경기도 가평과 강원도 영월에서 포도나무 가지가 수침상으로 물러지고 시들어 죽는 증상을 관할하고 병원균을 분리였다. 병원균의 균총은 PDA 배지에서 처음에는 무색이었으나 배양기간이 길어짐에 따라서 흰색을 거쳐 연한 초콜릿색을 나타내었다. 균핵형성 적온은 $20^{\circ}C$이었으며, 균핵을 멸균한 모래의 1~2 cm 깊이에 매몰하고 $20^{\circ}C$ 항온기에서 90일간 배양하여 자낭반 형성을 유도하였다. 자낭반은 자루가 가늘고 긴 컵 모양의 황갈색이었고 원통형의 수많은 자낭이 존재하였으며 자낭 안에서는 무색, 타원형이며 단세포로 된 8개의 자낭포자를 관찰할 수 있었다. 자낭포자의 크기는 $8.2{\sim}24.4{\times}3.6{\sim}7.2{\mu}m$ 정도였다. 병원성을 확인한 결과, 캠벨얼리와 거봉 품종 모두에서 병원성을 확인할 수 있었으며 상대적으로 캠벨얼리 품종이 감수성을 나타내었다. 이상과 같이 포도나무에 발생한 병징, 병원균의 균학적 특징 및 병원성 검정 결과, 병원균을 Sclerotinia sclerotiorum (Lib.) de Bary으로 동정하였으며, 이 병을 포도나무 균핵병으로 명명할 것을 제안한다.
Dong Jae Lee;Jin A Lee;Dae-Han Chae;Hwi-Seo Jang;Young-Joon Choi;Dalsoo Kim
Mycobiology
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제50권5호
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pp.382-388
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2022
White mold (or Sclerotinia stem rot), caused by Sclerotinia species, is a major air, soil, or seed-transmitted disease affecting numerous crops and wild plants. Microscopic or culture-based methods currently available for their detection and identification are time-consuming, laborious, and often erroneous. Therefore, we developed a multiplex quantitative PCR (qPCR) assay for the discrimination, detection, and quantification of DNA collected from each of the three economically relevant Sclerotinia species, namely, S. sclerotiorum, S. minor, and S. nivalis. TaqMan primer/probe combinations specific for each Sclerotinia species were designed based on the gene sequences encoding aspartyl protease. High specificity and sensitivity of each probe were confirmed for sclerotium and soil samples, as well as pure cultures, using simplex and multiplex qPCRs. This multiplex assay could be helpful in detecting and quantifying specific species of Sclerotinia, and therefore, may be valuable for disease diagnosis, forecasting, and management.
A fungal isolate collected from infected paprika (Capsicum annuum var. grossum) was characterized as Sclerotinia sclerotiorum based on its ability of sclerotium formation, physiological and molecular properties. When the isolate was grown on potato dextrose agar, oatmeal agar, and malt extract agar, it grew most well on PDA. Optimal temperature and pH for its growth were $25^{\circ}C$ and pH 7, respectively. The fungal isolate produced sclerotia on PDA within 10 days, and the color and shape of the sclerotia were similar to those of S. sclerotiorum. The ITS rDNA regions including ITS1 and ITS2 and 5.8S sequences were amplified using ITS1F and ITS4 primers from the genomic DNAs of the paprika isolate and other known pathogenic S. sclerotiorum isolated from different crops in Korea, and their nucleotide sequences were determined. Sequence comparison analysis showed the ITS rDNA of the paprika isolate shares 100% sequence identity with those of S. sclerotiorum isolated from red pepper, lettuce and a S. sclerotiorum isolate registered in GenBank DNA database. Neighbor joining analysis based on the ITS rDNA sequence revealed the paprika isolate has very close phylogenetic relationships with known Sclerotinia sclerotiorum isolates. This is the first report that S. sclerotiorum has been found associated with paprika rot in paprika growing countries.
