Journal of the Korea Institute of Military Science and Technology
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v.9
no.4
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pp.32-38
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2006
In this paper a sequence estimator of CDMA communication system is suggested. A sequence estimator uses Galois Field operation. A sequence estimator can provide another CDMA pilot signal which is un-modulated spreaded signal. A estimated sequence signal and received signal have no correlation. Tow signals can be summed using MRC(maximal ratio combine) method. The stronger signal can be added as a larger ratio, but the weaker signal can be added as a smaller ratio. We can distinguish strong signal using SNR estimator. Therefore it is possible to receive an additional pilot signal, and to support more reliable communications by using sequence estimator.
The overproduction and high level secretion of Glucose Oxidase (GOD) from A. niger in S. cerevisiae was carried out by cloning GOD gene. For this purpose, using two different strong promoters (ADH1 promoter, GAL10 promoter) and signal sequences (${alpha}$-MF signal sequence of S. cerevisiae and ${alpha}$-amylase signal sequence of A. oryzae) and GAL7- and GOD terminator, four expression vectors were constructed. All the expression vectors were transformed in S. cerevisiae 2805 using auxotroph method. By the flask culture, transformants of pGAL expression vector series containing GAL 10 promotor showed much higher GOD productivity than transformants of pADH expression vector series containing ADH1 promoter Transformants of pGALGO2 containing GAL10 promotor and ${alpha}$-amylase signal sequence has shown the best productivity of GOD ($GOD_{total}$: 10.3 unit/mL, $GOD_{ex}$: 8.7 unit/mL) at 115 hr. This value was three fold higher than that of pGALGO1 containing GAL 10 promotor and ${alpha}$-MF signal sequence, even if the same promotor was involved. Through the ${alpha}$-amylase signal sequence of A. oryzae, GOD was secreted much more than the case of ${alpha}$-MF signal sequence from S. cerevisiae. These results suggest that signal sequence may play a important roles in not only the secretion but also the overproduction of foreign protein. Secretion rate of GOD in pGALGO1 and pGALGO2 was 89% and 84%, respectively, Because of the overglycosylation in S. cerevisiae the molecular weight of recombinant GOD in S. cerevisiae was much larger (250 kDa) than that of nature GOD in A. niger (170 kDa).
Journal of the Korean Operations Research and Management Science Society
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v.24
no.2
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pp.69-80
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1999
A genetic algorithm to determine the optimal signal sequence and double cycle pattern is described. The signal sequence and double cycle pattern are used as the input for TRANSYT to find optimal signal timing at each junction in the area traffic networks, In the genetic process, the partially matched crossover and simple crossover operators are used for evolution of signal sequence and double cycle pattern respectively. A special conversion algorithm is devised to convert the signal sequence into the link-stage assignment for TRANSYT. Results from tests using data from an area traffic network in Leicester region R are given.
Cloning of the 5'untranslated region (5' UTR) and Nterminus of the glycoprotein precursor (G2G1) open reading frame of tomato spotted wilt virus has been problematic, possibly because of the toxicity of a signal peptide at the beginning of th G2G1 protein precursor. The toxicity of the signal peptide to bacterial growth and the reason for the expression of the peptide gene in Escherichia coli were investigated by cloning the 5' UTR and the signal peptide sequence separately. Cells transformed with the plasmid containing both the first 30 amino acids of the glycoprotein and the 5' UTR showed a severe growth inhibition whereas transformants harboring either the plasmid with the signal sequence or the 5'UTR alone did not show any ingibition. An E. coli promoter-like sequence was found in the 5'UTR and tis promoter acivity was confirmed with a promoter-less GUS gene cloned downstream of the 5'UTR. In the cloning of the Tomato spotted wilt virus (TSWV) glycoprotein G2G1 open reading frame all the recovered plasmids contained stop codons in the signal sequence region. However, clones containing no stop codon were recovered when the signal sequence and the 5'UTR were cloned separately.
The nucleotide sequence of the genetic control site of Bacillus subtilis gene for $(1-4)-{\beta}-D-glucan$ endoglucanase (cellulase) was determined according to the procedures of the dideoxy chain termination method(Sanger et. al., 1977). The deduced amino acid sequence of this enzyme has a hydrophobic signal peptide at the $NH_2$ terminus similar to those found in fifteen other extracellualr enzymes from Bacillus species. This is followed by a sequence resembling the Bacillus ribosome binding site 14 nucleotide before the first codon of the gene. The presumptive promoter sequence was located 92 base pairs upstream fromthe initiation codon. The homology region in signal sequences was striking when comparing all the signal sequences of sixteen extracellular enzymes from Bacillus species so far compiled.
