Stem bark of Cinchona sp. (Rubiaceae) is one of the well known drugs for its therapeutic values in traditional as well as modern medicine. Even though a lot of work has been carried out on quinoline alkaloids of Cinchona, its phenolic constituents received very little attention. In the present study, we evaluated antioxidant properties of C. officinalis stem bark methanolic extract and water extract containing phenolic compounds (total phenolics 21.37, 5.18% w/w respectively in the two extracts) in different in vitro and ex vivo models viz., antiradical activity by DPPH reduction, superoxide radical scavenging activity in riboflavin/light/NBT system, nitric oxide radical scavenging activity in sodium nitroprusside/Greiss reagent system and inhibition of lipid peroxidation induced by iron-ADP-ascorbate in liver homogenate and haemolysis of erythrocytes induced by phenylhydrazine in erythrocyte membrane stabilization study. Both the extracts exhibited very good antioxidant activity in all the models tested. The phenolic compounds including tannins present in the stem bark seem to offer protection from the oxidative damage.
To formulate the parenteral delivery of a new cephalosporin derivative, 7-${\beta}$-[(2)-2-(2-arninothiazol-4-yl)-2methoxyiminoacetamido]- 3- [(2,3-cyclopenteno-4-carbamoyl-l-pyridinium)methyl]- 3-cephem-4-carboxylate sulfate( CKD604), the stability and solubility of CKD-604 in various aqueous media were investigated. The degradation kinetics of CKD-604 in aqueous solutions (ionic strength 0.1, pH 1-8) were studied at $37^{\circ}C$. The observed degradation rates followed pseudo first order kinetics. The pH-rate profile exhibited a minimum degradation rate at pH 5. The Arrhenius activation energy was 14.2 kcal/mol in pH 5 buffer solution. Excellent agreement between the cephalosporins' theoretical pH-rate profile and the experimental data indicated that the degradation pathway of CKD-604 could be predicted according to the general pathway of cephalosporins. The solubility of CKD-604 was 8.16 mg/ml at $25^{\circ}C$. To enhance the solubility and adjust the suitable pH, CKD-604 was solubilized by using sodium ascorbate, ascorbic acid and urea. The compositions were obtained to satisfy optimum pH and concentration, and the total amount of additives was several times of the active ingredient, CKD-604.
Nitric oxide (NO) affects the growth and development of plants and also affects plant responses to various stresses. Because NO induces root differentiation, we examined whether or not it is involved in increased ROS generation. Treatments with sodium nitroprusside (SNP), an NO donor, 2-phenyl-4,4,5,5-tetramethylimidazoline-1-oxyl-3-oxide (PTIO), a specific NO scavenger, and $N{\omega}-nitro-{\text\tiny{L}}-arginine$ methyl ester hydrochloride (${\text\tiny{L}}-NAME$), an NO synthase (NOS) inhibitor, revealed that NO is involved in the adventitious root growth of mountain ginseng. Supply of an NO donor, SNP, activates NADPH oxidase activity, resulting in increased generation of $O_2{^{{\cdot}-}}$, which subsequently induces growth of adventitious roots. Moreover, treatment with diphenyliodonium chloride (DPI), an NADPH oxidase inhibitor, individually or with SNP, inhibited root growth, NADPH oxidase activity, and $O_2{^{{\cdot}-}}$ anion generation. Supply of the NO donor, SNP, did not induce any notable isoforms of enzymes; it did, however, increase the activity of pre-existing bands of NADPH oxidase, superoxide dismutase, catalase, peroxidase, ascorbate peroxidase, and glutathione reductase. Enhanced activity of antioxidant enzymes induced by SNP supply seems to be responsible for a low level of $H_2O_2$ in the adventitious roots of mountain ginseng. It was therefore concluded that NO-induced generation of $O_2{^{{\cdot}-}}$ by NADPH oxidase seems to have a role in adventitious root growth of mountain ginseng. The possible mechanism of NO involvement in $O_2{^{{\cdot}-}}$ generation through NADPH oxidase and subsequent root growth is discussed.