This studies were investigated the occurrence of Sclerotinia rot by Sclerotinia Sclerotiorum at the lettuce field in Uiryeong-Gun, Gyeongsangnam-Do and were isolated the most effective microorganism for the biological control to the pathogen, S. sclerotiorum YR-1 strain from diseased soil and lettuce leaves. For the pathogenicity test, the most suitable inoculmn density of YR-1 strain was selected as the mycelial suspension of 40m1 showing disease incidence of 80%, and the symptom showed as same as at the fields, the leaves and stem had rotten and developed white downy mycelial at the diseased lesion on the leaves and stems, and produced black and irregular sclerotinia. On the PDA dual test, about 300 isolates were examined the antifungal activity to the pathogen, YR-1 strain, and among them, A-2, A-7, and RH-4 strain were selected most effective antagonistic bacteria. At pots test, the control value of A-7 strain showed the highest value as 85% which was more effective than that of others in a growth chamber. For the promotion of control effect, the selected 3 isolates were spayed on the lettuce leaves as a sole and/or mixed treatments in a growth chamber, the mixed treatment of A-7 and RH-4 strain showing the control value of 90% was most effective than that of sole treatment with A-7 or RH-4 strain showing the control value of 80%, respectively and mixed treatment with A-2 and A-7 strain and A-2, A-7 and RH-4 strain. In addition, 3 bacteria re-isolated from diseased soils, and all of the selected 6 isolates investigated the control effect at pots in a growth chamber, According to the results, A-7 and Pro-EB 15 strain showed the control value of 91.0% and 90.1% respectively, and they were selected most effectual antagonistic bacteria to control lettuce sclerotinia rot and identified as the Bacillus mojanuinensis by 16s RNA analysis. This is the first report on the biological control using by B. mojanvinensis to the lettuce Sclerotinia rot.
Jeum Kyu Hong;Young Hee Lee;Yeon Sook Jo;Su Min Kim;Seoung Bin Lee;Juyeoung Um;Kyoung-Ok Choi;Mee Kyung Sang;Chung-Ryul Jung;Chang-Jin Park;Sung Hwan Choi
식물병연구
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제30권2호
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pp.114-123
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2024
In July 2022, stem rot symptom was found in a peony plant grown in a pot under a greenhouse at Jinju, Gyeongnam Province, South Korea. Two fungal species were isolated from the infected peony stems and cultured on 1/2-strength potato dextrose agar for identification. The morphological characteristics of the fungal isolates were examined, and nucleotide sequences of the internal transcribed spacer region, β-tubulin and translation elongation factor 1-α were analysed. The pathogenicity of the two isolates was confirmed in detached peony leaves, according to Koch's postulates. To our knowledge, this is the report of Neopestalotiopsis clavispora and Sclerotinia sclerotiorum as the causal agents of peony stem rots. Antifungal activity of chemical fungicide propineb and rhizobacterium Bacillus siamensis H30-3 was shown against the two plant pathogenic fungi N. clavispora and S. sclerotiorum.Unidentified diffusible and volatile compounds from B. siamensis H30-3 could suppress in vitro mycelial growths of N. clavispora JJ 8-2-1 and S. sclerotiorum JJ 8-2-2.
Sclerotinia sp. (isolate BWC98-105) causes stem blight and root rot in Leghum sp., and is presently being evaluated as a potential mycoherbicide for the control of Trifoliorium repens. Bioassays have shown that Sclerotinia sp. produces phytotoxic substance which is biologically active against T. repens. Two biologically active compounds, designated as compoundsI and II, were produced in vitro from the culture filtrate of BWC98-105 isolate Sclerotium sp. Compounds I and II were purified by means of liquid-liquid extraction and $C_{18}$ open column chromatography (300 ${\times}$ 30 mm, i.d). To determine the purity, the purified compounds were analyzed by RP-HPLC. The analytical RP-HPLC column was a TOSOH ODS-120T (150 ${\times}$ 4.6 mm i.d, Japan), of which the flow rate was set at 0.7 mL/min using the linear gradient solvent system initiated with 15 % methanol to 85 % methanol for 50 min with monitoring at 254 nm. Under these RP-HPLC conditions, compounds I and II eluted at 3.49 and 4.13 min, respectively. Compound II was found to be most potent and host specific. However, compound I had a unique antibiotic activity against phytopathogenic bacteria like bacterial leaf blight (Xanthomonas oryzae) on rice, where it played a less important role in producing toxicity on T. repens. No toxin activity was detected in the water fraction after partitioning with several organic solvents. However, toxin activity was detected in the ethyl acetate and butanol fractions. In the leaf bioassay using compound II, the disease first appeared within 4-5 h as water soaked rot, which subsequently developed into well-defined blight affecting the whole plant.
Ojaghian, Mohammad Reza;Jiang, Heng;Xie, Guan-Lin;Cui, Zhou-Qi;Zhang, Jingze;Li, Bin
The Plant Pathology Journal
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제28권2호
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pp.185-190
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2012
Sclerotinia sclerotiorum is a serious pathogen which causes yield loss in many dicotyledonous crops including potato. The objective of this study was to assess the potential of biofumigation using three Brassica crops including Brassica napus, B. juncea and B. campestris against potato stem rot caused by S. sclerotiorum by in vitro tests. Both macerated and irradiated dried tissues were able to reduce radial growth and sclerotia formation of five pathogen isolates on PDA, but macerated live tissues were more effective. Compared with other tested crops, B. juncea showed more inhibitory effect against the pathogen. The volatile compounds produced from macerated tissues were identified using a gas chromatograph-mass spectrometer. The main identified compounds were methyl, allyl and butyl isothiocyanates. Different concentrations of these compounds inhibited mycelial growth of the pathogen in vitro when applied as the vapor of pure chemicals. A negative relationship was observed between chemicals concentrations and growth inhibition percentage. In this study, it became clear that the tissues of local Brassica crops release glucosinolates and have a good potential to be used against the pathogen in field examinations.
