• 한국응용과학기술학회지
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• 제33권3호
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• pp.599-605
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• 2016

Serratia marcescens (S. marcescens)는 Gram-음성 박테리아로 soytone과 에탄올이 함유된 Cang's soytone (CS) 배지에서 $28^{\circ}C$, pH 7.5의 조건으로 배양할 때 가장 많은 붉은 색소를 생성하였다. S. marcescens 균주로부터 붉은 색소를 분리, 정제하기 위하여 여러 가지 유기용매를 사용하였다. 분리 정제한 붉은 색소는 가시광선 영역의 537 nm에서 ${\lambda}_{max}$를 가지고 있었고, HPLC-Mass로 분석한 결과 분자량 537과 565 g을 가지는 두 가지 물질로 구성되어 있음을 확인하였다. 또한 상온과 pH 6 이하의 산성조건에서는 태양광에도 안정함을 확인하였다.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제28권5호
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• pp.251-257
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• 2000

Serratia marcescens purine nucleoside phosphorylase (PNP) was purfied to homogeneity by streptomycin sulfate treatment, Sephacry HR S-200 gel filtration chromatography and AMP-agarose affinity chromatography. The specific activity of the enzyme was increased 49-fold during purification with an overall yield of 7.0%. The molecular weight was 168kD as estimated by Sephadex G-150 gel filtration chromatography. The S. marcescens enzyme was composed of six identical subunits with subunit molecular weight of 28kD, as estimated by SDS-PAGE. The Km values of S. marcescens enzyme for inosine and deoxyinsoine were 0.38 and 1.20 mM, respectively. The ph optimum was near 8.0, and the enzyme was relatively heat-stable protein. The enzyme was inactivated com-pletely by 0.5 mM of $Cu^{ 2+}$.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제28권1호
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• pp.21-25
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• 2000

We have got several clones from Serratia marcescens which stimulated the cells to use maltose as a carbon source in Escherichia. coli TP2139 ( lac, crp). One of the cloned genes, pCKB17, was further analyzed. In order to find whether the increased expression of the gent was under the direction of maltose metabolism, we constructed several recombinant subclones. We have found that the clone, pCKB17AV, codes maltose metabolism stimulation(mms) gene. E. coli transformed with the cloned gene showed increase in the activity of maltose utilzation, The recombinant proteins expressed by multicopy and induction with IPTG, one polypeptide of 29-kDa, was confirmed by SDS-PAGE. The overexpression of maltose-binding proter protein in the presence of mms gene was confirmed by Western blot analysis. Southern hybridization analysis confirmed that the cloned DNA fragment was originated from S. marcescens chromosomal DNA.

• 산업기술연구
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• 제30권B호
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• pp.61-68
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• 2010

Three chitinase genes (chiA, chiB, and chiC) were cloned into E. coli by PCR amplification from Serratia marcescens KFRI314. The sizes of cloned chitinase genes were 1692 bp, 1500 bp, and 1443 bp which correspond to 563, 499, and 480 amino acids, respectively. Recombinant chitinases were overexpressed using pHCEIA expression vector and purified to homogenity. The molecular weights of chitinases were about 60kDa, 50 kDa, 52 kDa, respectively. Optimum pHs were around pH 5~6 and optimum temperatures were $45{\sim}50^{\circ}C$ while 90% of enzyme activities were stable up to $50^{\circ}C$. The specific activities of ChiA, ChiB, and ChiC were 233.1, 278.8, $111.3{\mu}mol\;(min)^{-1}\;mg^{-1}$ against colloidal chitin. From experiments using TLC and fluorescent substrate analogues, it was demonstrated that ChiA was endo-chitinase while ChiB and ChiC were chitobiosidase.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제20권2호
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• pp.129-135
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• 1992

본 연구에서는 Serratia marcescens ATCC 27117 균주로부터 키나아제 유전자를 대장균으로 클로닝 하고 발현시켰다. pUC 19 플라스미드를 이용하여 S.marcescens의 genomic library를 만들고 팽화된 키틴이 포함된 한천배지에서 키티나아제 활성을 가지는 클론을 선별하였다. 약 1x10 transformant들 중에서 키티나아제 활성을 보이는 하나의 클론을 선발하였으며 이것은 pUC 19 플라스미드속에 8.9Kb 염색체 DNA 삽입단편을 가지고 있었다.

• 생명과학회지
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• 제23권9호
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• pp.1133-1139
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• 2013

돼지 원정액의 채취나 희석정액의 제조과정 중 세균오염이 많이 발생하는데, 이는 정자활력의 감소뿐 아니라 모돈의 수태율 저하 등을 유발한다. 특히 Serratia marcescens는 환경에 널리 존재하며 비위생적으로 제조된 정액에 많이 분리되고 있다. 본 연구에서는 S. marcescens의 신속한 동정을 위하여 PCR 기법을 개발하였으며, 국내 돼지정액 유래 S. marcescens을 이용하여 최소생육억제농도(MIC) 등을 조사하고 유효 항생제를 선발하고자 하였다. 개발 PCR 기법은 S. marcescens에서만 306 bp의 특이 유전자 증폭산물을 형성하였으며, 기타 돼지정액에서 분리 보고된 균주나 Serratia 속균에서는 유전자 증폭 산물이 형성되지 않아 특이성이 인정되었다. PCR 기법의 민감도는 S. marcescens에서 추출된 DNA $50pg/{\mu}l$까지 검출이 가능하였다. 디스크확산법에 의한 국내 돼지정액 유래 S. marcescens의 항생제 감수성을 조사한 결과, gentamicin, ceftiofur, neomycin 등에서 80% 이상의 높은 감수성을 보였다. 한편 ceftiofur, enrofloxacin, gentamicin, neomycin의 $MIC_{90}$는 각각 8, 8, 8, $16{\mu}g/ml$로 나타났다. 따라서 개발된 PCR 기법은 S. marcescens를 동정하는 유용한 방법이며, gentamicin 등 선발된 항생제는 S. marcescens에 의한 정액 내 세균오염을 관리하기 위한 희석제용 항생제로 추천된다.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제19권5호
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• pp.450-455
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• 1991

