Stem bark of Cinchona sp. (Rubiaceae) is one of the well known drugs for its therapeutic values in traditional as well as modern medicine. Even though a lot of work has been carried out on quinoline alkaloids of Cinchona, its phenolic constituents received very little attention. In the present study, we evaluated antioxidant properties of C. officinalis stem bark methanolic extract and water extract containing phenolic compounds (total phenolics 21.37, 5.18% w/w respectively in the two extracts) in different in vitro and ex vivo models viz., antiradical activity by DPPH reduction, superoxide radical scavenging activity in riboflavin/light/NBT system, nitric oxide radical scavenging activity in sodium nitroprusside/Greiss reagent system and inhibition of lipid peroxidation induced by iron-ADP-ascorbate in liver homogenate and haemolysis of erythrocytes induced by phenylhydrazine in erythrocyte membrane stabilization study. Both the extracts exhibited very good antioxidant activity in all the models tested. The phenolic compounds including tannins present in the stem bark seem to offer protection from the oxidative damage.
To formulate the parenteral delivery of a new cephalosporin derivative, 7-${\beta}$-[(2)-2-(2-arninothiazol-4-yl)-2methoxyiminoacetamido]- 3- [(2,3-cyclopenteno-4-carbamoyl-l-pyridinium)methyl]- 3-cephem-4-carboxylate sulfate( CKD604), the stability and solubility of CKD-604 in various aqueous media were investigated. The degradation kinetics of CKD-604 in aqueous solutions (ionic strength 0.1, pH 1-8) were studied at $37^{\circ}C$. The observed degradation rates followed pseudo first order kinetics. The pH-rate profile exhibited a minimum degradation rate at pH 5. The Arrhenius activation energy was 14.2 kcal/mol in pH 5 buffer solution. Excellent agreement between the cephalosporins' theoretical pH-rate profile and the experimental data indicated that the degradation pathway of CKD-604 could be predicted according to the general pathway of cephalosporins. The solubility of CKD-604 was 8.16 mg/ml at $25^{\circ}C$. To enhance the solubility and adjust the suitable pH, CKD-604 was solubilized by using sodium ascorbate, ascorbic acid and urea. The compositions were obtained to satisfy optimum pH and concentration, and the total amount of additives was several times of the active ingredient, CKD-604.
Nitric oxide (NO) affects the growth and development of plants and also affects plant responses to various stresses. Because NO induces root differentiation, we examined whether or not it is involved in increased ROS generation. Treatments with sodium nitroprusside (SNP), an NO donor, 2-phenyl-4,4,5,5-tetramethylimidazoline-1-oxyl-3-oxide (PTIO), a specific NO scavenger, and $N{\omega}-nitro-{\text\tiny{L}}-arginine$ methyl ester hydrochloride (${\text\tiny{L}}-NAME$), an NO synthase (NOS) inhibitor, revealed that NO is involved in the adventitious root growth of mountain ginseng. Supply of an NO donor, SNP, activates NADPH oxidase activity, resulting in increased generation of $O_2{^{{\cdot}-}}$, which subsequently induces growth of adventitious roots. Moreover, treatment with diphenyliodonium chloride (DPI), an NADPH oxidase inhibitor, individually or with SNP, inhibited root growth, NADPH oxidase activity, and $O_2{^{{\cdot}-}}$ anion generation. Supply of the NO donor, SNP, did not induce any notable isoforms of enzymes; it did, however, increase the activity of pre-existing bands of NADPH oxidase, superoxide dismutase, catalase, peroxidase, ascorbate peroxidase, and glutathione reductase. Enhanced activity of antioxidant enzymes induced by SNP supply seems to be responsible for a low level of $H_2O_2$ in the adventitious roots of mountain ginseng. It was therefore concluded that NO-induced generation of $O_2{^{{\cdot}-}}$ by NADPH oxidase seems to have a role in adventitious root growth of mountain ginseng. The possible mechanism of NO involvement in $O_2{^{{\cdot}-}}$ generation through NADPH oxidase and subsequent root growth is discussed.
Objectives: This in vitro study evaluated the effect of dentin biomodifiers on the immediate and long-term bond strengths of a simplified etch and rinse adhesive to dentin. Materials and Methods: Flat coronal dentin surfaces were prepared in 120 extracted human molars. Teeth were randomly divided into 5 groups (n = 24) according to 5 different surface pre-treatments: No pre-treatment (control); 1M carbodiimide (EDC); 0.1% epigallocatechin-3-gallate (EGCG); 2% minocycline (MI); 10% sodium ascorbate (SA). After surface pre-treatment, adhesive (Adper Single Bond 2 [SB], 3M ESPE) was applied. Composite was applied into transparent plastic tubes (2.5 mm in diameter), which was placed over the bonded dentin surface. From each group, 10 samples were subjected to shear bond strength (SBS) evaluation at 24 hours (immediate) and remaining 10 samples were tested after 6 months (delayed). Additionally, 4 samples per group were subjected to scanning electron microscopic analysis for observation of resin-dentin interface. The data were statistically analysed with Shaperio-Wilk W test, 2-way analysis of variance (ANOVA), and post hoc Tukey's test. Results: At 24 hours, SBS of all surface pre-treatment groups were comparable with the control group, with significant differences found between EDC and SA groups only (p = 0.009). After 6 months storage, EDC, EGCG, and MI pre-treatments preserved the resindentin bond strength with no significant fall. Conclusions: Dentin pre-treatment with all the dentin biomodifiers except SA resulted in significant preservation of resin-dentin bond over 6 months storage period, without negatively affecting the immediate bond strength of the etch and rinse adhesive tested.