Objectives: This in vitro study evaluated the effect of dentin biomodifiers on the immediate and long-term bond strengths of a simplified etch and rinse adhesive to dentin. Materials and Methods: Flat coronal dentin surfaces were prepared in 120 extracted human molars. Teeth were randomly divided into 5 groups (n = 24) according to 5 different surface pre-treatments: No pre-treatment (control); 1M carbodiimide (EDC); 0.1% epigallocatechin-3-gallate (EGCG); 2% minocycline (MI); 10% sodium ascorbate (SA). After surface pre-treatment, adhesive (Adper Single Bond 2 [SB], 3M ESPE) was applied. Composite was applied into transparent plastic tubes (2.5 mm in diameter), which was placed over the bonded dentin surface. From each group, 10 samples were subjected to shear bond strength (SBS) evaluation at 24 hours (immediate) and remaining 10 samples were tested after 6 months (delayed). Additionally, 4 samples per group were subjected to scanning electron microscopic analysis for observation of resin-dentin interface. The data were statistically analysed with Shaperio-Wilk W test, 2-way analysis of variance (ANOVA), and post hoc Tukey's test. Results: At 24 hours, SBS of all surface pre-treatment groups were comparable with the control group, with significant differences found between EDC and SA groups only (p = 0.009). After 6 months storage, EDC, EGCG, and MI pre-treatments preserved the resindentin bond strength with no significant fall. Conclusions: Dentin pre-treatment with all the dentin biomodifiers except SA resulted in significant preservation of resin-dentin bond over 6 months storage period, without negatively affecting the immediate bond strength of the etch and rinse adhesive tested.
Objectives: Hydrogen peroxide ($H_2O_2$) surface treatment of fiber posts has been reported to increase bond strength of fiber posts to resin cements. However, residual oxygen radicals might jeopardize the bonding procedure. This study examined the effect of three antioxidant agents on the bond strength of fiber posts to conventional and self-adhesive resin cements. Materials and Methods: Post spaces were prepared in forty human maxillary second premolars. Posts were divided into five groups of 8 each: G1 (control), no pre-treatment; G2, 10% $H_2O_2$ pre-treatment; G3, G4 and G5. After $H_2O_2$ application, Hesperidin (HES), Sodium Ascorbate (SA) or Rosmarinic acid (RA) was applied on each group respectively. In each group four posts were cemented with Duo-Link conventional resin cement and the others with self-adhesive BisCem cement. Push-out test was performed and data were analyzed using 2-way ANOVA and tukey's post-hoc test (${\alpha}=0.05$). Results: There was a statistically significant interaction between the cement type and post surface treatment on push-out bond strength of fiber posts (p < 0.001, F = 16). Also it was shown that different posts' surface treatments significantly affect the push-out bond strength of fiber posts (p = 0.001). $H_2O_2$ treated posts (G2) and control posts (G1) cemented with Duo-link showed the highest ($15.96{\pm}5.07MPa$) and lowest bond strengths ($6.79{\pm}3.94$) respectively. Conclusions: It was concluded that $H_2O_2$ surface treatment might enhance the bond strength of fiber posts cemented with conventional resin cements. The effect of antioxidants as post's surface treatment agents depends on the characteristics of resin cements used for bonding procedure.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.45
no.2
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pp.167-173
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2016
This study investigated the effects of green tea polyphenol and vitamin C on type 2 diabetes mellitus by administering polyphenon 60 (P60) and sodium ascorbate (SA) to diabetic rats induced by high fat diet/low-dose streptozotocin. The experimental group was divided into five different groups: non-diabetic control group (NC), diabetes control group (DC), diabetes+P60 group (DM+P60), diabetes+SA group (DM+SA), and diabetes+P60+SA group (DM+P60+SA). P60 and SA were dissolved in 0.1% drinking water. After P60 and SA were administered for 16 weeks, fasting blood glucose, plasma insulin, serum triglyceride, blood urea nitrogen (BUN), and creatinine levels as well as kidney alkaline phosphatase (AP) and ${\gamma}$-glutamyltranspeptidase (GGT) activities were measured. Fasting blood glucose level increased 5-fold in the DC group compared to the NC group. In the DM+P60 group, fasting blood glucose level decreased by 14%. In the DM+P60+SA group, fasting blood glucose level decreased by 28% compared to the DC group, whereas the DM+SA group did not show any significant difference. The homeostasis model assessment for insulin resistance index increased in the DC group and decreased in the DM+P60+SA group compared to the DC group. Serum creatinine level increased in the DC group, but decreased by 17% in the DM+P60 group and by 43% in the DM+P60+SA group compared to the DC group. The serum BUN level increased in the DC group, but decreased by 41% in the DM+P60+SA group compared to the DC group. Kidney GGT and AP activities decreased in the DC group compared to the NC group; however, they were reversed by DM+P60+SA group. These results show that combined administration of both green tea polyphenol and vitamin C had better effects on improving blood glucose level, insulin resistance, serum triglyceride level, and protecting kidneys than administration of either green tea polyphenol or vitamin C alone in the context of type 2 diabetes.
