Kim, Hye-Ra;Lee, Jeong-Chi;Jeong, Ji-Young;Lee, Youn-Kyung;Shin, Sung-Shik;Lee, Chai-Yong
Journal of Veterinary Clinics
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v.24
no.2
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pp.177-181
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2007
In the present study, a total of 547 half milk samples were collected from 274 dairy goats to perform somatic cell counts (SCC) and California mastitis test (CMT). Milk smear was stained with Pyronin Y-Methyl Green stain were classified into either epithelial or blood cells, etc. Of the 547 halves the percentage of CMT negative milk samples were 86%. Among these, 58.2% were CMT negative with SCC<500,000/ml, while 27.8% were CMT negative with SCC>500,000 ml. As expected, CMT score increased with the increase of SCC. The number of epithelial cells decreased with the increasing number of somatic cells, while the opposite was observed with the number of blood cells. These results indicate that the critical point in milk quality & CMT should be considered on the false (pseudo-SC) SCC in dairy goat.
Excised cotyledon segments of ginseng zygotic embryos at various developmental stages were cultured on MS basal medium from which somatic embryos were directly induced. The frequency of somatic embryo formation on the segments declined with the advancing zygotic embryo maturity. All of the cells in the cotyledons of immature zygotic embryos were smaller and more densely cytoplasmic than those in mature embryos. Histological examinations revealed that the poly-somatic embryos formed on immature embryos were of multi-cell originand derived from the epidermal and subepidermal cell layers. However, in the cotyledon of germinating zygotic embryos, only theepidermal cells were densely cytoplasmic and singularly competent to develop into somatic embryos resulting into single embryos at a frequency of 100%.
The structure of shoot apex in zygotic and somatic embryos of Daucus carota L. cv. Hongshim was observed by using SEM and longitudinal sections. Shoot apex of zygotic embryo was of an inverted boat shape, and these of two, three and four cotyledon somatic embryos were of an inverted boat shape, a pyramid shape and a convex diamond shape, respectively. In zygotic embryo shoot apex is consisted of small cells which are arranged in layers (tunica) and show corpus in central region. In somatic embryos shoot apices are consisted of somewhat large cells which are arranged in irregularly or slight regularly.
Excised cotyledon segments of ginseng zygotic embryos cultured on MS basal medium without growth regulators produced somatic embryos near the basal excised portion at a high frequency. The frequency of somatic embryo formation on the segments declined along with advancing zygotic embryo maturity. In immature cotyledons, all the cells of the epidermis and subepidermis were smaller and more densely cytoplasmic than those in mature cotyledons, and from which multiple cells participated in embryogenic division to form somatic embryos with multiple cotyledons and fasciated radicles (poly-embryos). But in germinating cotyledons, only the epidermal cells were densely cytoplasmic and singularly competent to develop into somatic embryos resulting in single-embryos with closed radicles. This result means that the origin and development of somatic embryos is determined according to whether the cells participating in embryonic division are in a single state or a massive state relative to cotyledon maturity.
Choi, J. Y.;J. W. Cho;D. J. Kwon;Park, C. K.;B. K. Yang;Kim, C. I.;H. T. Cheong
Proceedings of the KSAR Conference
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2002.06a
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pp.6-6
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2002
This study was conducted to investigate the effect of recipient activation time on the nuclear remodeling, chromatin structure, pronuclear formation and in vitro development of bovine nuclear transfer embryos derived from adult ear skin cells. Somatic cells were transferred to enucleated oocytes after quiescent treatments by serum starvation or culture to confluency. Nuclear transfer embryos were activated with a combination of Ca/sup 2+/-ionophore and cycloheximide at 1, 1.5, 2, 2.5, 3, and 5 h after electrofusion. (omitted)
The oocyte quality is of great importance in infertility as it reflects the follicle developmental potential and further affects the embryo development, clinical pregnancy outcomes. The analysis of gene expression in somatic cells is an important study to better clinical in vitro fertilization (IVF) outcomes in embryo selection reflecting the appropriate communication between the oocyte and somatic cells. Specifically, somatic cell transcriptomic technology can help assess biomarkers of oocyte and embryo ability. The present article aims to overview the basic aspect of folliculogenesis and review studies involving changes in candidate gene expression of cumulus or granulosa cell related to clinical outcomes in human IVF.