시설원예단지의 재배환경은 고온다습으로 많은 병해가 발생하며, 이를 방제하기위해 과다한 농약을 사용하므로 농약 잔류성에 대한 피해가 심각한 우려를 낳고 있다. 미생물을 이용한 생물학적 방제법 개발로 청정 시설원예작물을 생산할 목적으로 길항균을 분리하였다. 잎들깨 재배토양과 식물체로부터 길항세균 18종을 분리하였으며 분리한 길항세균 중에 AK-17이 가장 활성이 뛰어나 이를 이용하여 주요 식물병원균에 대한 항균스펙트럼을 조사하였다. 그 결과 잿빛곰팡이병원균의 Botrytis cinerea와 균핵병원균의 Sclerotinia sclerotiorum 및 줄기썩음병원균인 Rhizoctonia solani에 대한 항균효과가 뛰어났다. 잎들깨의 주요 병에 대한 생물학적 방제실험은 병발생 억제효과와 병 방제효과를 pot 실험으로 실시했다. 그 결과 균핵병은 55%의 병발생 억제호과와 92%의 방제효과가 있었고, 잿빛곰팡이병은 40%의 병발생 억제효과와 78%의 방제효과를 확인할 수 있었다. AK-17의 식물 생육촉진효과는 신장이 120%, 생체중이 164% 증가되었으며, 엽수와 엽면적은 각각 120%와 220%의 증가효과를 보였다. 그리고 AK-17을 생리 생화학적방법과 유전학적 방법으로 동정한 결과, Burkhoderia sp.로 확인되었다.
The white cottony stem rot pathogen Sclerotinia scierotiorum was subjected to 70 different isolates of actinomycetes indigenous to Jordan as biological control agents. Forty of them demonstrated chitinase activity on crab shell chitin agay (CCA) media and they were segregated into three groups: 14 highly active, 12 moderately active, and 14 with low activity, with average clearing zones of (4.7-8.3), (3.7-4.3), and (2.3-3.3) mm surrounding colonies on CCA, respectively. Further, these isolates were able to inhibit radial mycelium growth of the pathogen and were categorized into three antagonistic groups: 13 strong, 13 moderate, and 14 weak antagonists, with antibiosis inhibition Bones of (32.0-45.7), (22.7-31.3), and (3.7-22.3) mm, respectively. High levels of chitinase activity of the isolates Ma3 (8.3 mm), Jul (7.7 mm), and Sa8 (7.7 mm) with their antagonistic activity against mycelium growth of 45.7, 44.3, and 40.7 mm were observed, respectively. These isolates exhibited fungicidal activity against sclevotia of S. sclerotiorum. On the other hand, isolates Na5, Aj3, and Aj2 that produced no chitinase showed fungistatic effect only.
White rot or stem rot caused by Sclerotinia sclerotiorum is one of the most destructive fungal diseases that have become a serious threat to the successful cultivation of oilseed Brassicas. The study was designed with an aim to investigate the association between the pathogenic aggressiveness and pathogenicity determinants of this pathogen specifically in Brassica for the first time. For this, a total of 58 isolates of S. sclerotiorum from different geographical regions were collected and purified. These isolates were inoculated on a Brassica juncea cv. RL-1359 and they exhibited high level of variation in their disease progression. The isolates were grouped and then 24 isolates were selected for the biochemical analysis of pathogenicity determinants. The isolates varied significantly with respect to their total organic acids, oxalic acid production and pectin methyl esterase and polygalacturonase activity. The oxalic acid production corresponded to the disease progression of the isolates; the isolates with higher oxalic acid production were the more aggressive ones and vice-versa. This is, in our knowledge, the first study to establish a correlation between oxalic acid production and pathogenic aggressiveness of S. sclerotiorum on B. juncea. However, the pectinases' enzyme activity did not follow the trend as of disease progression. These suggest an indispensable role of oxalic acid in pathogenicity of the fungus and the potential to be used as biochemical marker for preliminary assessment of pathogenic aggressiveness of various isolates before incorporating them in a breeding program.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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