오래 저장해 둔 쇠비를 즙액에서 5종의 항균성 물질이 분리되었으며 이들 물질이 isobutyric acid, butyric acid, isovaleric acid, valeric acid 그리고 caproic acid 등과 C4-C6의 저급지방산으로 동정되었다. 각각의 지방산은 실내실험에서 다소간에 배나무 검은무늬병균(Alternaria alternata Japanese pear pathotype)의 포자발아나 균사신장을 다같이 저해하였다. 포자발아에 대한 각각 지방산의 항균력은 예외없이 균사신장에 대한 그것보다 컸다. 예컨데 200PPM 이하의 농도에서 균사생장을 완전히 저해하는 항균성 지방산은 하나도 없었지만 caproic acid의 50ppm과 valeric acid의 200ppm은 포자발아를 완전히 억제하였다. 또한 생물검정의 결과에서 이들 지방산의 탄소시술의 길이가 길수록 더욱 높은 항균력을 보여주었으므로 탄소사슬의 길이가 항균력과 관계가 있는 것으로 추정되었다.
The effects of dietary ${\beta}$-glucan, obtained from bacterial fermentation, on the intestinal mass, short chain fatty acids, lactate production and pH in Sprague-Dawley (SD) rats were evaluated. SD rats fed with 0% (control group), 1% or 5% ${\beta}$-glucan supplemented diets (w/w) for 3 weeks. The presence of ${\beta}$-glucan in the diets resulted in a significant increase in colonic contents in a dose dependent manner. The amount of short chain fatty acids increased in rats fed ${\beta}$-glucan diets. Rats fed the 5% ${\beta}$-glucan diets had higher levels of acetate, propionate and butyrate by 1.8, 1.7 and 3.0 fold of the control group in the cecum, and 2.2, 2.9 and 3.1 fold of the control group in the colon, respectively. The ${\beta}$-glucan diets also significantly increased the levels of cecal and colonic lactate by 1.4~3.4 fold, when compared to the control diet, indicating that dietary ${\beta}$-glucan stimulated the growth of lactic acid bacteria within the intestine. These results suggest that dietary ${\beta}$-glucan, by providing short chain fatty acids and reducing the cecal and colonic pH, may be beneficial in improving gut health, and provide evidence for the use of ${\beta}$-glucan as a dietary supplement for human consumption.
식용 돼지췌장 리파제를 두 가지 함량으로 치즈제조시 혼합하여 $7^{\circ},\;13^{\circ},\;21^{\circ}C$에서 숙성시켰다. GC 분석결과 효소처리한 치즈에서는 Control에서 보다 훨씬 많은 양의 저급지방산이 생성되었다. 돼지췌장 리파제를 많이 넣어 $21^{\circ}C$에서 숙성시킨 치즈의 경우 1주 후에 medium flavor 치즈, 3주 후에 거의 sharp flavor 치즈가 특별한 결함없이 생산되었다. 또한 이 효소를 조금 넣은 치즈에서는 양호한 질의 치즈가 많았는데, $7^{\circ},\;13^{\circ},\;21^{\circ}C$에서 3주부터 15주의 숙성기간 중 medium과 sharp flavor 치즈가 생산되었다. 통계분석에 의하면 체다풍미와 caproic acid의 함량에서, 또 체다풍미와 butyric acid, caproic acid 혼합함량 상호관계에서 유의성이 있었다. 적합한 조건을 사용한다면 돼지췌장 리파제는 체다치즈의 숙성을 촉진시키는데 사용 가능한 것으로 사료된다.
The lipolytic yeast Candida aaseri SH14 contains three Acyl-CoA oxidases (ACOXs) which are encoded by the CaAOX2, CaAOX4, and CaAOX5 genes and catalyze the first reaction in the β-oxidation of fatty acids. Here, the respective functions of the three CaAOX isozymes were studied by growth analysis of mutant strains constructed by a combination of three CaAOX mutations in minimal medium containing fatty acid as the sole carbon source. Substrate specificity of the CaAOX isozymes was analyzed using recombinant C. aaseri SH14 strains overexpressing the respective genes. CaAOX2 isozyme showed substrate specificity toward short- and medium-chain fatty acids (C6-C12), while CaAOX5 isozyme preferred long-chain fatty acid longer than C12. CaAOX4 isozyme revealed a preference for a broad substrate spectrum from C6-C16. Although the substrate specificity of CaAOX2 and CaAOX5 covers medium- and long-chain fatty acids, these two isozymes were insufficient for complete β-oxidation of long-chain fatty acids, and therefore CaAOX4 was indispensable.