Kang, Taekyeong;Kim, Sang Ho;Jung, Mi Ja;Cho, Yong Kweon
Journal of Life Science
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v.25
no.5
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pp.487-495
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2015
We carried out pH stability, chemical inhibition, chemical modification, and pH-dependent kinetic parameter assessments to further characterize protocatechuate 3,4-dioxygenase from Pseudomonas pseudoalcaligenes KF707. Protocatechuate 3,4-dioxygenase was stable in the pH range of 4.5~10.5. L-ascorbate and glutathione were competitive inhibitors with $K_{is}$ values of 0.17 mM and 0.86 mM, respectively. DL-dithiothreitol was a noncompetitive inhibitor with a $K_{is}$ value of 1.57 mM and a $K_{ii}$ value of 8.08 mM. Potassium cyanide, p-hydroxybenzoate, and sodium azide showed a noncompetitive inhibition pattern with $K_{is}$ values of 55.7 mM, 0.22 mM, and 15.64 mM, and $K_{ii}$ values of 94.1 mM, 8.08 mM, and 662.64 mM, respectively. $FeCl_{2}$ was the best competitive inhibitor with a $K_{is}$ value of $29{\mu}M$. $FeCl_{3}$, $MnCl_{2}$, $CoCl_{2}$, and $AlCl_{3}$ were also competitive inhibitors with $K_{is}$ values of 1.21 mM, 0.85 mM, 3.98 mM, and 0.21 mM, respectively. Other metal ions showed noncompetitive inhibition patterns. The pH-dependent kinetic parameter data showed that there may be at least two catalytic groups with pK values of 6.2 and 9.4 and two binding groups with pK values of 5.5 and 9.0. Lysine, cysteine, tyrosine, carboxyl, and histidine were modified by their own specific chemical modifiers, indicating that they are involved in substrate binding and catalysis.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.13
no.4
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pp.397-402
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1984
As a basic research for inhibition of enzymatic browning of apple wine, polyphenol oxidase (EC 1.10.3.1) from apple (Jonathan) was extracted, partially purified, and some properties of the enzyme and changes o( active bands by heat treatment were investigated. Optimum conditions for the enzyme reaction were pH6.5 and temperature of $30^{\circ}C$, and o-diphenol was the main substrate for the enzyme. Approximately 35% and 15% of initia lpolyphenol oxidase activity remained after heating at $60^{\circ}C$ and $70^{\circ}C$ for 1 hour, respectively. About 0.5mM of the inhibitor such as sodium metabisulfite, cysteine and ascorbic acid was required for effective inhibition of the enzyme reaction. However, EDTA was found to be a very poor inhibitor. Ethanol did not affect the enzyme activity. The number of active bands of polyphenol oxidase from apple(Jonathan) was found to be four, but two bands and one band were observed after heating at $60^{\circ}C$ and $70^{\circ}C$ for 1 hour, respectively, which showed a significant difference in thermal stability among active bands.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.15
no.2
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pp.158-164
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1986
Polyphenol oxidase in apple (Golden Delicious) was extracted, partially purified and its properties were found as follows; Polyphenol oxidase showed optimum pH for activity at 6.5 and optimum temperature at $30^{\circ}C$ and high affinity to o-diphenol compounds. Cysteine, ascorbic acid and sodium metabisulfite appeared to be most effective inhibitors. EDTA showed a slight inhibition. During the enzyme was kept in test tube at $4^{\circ}C\;and\;20^{\circ}C$ for a week, polyphenol oxidase activity decreased sharply during the first four days at $20^{\circ}C$, then decreased slowly as the storage was prolonged. At $4^{\circ}C$, the polyphenol oxidase activity appeared to be relatively stable during the first two days before activity began to decline sharply. Polyacrylamide disc gel electrophoresis indicated four bands with polyphenol oxidase activity. Three bands and one band of the active bands were observed after heating for 1hr at $60^{\circ}C\;and\;70^{\circ}C$ respectively. The enzyme activity was observed 40% after treatment at $60^{\circ}C$ and 5% after treatment at $70^{\circ}C$. Therefore, no difference in the thermal stability was observed between active bands and the enzyme activity.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.12
no.4
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pp.316-322
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1983
In order to obtain elementary data of enzymatic browning of apples and apple products and to examine effectively inhibitory method of browning, we extracted polyphenol oxidase (EC 1.10.3.1) from apple (Ralls Janet) and investigated its general properties. The optimum conditions for the enzyme reaction were pH 6.0 and temperature of $30^{\circ}C$. The enzyme was very stable at pH 4.0, and at the range of pH 5.0-9.0 its activity was above 80% compared with pH 4.0. The enzyme was very stable by heating at $40^{\circ}C$ for 1 hour, and almost 50% of enzyme activity was lost by heating at $60^{\circ}C$ for 30 minutes. The polyphenol oxidase activity was enhanced by the addition of $Cu^{2+}$ and $Mn^{2+}$, respectively, meanwhile $Na^+$, $Hg^{2+}$ and $Co^{2+}$ inhibited the enzyme activity. The enzyme activity was greatly decreased in the presence of inhibitors such as cysteine, sodium metabisulfite and ascorbic acid. The polyphenol oxidase greatly catalyzed the oxidation of o-diphenols such as chlorogenic acid and catechol, which suggests that main substrate of polyphenol oxidase is o-diphenol compounds.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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