Three experiments were conducted with follicular oocytes, to compare some somatic cells, growth factors and media for in vitro maturation of bovine oocytes. In the first experiment, the type of somatic cells had no effects on in vitro maturation of bovine follicular ooctyes. In the second experiment, oocytes were matured in TCM199 su, pp.emented with growth factors on IVM of bovine follicular oocytes, then all were co-cultured with cumulus cells. The proportion of used oocytes that developed to expanding blastocysts was 22.2%, 20.2%, 17.7%, 22.2%, 24.4% and 20.2% after maturation in TCM199 su, pp.emented with control, insulin, IGF-I, IGF-Ⅱ, FGF and EGF, respectively. In the third experiment, oocytes were matured in BO, Ham's F10 and TCM199, then all were fertilized in BO, and embryos cultured in BO, Ham's F10 and TCM199, respectively. Cleavage rates in BO were 90%, had higher than in Ham's F10(80%) or in TCM199(64%). But production of expanding blastocysts in TCM199(21%) or Ham's F10(20.6%), had higher than in BO(4.6%).
In general, cloned pigs have been produced using the somatic cell nuclear transfer (SCNT) technique with various types of somatic cells; however, the SCNT technique has disadvantages not only in its low efficiency but also in the development of abnormal clones. This study aimed to compare early embryonic development and quality of SCNT embryos with those of induced pluripotent stem cells (iPSCs) NT embryos (iPSC-NTs). Ear fibroblast cells were used as donor cells and iPSCs were generated from these cells by lentiviral transduction with human six factors (Oct4, Sox2, c-Myc, Nanog, Klf4 and Lin28). Blastocyst formation rate in iPSC-NT (23/258, 8.9%) was significantly lower than that in SCNT (46/175, 26.3%; p < 0.05). Total cell number in blastocysts was similar between two groups, but blastocysts in iPSC-NT had a lower number of apoptotic cells than in SCNT (2.0 ± 0.6 vs. 9.8 ± 2.9, p < 0.05). Quantitative PCR data showed that apoptosis-related genes (bax, caspase-3, and caspase-9) were highly expressed in SCNT than iPSC-NT (p < 0.05). Although an early development rate was low in iPSC-NT, the quality of cloned embryos from porcine iPSC was higher than that of embryos from somatic cells. Therefore, porcine iPSCs could be used as a preferable cell source to create a clone or transgenic animals by using the NT technique.
The present study was conducted to examine the reactive oxygen species (ROS) generation levels and subsequent DNA damage in the bovine cultured somatic cells. Bovine ear skin cells were classified by serum starvation, confluence and cycling cells. Cells were stained in 10 ${\mu}M$ dichlorohydrofluorescein diacetate ($H_2DCFDA$) or 10 ${\mu}M$ hydroxyphenyl fluorescein (HPF) dye to measure the $H_2O_2$ or $^{\cdot}OH$ radical levels. The samples were examined with a fluorescent microscope, and fluorescence intensity was analyzed in each cell. $H_2O_2$ and $^{\cdot}OH$ radical levels of cultured somatic cells were high in confluence group ($7.1{\pm}0.7$ and $8.4{\pm}0.4$ pixels/cell, respectively) and significantly low in serum starvation group ($4.9{\pm}0.4$ and $7.0{\pm}0.4$ pixels/cell, respectively, p<0.05). Comet tail lengths of serum starvation ($148.3{\pm}5.7$${\mu}M$) and confluence ($151.1{\pm}5.0$${\mu}M$) groups were found to be significantly (p<0.05) increased in comparison to that of cycling group ($137.1{\pm}7.5$${\mu}M$). These results suggest that the culture type of donor cells can affect the ROS generation, which leads the DNA fragmentation of the cells.
This study was conducted to survey the relationship between the somatic cell count (SCC), and California mastitis test (CMT) & mastitis. A total of 328 quarter milk samples were collected from 211 cows suspected to have mastitis; Both SCC and CMT were performed on the samples. Milk smear was stained with Broadhurst and Paley stain and the cells were classified into either epithelial or blood cells. Bacterial isolation was made and antimicrobial susceptibility was tested. Of the 328 quarters, 78 ($23.8{\%}$) were CMT negative with SCC <750,000/ml. As expected, CMT score increased with the increase of SCC. The number of epithelial cells decreased with the increasing number of somatic cells, while the opposite was the case with the number of blood cells. The critical point was when the SCC reached 1,000,000/ml. Up to 1,000,000 cells/ml, the number of epithelial cells was greater than that of blood cells. The results indicate that when epithelia:blood cell ratio is 58.1:41.9, the milking line should be checked and bacterial isolation be performed on the samples in order to identity mastitis.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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