Scutellaria baicalensis $G_{EORGI}$ (Scutellariae Radix) has been used to clear heat and to dry dampness in the stomach or intestines, which manifests as diarrhea or dysenteric disorder. In this study, we investigated the effective preparation of active components in Scutellariae Radix using the methods of solvent extraction and absorption fractionation for the development of new functional food or pharmaceuticals. The marker substances, baicalin, baicalein, wogonoside, and wogonin were directly isolated from the Scutellariae Radix. There chemical structures were elucidated by spectroscopic analysis. The Scutellariae Radix was extracted with hot water. To enhance yield of flavonoids in Scutellariae Radix, the hot water extract was dissolved in ethanol with concentration dependent manner. The precipitates were separated using centrifugal techniques at 10,000 rpm. Supernatant liquid was applied to the HPLC for quantification of major compounds. Separately, the hot water extract was absorbed on Diaion HP-20 resin. And then, the absorbed fraction was eluted with methanol for HPLC. The contents of baicalin, baicalein, wogonoside and wogonin in different treatment methods were analyzed by HPLC. Total amount of four major components were 16.9% in 50% ethanol extract, 21.7% in 70% ethanol extract, 20.5% in 90% ethanol extract, and 39.3% in absorbed fraction of Diaion HP-20 resin. In these results, we found that resin absorption method is suitable for the extraction of enriched flavonoids from Scutellariae Radix.
황금(Scutellariae baicalensis)은 항염 작용이 뛰어나 예로부터 사용되어온 약재로, 본 연구는 인삼에서 분리한 유산균 Leuconostoc mesenteroides (L. mesenteroides)을 이용해 황금 발효물을 제조하고 항산화와 미백 효과를 조사하였다. 황금 발효물은 황금을 70% 에탄올로 추출한 후에 L. mesenteroides를 접종하여 발효제조하였다. 발효 전 황금과 황금 발효물에서 2가지 지표 성분 baicalin과 baicalein을 high-performance liquid chromatography (HPLC)을 이용하여 retention times ($t_R$)과 UV spectra를 확인함으로써 정성 및 정량 분석하였다. 세포 생존율 실험 결과, 발효 전후 황금 모두 독성이 확인되지 않았고 DPPH 라디칼 소거능 실험은 발효물의 $SC_{50}$ 값이 $34.43{\mu}g/mL$ 로 발효 전보다 우수한 효능을 나타내었으며, 세포 독성을 나타내지 않는 농도에서 흑색종 세포인 B16F10을 이용한 melanin 생성 억제 활성 실험 결과, 황금 발효물은 우수한 melanin 생성 억제 효과를 나타내었다($IC_{50}=68.17{\mu}g/mL$). 이상의 결과들로부터 황금 발효물이 항산화 효능뿐만 아니라 미백 효능을 갖는 화장품 원료로서 개발 가능성이 있음이 시사되었다.
Objectives : It has been reported previously that the roots of Scutellaria baicalensis (known as Huang-Gum in Korean, henceforth referred to as S. baicalensis) could prevent neuronal cell death after global cerebral ischemia. In Genuine Korean medicine, S. baicalensis is known to relieve fever in upper body, and it was thus thought to be able to alleviate deteriorations in brain function. Methods : The protective effects of S. baicalensis against post-stroke memory retardation using 4-vessel occlusion model were examined in the present study. Results : S. baicalensis was shown to significantly alleviate the deficits in learning and memory by increasing the fraction of time spent in the quadrant in which the platform was initially placed ($34.9\;{\pm}\;3.2%$, p < 0.05) compared to that of the ischemia group ($28.0\;{\pm}\;2.5%$). The cytoprotective effect of S. baicalensis on CA1 hippocampal neurons was evaluated by measuring the neuronal cell density. Neuronal cell density in S. baicalensis extracts-treated ischemia group ($138.0\;{\pm}\;13.6\;cells/mm^2$) was significantly increased compared to saline-treated ischemia group ($22.1 \;{\pm}\;9.3\;cells/mm^2$, p < 0.05). In the study of OX-42 immunohistochemistry, S. baicalensis could decrease the micrgial activation in hippocampus after brain ischemia. Conclusion : These results may provide experimental support for the use of S. baicalensis in treating post-stroke memory impairment.