리파제 활성을 측정하는 간편한 방법을 개발하였다. 본 방법에 의하면 효소작용에 의해 생성된 유리지방산과 측정하는 색도와 서로 직선관계를 보였으며. 측정 범위는 long chain지방산인 경우 올레인산으로 환산하여 $0.05-1.5\;{\mu}moles$이었으며 short chain지방산인 경우 카프로인산으로 환산하여 $0.2-2.0\;{\mu}moles$의 범위였다. 본 방법의 장점은 종래의 "Copper Soap" 추출방법에서 상부 용매층 제거에 많은 시간을 소비하는 과정을 클로로포름-핵산-에타놀 혼합용매와 NaCl로 포화시킨 copper reagent를 사용하므로서 손쉽게 해결하였다.
Acyl carrier protein is related with fatty acid biosynthesis in which specific enzymes are involved. Especially, acyl carrier protein (ACP) is the key component in the growing of fatty acid chain. ACP is the small, very acidic protein that covalently binds various intermediates of fatty acyl chain. Acylation of ACP is mediated by holo-acyl carrier protein synthase (ACPS), which transfers the 4'PP-moiety of CoA to the 36th residue Ser of apo ACP. Acyl carrier protein P (ACPP) is one of ACPs from Helicobacter plyori. The NMR structure of ACPP consists of four helices, which were reported previously. Here we show how acylation of ACPP can affect the overall structure of ACPP and figured out the contact surface of ACPP to acyl chain attached during expression of ACPP in E. coli. Based on the chemical shift perturbation data, the acylation of ACCP seems to affect the conformation of the long loop connecting helix I and helix II as well as the second short loop connecting helix II and helix III. The significant chemical shift change of Ile 54 upon acylation supports the contact of acyl chain and the second loop.
쇠비름 즙액에서 얻은 5종의 저급지방산인 isobutyric(C-4), butyric(C-4), isovaleric(C-5), valeric (C-5), caproic(C-6) acids등이 그들 사이에 항균력의 차이는 있었지만 공시한 25종의 식물병원균의 포자발아나 균사생장에 대하여 폭넓은 항균스펙트럼을 보여주었다. 각각의 지방산의 항균력은 포자발아검정이나 균사신장검정에 있어서 공시균주에 따라 큰 차이를 보여주었다. 포자발아검정에 공시한 17종의 병원균과 균사신장검정에 공시한 16종의 병원균은 그들의 포자발아나 균사신장을 제각기 완전히 저해하는 각각의 지방산의 최저저해농도(MIC)에 따라 3군으로 나눌 수 있다. 이밖에도 이 연구의 결과에서 다음과 같은 가설을 제시할 수 있었다. 1) Caproic acid는 공시균의 균사신장보다 포자발아에 대하여 더욱 강한 독성을 보였으나 약간의 예외는 있었지만 그 밖의 지방산은 이와같은 독성을 보여주지 않았다. 2) 지방산의 사슬이 길수록 항균력도 강하다. 3) n-Butyric acid와 n-Valeric acid는 그들의 이성체보다 항균력이 강하다. 4) 각각의 지방산은 부생균의 포자발아나 균사신장에 대한 것보다 활물기생균이나 몇가지 조건적 기생균의 그것들에 대하여 더욱 강한 독성을 보여주었다.
Acyl-CoA oxidases (ACOXs) play important roles in lipid metabolism, including peroxisomal fatty acid ${\beta}$-oxidation by the conversion of acyl-CoAs to 2-trans-enoyl-CoAs. The yeast Yarrowia lipolytica can utilize fatty acids as a carbon source and thus has extensive biotechnological applications. The crystal structure of ACOX3 from Y. lipolytica (YlACOX3) was determined at a resolution of $2.5{\AA}$. It contained two molecules per asymmetric unit, and the monomeric structure was folded into four domains; $N{\alpha}$, $N{\beta}$, $C{\alpha}1$, and $C{\alpha}2$ domains. The cofactor flavin adenine dinucleotide was bound in the dimer interface. The substrate-binding pocket was located near the cofactor, and formed at the interface between the $N{\alpha}$, $N{\beta}$, and $C{\alpha}1$ domains. Comparisons with other ACOX structures provided structural insights into how YlACOX has a substrate preference for short-chain acyl-CoA. In addition, the structure of YlACOX3 was compared with those of medium- and long-chain ACOXs, and the structural basis for their differences in substrate specificity was discussed.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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