The nascent from of glycosylphosphatidylinositol (GPI)-anchored proteins possesses both amino and carboxy terminal hydrophobic signal sequences to direct processing in the endoplasmic reticulum (ER). Following cleavage of the amino-terminal signal peptide, the carboxy-terminal peptide is processed. Previously, mouse lymphocyte NDA: agrinine ADP-ribosyltransferase (Yac-1) was cloned and the deduced amino acid sequence of the Yac-1 transferase contained hydrophobic amino and carboxy termini, consistent with known signal sequences of GPI-anchored proteins. This tranferase was present on the surface of NMU (rat mammary adenocarcinoma) cells transfected with the wildtype cDNA and was released with phosphatidylinositol-specific phosphilpase C. Expression of the mutant protein, lacking the carboxy terminal hydrophobic sequence, resulted in the peoduction of soluble, secreted from of the transferase. This result shows that carboxy terminal sequence is important for GPI-attachment.
Flow cytometric techniques were used to investigate cell size, protein content and cell cycle behavior of recombinant Saccharomyces cerevisiae strains producing human lysozyme (HLZ). Two different signal sequences, the native yeast $MF\alpha1$ signal sequence and the rat $\alpha-amylase$ signal sequence, were used for secretion of HLZ. The strain containing the rat $\alpha-amylase$ signal sequence showed a higher level of internal lysozyme and lower specific growth rates. Flow cytometric analysis of the total protein content and cell size showed the strain harboring the native yeast signal sequence had a higher total protein content than the strain containing the rat $\alpha-amylase$ signal sequence. Cell cycle analysis indicated that the two lysozyme producing recombinant strains had an increased number of cells in the $G_2+M$ phase of the yeast cell cycle compared with the host strain SEY2102.
Purpose: Helicobacter pylori has been known to have diverse vacA allelic types. The purpose of the study was to identify vacA diversity in Korea and design new primers for signal sequence alleles indigenous to Korea. Methods: Fifty antral biopsy specimens, which had been proven to be H. pylori-positive, were examined for vacA status; signal sequence and mid-region. After PCR amplification and DNA sequencing, vacA alleles of Korean H. pylori strains were compared with those from other countries. Results: Among Korean H. pylori strains vacA alleles with all combinations of signal sequence and mid-region were found, with the exception of s1b or s2. vacA genotype s1c/m1 was predominant in Korea. We found that GGGAGCGTTR in s1a and GGGGYTATTG in s1c were the indigenous sequences to Korea and constructed the new Korean specific primers for the vacA signal sequence; VASK-F, VASK-R, S1AK-F, and S1CK-F. Conclusion: This study showed that s1c/m1 is the predominant type of vacA allele in Korea. We designed new primers for the vacA signal sequence.
In vitro analyses of type I signal peptidase activities require protein precursors as substrates. Usually, these pre-proteins are expressed in vitro and cleavage of the signal sequence is followed by SDS polyacrylamide gel electrophoresis coupled with autoradiography. Radioactive amino acids have to be incorporated in the expressed protein, since the amount of the in vitro expressed protein is usually very low and processing of the signal peptide cannot be followed by SDS polyacrylamide gel electrophoresis alone. Here we describe a rapid and simple method to express large amounts of a protein precursor in E. coli. We have analyzed the effect of ionophors as well as of azide on the accumulation of expressed protein precursors. Azide blocks the function of SecA and the ionophors dissipate the electrochemical gradient across the cytoplasmic membrane of E. coli. Addition of azide ions resulted in the formation of inclusion bodies, highly enriched with pre-apo-plastocyanine. Plastocyanine is a soluble copper protein, which can be found in the periplasmic space of cyanobacteria as well as in the thylakoid lumen of cyanobacteria and chloroplasts, and the pre-protein contains a cleavable signal sequence at its N-terminus. After purification of cyanobacterial pre-apo-plastocyanine, its signal sequence can be cleaved off by the E. coli signal peptidase, and protein processing was followed on Coomassie stained SDS polyacrylamide gels. We are optimistic that the presented method can be further developed and applied.
In a large signal intersection, it is the most important to set phase sequences and phase intervals of traffic signal in order to improve the efficiency of the capacity as well as safety. These setting allows to select the best sequence of signal phase among several alternatives, and thus to rearrange the starting and ending points of the individual phase using an effective interphase periods (EIP). The EIP is a gap between previous and current traffic movements at a potential collision point in an intersection. Each of traffic movements has an equality for safety and efficiency at the balanced condition of EIP. This paper presents how to set optimally the phase sequences and intervals of traffic signal in an intersection using phase based approach. And in the second part, we applied the theory developed in the first part. In particular, a numerical example of phase base signal setting is presented using a matrix computation method in order to select the best sequence among several alternatives, and thus to rearrange the starting and ending points of the individual phase using the EIP. This method also allows to apply to optimum signal setting even in five-lag or staggered-type intersection.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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