Serratia marcescens ATCC 21074로부터 돌연변이 유도에 의해 protease 생산능이 높은 ampicillin 耐性의 변이주 Serratia sp. SMNT-1을 분리하였다. 이 균주는 原 균주에 비하여 約 11배 정도 높은 protease 생산성을 나타내었다. 이 효소는 pH 9.0, $40^{\circ}C$에서 최대 활성을 나타내었으며, 저온하에서는 pH 6.0-10.0 범위에서 안정하였으나, $37^{\circ}C$, 알카리 조건하에서 불안정하였다. 이 효소는 $60^{\circ}C$에서 10분간 열처리시 실활되었다.

• 한국식품영양학회지
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• 제23권2호
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• pp.171-177
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• 2010

Serratia marcescens catabolic threonine dehydratase는 streptomycin sulfate treatment, Sephadex G-200 gel filtration, AMP-Sepharose 4B affinity chromatography 등의 방법으로 정제하였는데, 최종 단계에서 회수율은 15.5%이었으며 50배 정제되었다. Native 분자량은 native pore gradient polyacrylamide gel electrophoresis(PAGE) 방법으로는 120,000이었다. SDS-PAGE에 의한 subunit의 분자량은 30,000이었고, 즉 S. marcescens 효소는 4개의 동일한 subunit으로 구성된 homo-tetrameric protein임이 판명되었다. S. marcescens 효소의 L-threonine에 대한 Km값은 AMP가 있는 조건에서 7.3 mM, AMP가 없는 조건에서 92 mM이었다. S. marcescens 효소는 효소 1 mole 당 각각 2 mole의 pyridoxal 5'-phosphate(PLP), 16개의 free-SH group을 가지고 있었다. S. marcescens 효소는 AMP의 존재 하에서 $\alpha$-ketobutyrate, pyruvate, glyoxylate, phosphoenol pyruvate(PEP)에 의해 효소 활성이 억제되었으며, cAMP와 ADP에 의해서는 효소 활성이 증가되었다. 효소학적 성질면에서 S. marcescens 효소는 E. coli 효소보다는 S. typhimurium 효소와 유사하였다. 한편, E. coli 효소는 cAMP에 의하여 효소 활성이 증가되고, S. typhimurium 효소는 ADP에 의해 효소 활성이 증가되는 것과 다르게, S. marcescens 효소는 cAMP와 ADP 모두 효소 활성이 증가되었다. 따라서 이상의 연구 결과들은 세 enteric bacteria의 catabolic threonine dehydratase가 서로 작은 차이점이 있다는 것을 반영하며, 이러한 사실을 규명하기 위해서는 향후 보다 심층적인 연구를 수행하여야 할 것으로 사료된다.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제20권1호
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• pp.25-33
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• 1992

Serratia marcescens ATCC 25419를 질소원이 풍부한 BHI 배지에서 황산 암모늄 분별 침전을 시킨 후 DAEA-Sephacel chromatography, Phenyl-Sepharose hydrophobic chromatography, Sephacryl S-400 gel filtration, native gel elution을 거쳐 ALS isozyme Rf 0.83을 분리하였다. 분리한 ALS isozyme Rf 0.83의 native 형태는 gel filtration을 이용하여 분자량을 측정한 결과, 531,400이었고, SDS-PAGE를 수행한 결과 55,000의 large subunit와 38,900의 small subunit로 구성된 multimer임을 알 수 있었다.

• 한국식품영양학회지
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• 제12권1호
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• pp.43-49
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• 1999

The effects of purine catabolites in growth media on the Serratia marcescens purine nucleoside phos-phorylase activity were examined. The enzyme activity was decreased above 60% by guanosine(5 to 15mM). The enzyme activity was not affected at low concentration of inosine (0.1∼1mM). The en-zyme activity was decreased approximately by 40∼50% in the presence of high concentrations of aden-osine hypoxanthine and xanthine (5∼15mM) but was not affected at low concentration of adenosine hypoxanthine and xanthine (0.1∼0.5mM). However the enzyme activity was increase by 20% with low concentrations of uric acid(0.5mN). but was decreased by 80% with high concentrations of same purine catabolite (15mM). Also the enxzyme activity was increased by 20% with low concentrations of glyoxylate (0.5mM) final degradative product of uric acid but was decreased by 30∼50% with high con-centrations of glyoxylate (3∼15mM). The enzyme activity was decreased approximately by 20% by the simultaneous addition of inosine hypoxanthine and uricacid at 5mM each whereas it was increased by 22 and 33% by the combination of inosine and uric acid three purine catabolites at 0.5mM respectively These data suggest that S. marcescens purine nucleoside phosphorylase is positively regulated by a glyox-ylate concentration and then may play a regulatory role in a purine catabolism.