Objectives: Hydrogen peroxide ($H_2O_2$) surface treatment of fiber posts has been reported to increase bond strength of fiber posts to resin cements. However, residual oxygen radicals might jeopardize the bonding procedure. This study examined the effect of three antioxidant agents on the bond strength of fiber posts to conventional and self-adhesive resin cements. Materials and Methods: Post spaces were prepared in forty human maxillary second premolars. Posts were divided into five groups of 8 each: G1 (control), no pre-treatment; G2, 10% $H_2O_2$ pre-treatment; G3, G4 and G5. After $H_2O_2$ application, Hesperidin (HES), Sodium Ascorbate (SA) or Rosmarinic acid (RA) was applied on each group respectively. In each group four posts were cemented with Duo-Link conventional resin cement and the others with self-adhesive BisCem cement. Push-out test was performed and data were analyzed using 2-way ANOVA and tukey's post-hoc test (${\alpha}=0.05$). Results: There was a statistically significant interaction between the cement type and post surface treatment on push-out bond strength of fiber posts (p < 0.001, F = 16). Also it was shown that different posts' surface treatments significantly affect the push-out bond strength of fiber posts (p = 0.001). $H_2O_2$ treated posts (G2) and control posts (G1) cemented with Duo-link showed the highest ($15.96{\pm}5.07MPa$) and lowest bond strengths ($6.79{\pm}3.94$) respectively. Conclusions: It was concluded that $H_2O_2$ surface treatment might enhance the bond strength of fiber posts cemented with conventional resin cements. The effect of antioxidants as post's surface treatment agents depends on the characteristics of resin cements used for bonding procedure.
녹차 폴리페놀과 비타민 C가 2형 당뇨병에 미치는 영향을 관찰하기 위해 고지방식이와 저용량 스트렙토조토신을 이용하여 당뇨병이 유도된 흰쥐에 polyphenon 60(P60)과 sodium ascorbate(SA)를 16주간 투여한 후 공복 혈당, 혈장 인슐린, 혈청 중성지질, BUN 및 creatinine과 신장 GGT와 AP 활성도를 측정하였다. 당뇨병 흰쥐에 P60이나 SA 투여로 인한 식이섭취량과 체중의 변화는 없었다. 공복 혈당은 당뇨 대조군(DC 군)에서 대조군(NC 군)의 5배로 증가하였으며, 당뇨+녹차 폴리페놀(DM+P60) 군은 14%, 당뇨+녹차 폴리페놀+비타민 C(DM+P60+SA) 군은 28%가 DC 군보다 감소하였고, 당뇨+비타민 C(DM+SA) 군은 DC 군과 유의한 차이가 없었다. 혈장 인슐린 양은 각 실험군 사이에 유의한 차이가 없으며, 인슐린 저항성 지수 HOMA-IR은 DC 군에서 증가하였고 DM+P60+SA 군은 DC 군보다 감소하였다. 혈청 creatinine 양은 DC 군에서 증가하였고 DM+P60 군은 DC 군보다 17% 감소하였으며, DM+P60+SA 군은 DC 군보다 43% 감소하였다. 혈청 BUN 양은 DC 군에서 증가하였고 DM+P60+SA 군은 DC 군보다 41% 감소하였다. 신장 GGT와 AP 활성도는 DC 군에서 감소하였고 DM+P60+SA 군은 DC 군보다 감소가 적었으며, DM+SA 군은 DC 군과 유의한 차이가 없었다. 이상의 실험 결과 2형 당뇨병에서 녹차 폴리페놀과 비타민 C 복합 투여가 혈당, 인슐린 저항성 및 혈청 중성지질량 개선 및 신장 손상 방지효과가 녹차 폴리페놀이나 비타민 C를 단독으로 투여하였을 때보다 더 증가함을 확인할 수 있었다. 녹차 폴리페놀과 비타민 C의 혈당 상승 억제와 신장 손상 방지 효과에 대한 계속된 연구가 필요하며, 녹차 폴리페놀과 비타민 C는 당뇨병 환자에게 혈당을 조절하고 신장 손상을 방지하는 기능성 식품 제재로서 개발 가능성이 있는 것으로 생각한다.
