedbuck (Redunca arundinum), bushbuck (Tragelaphus sylvaticus), and kudu (Tragelaphus strepsiceros), and showed the presence of Babesia parasites only in the puku. In the puku, the prevalence of babesiosis was estimated at 33.3% (n=12), while the overall prevalence in all examined animals was 8.5% (n=47). The parasites showed morphological characteristics of paired ring-like stages with the length varying between $1.61{\mu}m$ and $3.02{\mu}m$ ($mean=2.12{\mu}m$, n=27; $SD=0.76{\mu}m$). Both the infected and non-infected pukus showed good body condition scores (BCS), while the dominant tick species detected from all animals were Rhipicephalus appendiculatus, Rhipicephalus spp., and Boophilus spp. To our knowledge this is the first report of Babesia spp. infection in pukus in Zambia. These findings suggest that wildlife could play an important role in the epidemiology of babesiosis in Zambia.
Over past decades, numerous in vitro model has been developed to investigate drug metabolism. In the order of complexity we found the isolated perfused liver, hepatocytes in co-culture with epithelial cells, hepatocytes in suspension and in primary culture and subcellular hepatic microsomal fractions. Because they can be easily prepared from both animals (pharmacological and toxicological species) and humans (whole livers as well as biopsies obtained during surgery) hepatocytes in primary culture provide the most powerful model to better elucidate drug behavior at an early stage of preclinical development such as : 1. the characterization of main biotransformation reactions. 2. the identification of phase I and phase II isozymes involved in such reactions 3. the evaluation of interspecies differences allowing the selection of a second toxicological animal species more closely related to man on the basis of metabolic profiles 4. the detection of the inducing and/or inhibitory effects of a drug on metabolic enzymes, the prediction of drug interactions 5. the estimation of inter-individual variability in biotransformation reactions. The use of hepatocytes, and in particular those obstained from humans, at an early stage of drug development allows the obtention of more predictive preclinical data and a better knowledge of drug behavior in humans before the first administration of the drug in healthy volunteers.
Resistance to induction of apoptosis is a major obstacle for bladder cancer treatment. Bcl-2 is thought to be involved in anti-apoptotic signaling. In this study, we investigated the effect of Bcl-2 overexpression on apoptotic resistance and intracellular reactive oxygen species (ROS) generation in bladder cancer cells. A stable Bcl-2 overexpression cell line, BIU87-Bcl-2, was constructed from human bladder cancer cell line BIU87 by transfecting recombinant Bcl-2 [pcDNA3.1(+)-Bcl-2]. The sensitivity of transfected cells to adriamycin (ADR) was assessed by MTT assay. Apoptosis was examined by flow cytometry and acridine orange fluorescence staining. Intracellular ROS was determined using flow cytometry, and the activities of superoxide dismutase (SOD) and catalase (CAT) were also investigated by the xanthinoxidase and visible radiation methods using SOD and CAT detection kits. The susceptibility of BIU87-Bcl-2 cells to ADR treatment was significantly decreased as compared with control BIU87 cells. Enhanced expression of Bcl-2 inhibited intracellular ROS generation following ADR treatment. Moreover, the suppression of SOD and CAT activity induced by ADR treatment was blocked in the BIU87-Bcl-2 case but not in their parental cells. The overexpression of Bcl-2 renders human bladder cancer cells resistant to ADR-induced apoptosis and ROS might act as an important secondary messenger in this process.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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