Scutellaria baicalensis Georgi (Scutellariae Radix)는 이뇨제, 고지혈증, 항박테리아, 항알레르기, 항염증제 및 항암제와 같은 건강보조식 및 전통 생약으로도 널리 사용되어 왔다. 본 연구에서 복잡한 S. baicalensis 추출물에서 지표 물질 또는 유효화합물들을 분리하는 것은 신원 확인 및 생리활성 평가를 위한 필수적인 단계다. 8개의 성분들로 구성된 타겟 분획물을 두개의 gradient elution를 사용하여 고성능 액체 크로마토 그래피에서 분석하였다. 중압 액체크로마토그래피 및 개방형칼럼으로 분취를 시뮬레이션함으로 예비실험에서 충분히 분리가 되도록 용리 조건을 결정할 수 있었다. 최적 분취방법으로 확보된 표준유효분획물로부터 8개의 지표성분들이 포함된 것을 확인하였다. 또한, 분획물은 UPLC-QTof-MS 비교 분석으로 MS, UV, HRESIMS 결과를 확인할 수 있었다. 따라서, 스케일 업 실험법은 S. baicalensis 추출물에 성공적으로 적용될 수 있었다.
Scutellaria baicalensis Georgi (Labiatae) has been extensively used in treatment of diarrhea, conjunctivitis, gastritis, enteritis and skin disease. As instructed in old description, the Scutellariae Radix should sometimes be processed before use. To 노디 light on the changes of chemical compositions by processing as well as processing method-activity relationships, Scutellariae Radix was heated at 16$0^{\circ}C$-20$0^{\circ}C$ for 30 min. in furnace or soaked with 20% EtOH (SPE) and boy's urine(SPU), respectively, which are one of processing methods and then heated at 17$0^{\circ}C$ for 30 min. To isolate the chemical components, Scutellariae Radix with/without processing were extracted with EtOH and EtOH extract was fractionated with ether, ethyl acetate and butanol to give respective fractions. Ether and EtOAc fractions obtained from the processed drug with urine (SPU) were subjected to chromatography to obtainsix components, oroxylin A, Wogonin, chrysin, baicalein, baicalein 7-O-$\beta$-D-glucopyranoside and $\beta$-sitosterol 3-O-$\beta$-D-glucopyranoside. All the isolated compounds were identified by means of physicochemical and spectroscopic methods (IR, $^1H-NMR,{\;}^13C-NMR$, Mass). By HPLC determination, the changes of the contents for each isolated components from SPE and SPU samples were observed. It was found that the content of nonglycosidic flavones such as oroxylin A, wogonin, chrysin and baicalein was increased markedly, whereas the content of baicalin and baicalein 7-O-$\beta$-D-glucopyranoside was significantly decreased in both samples as compared with those of Scutellariae Radix. When the sample was soaked with boy's urine, the total amount of nonglycosidic flavones was higher than that of processing with 20% EtOH.
황금에 대한 수 추출물의 열 변환에 의한 생리활성 변화를 보기 위하여 HPLC를 통한 peak분석과 기능성 평가를 하였다. 열처리 전의 시료 (CW)와 열처리 후의 시료 (CHW)간의 peak분석에서 CW와 CHW의 비교 시 A와 B가 없어지고 열처리 후에 C라는 다른 물질의 peak가 형성됨을 알 수 있었다. 또한, 전체적인 기능성 평가에서 항산화성에서는 CW와 CHW 별 차이가 없었고, 항고혈압 활성은 CW가 높았다. 항암성에 있어서 폐암에서는 CW가 높았고, 위암, 간암, 후두암 등에는 CHW가 높게 나왔다. 그리고, 멜라닌 생성세포의 멜라닌 생성 억제는 CHW에서 약 80%로 매우 높게 나타났다. 결론적으로 열처리를 통한 시료 내 구성성분의 변환이 기능성 차이를 보여주며, 이는 새로운 열 변환 물질의 생성 때문으로 판단된다. 이들 변화된 물질은 황금의 주성분인 Baicalin 외의 물질이 열 변환 된 것으로, 생성된 물질에 대한 구조분석이 필요한 것으로 사료된다.