Pseudomonas pseudoalcaligenes KF707에서 정제한 protocatechuate 3,4-dioxygenase의 특징을 조사하기 위하여 pH안정성, 화학적 저해, 화학적 수식과 pH의존성 반응 상수에 대한 실험을 수행하였다. 이 효소는 pH 4.5~10.7에서 안정하였다. L-ascorbate와 glutathione은 Kis가 각각 0.17 mM과 0.86 mM인 경쟁적 저해제였으며, DL-dithiothreitol은 Kis 1.57 mM 및 Kii 8.08 mM의 비경쟁적 저해패턴을 나타내었다. Potassium cyanide, p-hydroxybenzoate 및 sodium azide는 Kis가 각각 55.7 mM, 0.22 mM 및15.64 mM이었으며, Kii는 각각94.1 mM, 8.08 mM, 및 662.64 mM인 비경쟁적 저해패턴을 나타내었다. $FeCl_{2}$는 Kis가 $29{\mu}M$로 가장 우수한 경쟁적 저해제였으며, $FeCl_{3}$, $MnCl_{2}$, $CoCl_{2}$, $HgCl_{2}$, $AlCl_{3}$도 각각 Kis가 1.21 mM, 0.85 mM, 3.98 mM, 0.17 mM 및 0.21 mM인 경쟁적 저해패턴을 보였다. 한편, 다른 금속이온들은 비경쟁적 저해패턴을 나타내었다. pH의존성 반응상수의 실험결과로부터 pK 6.2와 9.4의 촉매부위와 pK 5.5와 9.0의 결합부위가 존재함을 알 수 있었다. Lysine, cysteine, tyrosine, carboxyl과 histidine은 각각의 고유한 화학적 수식제에 의해 수식되었는데, 이는 이들 잔기들이 결합과 촉매에 관여한다는 것을 나타낸다. 위 결과를 토대로 화학적 메커니즘을 제시한다.
사과주(酒)의 효소적(酵素的) 갈변(褐變)에 대한 기초(基礎) 연구(硏究)의 일환으로, 홍옥에서 polyphenol oxidase(EC 1.10.3.1)을 추출(抽出), 조정제(粗精製)하여 그 일반적(一般的) 성질(性質) 및 열처리(熱處理)에 따른 polyphenol oxidase 활성(活性) band의 변화(變化)를 조사(調査)한 결과(結果)는 다음과 같다. 홍옥 polyphenol oxidase의 최적(最適)pH는 6.5, 최적온도(最適溫度)는 $30^{\circ}C$였으며, 주(主) 기질(基質)은 o-diphenol이었다. 열(熱)에 대한 안정성(安定性)은 $60^{\circ}C$와 $70^{\circ}C$에서 1시간(時間) 처리후(處理後)에도 잔재활성(殘存活性)이 각각(各各) 35%, 15% 정도였다. Sodium metabisulfite, cysteine 및 ascorbate 는 0.5 mM에서 거의 완전히 효소활성(酵素活性)을 저해(沮害)하였으나 EDTA는 저해효과(沮害?果)가 아주 약하게 나타났다. 또한 알콜은 polyphenol oxidase의 활성(活性)에 아무린 영향(影響)을 미치지 않았다. 홍옥 polyphenol oxidase의 활성(活性) band는 4개로 관찰(觀察)되었고, $60^{\circ}C$ 및 $70^{\circ}C$에서 1시간(時間) 동안 발효액(醱酵液)을 열처리(熱處理)한 후(後)에는 각각(各各) 2개 및 1개의 활성(活性) band가 관찰(觀祭)되었다. 그러므로 각(各) band는 열(熱)에 대한 안정성(安定性)이 크게 차이(差異)가 있음을 알 수 있었으며, 또한 각(各) band의 열안정성(熱安定性)과 효소(酵素)의 열안정성(熱安定性) 성적과는 거의 일치(一致)되었다.
사과 및 그 가공품의 효소적갈변(酵素的褐變)에 대한 기초적(基礎的) 자료(資料)를 얻고 나아가서 그 방지책(防止策)을 조사(調査)하는 목적으로 국광으로 부터 polyphenol oxidase(EC 1.10.3.1)를 추출(抽出)하여 그 일반적(一般的) 성질(性質)을 검토(檢討)하였다. 국광 polyphenol oxidase의 반응최적(最適) pH는 6.0이었으며 최적(最適) 반응온도(反應溫度)는 $30^{\circ}C$였다. 본효소(本酵素) pH 4.0에서 가장 안정성(安定性)이 높았으며, pH 5.0~9.0에서도 80% 이상(以上)의 활성(活性)을 나타내었다. 열(熱)에 대한 안정성(安定性)은 $40^{\circ}C$ 1시간(時間) 처리(處理)조건에서도 극히 안정(安定)하였으며 $60^{\circ}C$에서 30분(分) 처리(處理)로 효소(酵素) 활성(活性)이 50% 감소(減少)되었다. $Cu^{2+}$, $Fe^{3+}$, $Mg^{2+}$, $Mn^{2+}$의 첨가(添加)로 활성(活性)이 저해(沮害)되었다. 본효소(本酵素)에 대한 가장 효과적(效果的)인 저해제(沮害劑)는 cysteine, sodium, metabisulfite, ascorbate인 것으로 나타났다. 국광 polyphenol oxidase는 o-diphenol인 chlorogenic acid와 catechol을 크게 산화(酸化)시키는 것으로 보아 o-diphenol화합물(化合物)이 주(主) 기질(基質)인 것으로 생각되었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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