Scutellariae baicalensis GEORGt Acorus gramineus SOLAND and Gastrodia elata BLUME are traditional medicines used in the treatment of incipient stoke. In this study we investigated their effects on various aspects of neuronal differentiation in single or composite forms. Water-extracts of these medicines showed neuroprotective effects on cultured rat cortical neurons in normoxia and hypoxia. To understand the mechanism for neuroprotection we carried out various cell biological assays. They stimulated initial differentiation of neuronal development (transition from stage 1 to 2), and increased the number of spines and the length and number of dendritic processes. These effects were best manifested in the experimental group, which were given a mixture of the three kinds of extracts (p<0.01). To assess improvement of brain functions we carried out Morris water-maze tests for the mice that were fed on these extracts instead of water for 4 weeks. The experimental groups, especially those which were given the mixture of the three kinds of extract, showed significant (p<0.01) enhancement in memory as early as one day after the learning trial. These results indicate that these three kinds of extracts have synergistic effects on neuronal protection and improvement of brain functions.
국내산 재배 생약류의 용매추출물의 항산화력 비교를 위해 28가지 생약류를 methylene chloride로 각각 추출한 후 linoleic acid에 1,000 ppm 첨가하여 항산화력을 비교하였다. 28종의 생약 methylene chloride 추출물들은 대조구에 비해 다소 차이는 있으나 모두 항산화력을 나타내었다. 황금추출물은 BHA와 비슷한 수준의 항산화력을 보였으며, 목단과 맥문동은 황금보다는 효과가 떨어졌으나 비교적 높은 항산화 효과를 나타내었다. Methylene chloride 추출물의 항산화 효과는 황금이 가장 뛰어난 것으로 나타났으므로 극성이 서로 다른 9가지용매로 추출하였을 때 전반적으로 극성이 높아질수록 수율이 높아졌다. 국내산 생약류의 생리활성을 알아보기 위하여 열수추출물의 아질산염 소거작용, 전자공여 작용 그리고 항보체 활성을 조사하였다.
Objectives : In order to distinguish morphological characteristics, because the inside portion of the root bark of Scutellariae Radix decomposes as time goes by, 2nd, 3rd, and 5th year Scutellariae Radix were sampled and compared according to their external, internal, and flour states through optical microscope. Methods : The slice of the tested material made by paraffin section technique was colored with Safranine Malachite Green contrast methods, and the flour of it was mounted by the liquid made by the same ratio of each of glycerin, acetic acid, and water, and then observed and photographed by olymphus-BHT. Results : 1. The inside of 2nd year Scutellariae Radix was rich and golden, the transverse section of Scutellariae Radix that was 3rd years of age was golden, but there were many Scutellariae Radix whose center portion turned redish brown, and the center portion of 5th year Scutellariae Radix had been decomposed or empty. 2. 2nd year Scutellariae Radix had the most starch grain, 5th year Scutellariae Radix had the least, and the middle portion of xylem that was 5 years of age had a cell ring that was corkish, but 2nd and 3rd year Scutellariae Radix did not have it. 3. In the flour state, 2nd, 3rd, and 5th year Scutellariae Radix did not have any difference, but the amount of starch grain was the most in 2nd year Scutellariae Radix and the least in 5th year Scutellariae Radix.
Scutellariae Radix has been used as a traditional medicine for anti-oxidant, anti-inflammatory, anti-allergic function. But most study methods were restricted to in vitro and in vivo. Therefore to perform for clinical trials further for a new natural drug development is necessary and this study will be used as a basis for it. The studies selected from domestic academic database included the following key words; '황금', '黃芩', 'skullcap', 'Scutellariae Radix', 'scutellaria baicalensis' and considered were those published from 1990 to July, 2011. All 1080 studies were found to include the keywords related to the study subjects either in their title of contents or abstracts. and 298 studies were finally selected as subjects for this study. 243 studies among 293 studies were published between 2000 to 2011. Classification was proceeded according to study subjects as followed; anti-Inflammatory effect and antiallergic and antihistamin effect(66), antibacterial and antivirus effect(61), antioxidant effect(51), neuronal cell apoptosis and neuronal cell protective effect(22), liver cell protective effect(20). According to method type of study, 194 studies practicing in vitro, 60 studies practicing in vivo, 37 studies practicing in both. and 5 studies on documentary records. Most study methods were restricted in vitro and in vivo. For developmenting of function of anti-inflammatory effect and antiallergic, antihistamin effect & atopic dermatitis effect, antibacterial and antivirus effect, antioxidant effect, case report on various fields and multicenter clinical trials is necessary.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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