Salmonella enterica serovar typhi, a Gram-negative food-borne pathogen, causes typhoid fever in humans. OmpC is an outer membrane porin of S. typhi expressed throughout the infection period. OmpC is potentially an attractive antigen for multivalent vaccines and diagnostic kit designs. In this study we combined in silico, in vitro and in vivo approaches to analyze various aspects of OmpC's antigenic properties. The conserved region, in addition to secondary and tertiary structures, and linear B cell epitopes, were predicted. A number of results obtained from in silico analyses were validated by experimental studies. OmpC was amplified, cloned and then expressed, with the recombinant protein then being purified. BALB/c mice were immunized by purified denatured OmpC. The titer of antibody was raised. Results of challenges with the pathogen revealed that the immunity is non-protective. Most of the theoretical and experimental results were in consensus. Introduced linear B cell epitopes can be employed for the design of diagnostic kits based on antigen-antibody interactions.
To construct a novel vaccine candidate against bovine enterotoxigenic Escherichia coli (ETEC), FanC, the major subunit of K99 fimbriae adhesion, was inserted into secretion plasmid pYA3560 containing a ${\beta}-lactamase$ secretion system. This was then transformed into ${\Delta}asd$${\Delta}crp$ Salmonella (S.) Typhimurium and designated as JOL950. Secretion of recombinant fanC fimbrial antigens was confirmed by immunoblot analysis. Groups of mice were inoculated with single or double doses of JOL950. Another group was used as a negative control. Compared to control mice, all immunized mice had significantly higher levels (p < 0.05) of serum immunoglobulin (Ig)G, and secretory IgA against FanC. The IgG2a and IgG1 titer assays revealed that immunization highly induced IgG2a compared to that of IgG1, indicating that T helper-1- related cell-mediated immune responses may be elicited by JOL950. The results show that both systemic and mucosal immunities against selected fimbrial antigens of bovine ETEC expressed by a live attenuated S. Typhimurium strain are prominently produced in mice immunized with JOL950 via an oral route.
Kim, Jong Deok;Choi, Seong Yeol;Kim, Dong Soo;Kim, Ki Hwan
Pediatric Infection and Vaccine
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v.20
no.1
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pp.41-45
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2013
Nontyphoidal Salmonella are gram negative bacilli organism, which may induce systemic infection such as febrile enteritis, bacteremia, and osteomyelitis. Main route of infection is known as food but also possible through reptile, amphibian, and fish raised as pets in the house. There is no known cases report of Salmonella infection through pets in Korea and also rare in the overseas. We report 2 patients who visited Severance children's hospital with chief complaint of fever and diagnosed as nontyphoidal salmonellosis. Each case had a history of raising turtle or tropical fish with possibility of Salmonella infection through these pets. Increasing incidence of raising pet reptile and fish lately, contact precaution and proper prevention and control of Salmonella infection of these pets especially in children under 5 years old are necessary due to higher risk of serious complications of salmonellosis.
Kim, Kiju;Kim, Dooree;Sun, Jisun;Park, Soyeon;Cho, Youngjae;Ko, Hyun-Jeong;Joo, Hong-Gu;Hahn, Tae-Wook
Korean Journal of Veterinary Research
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v.53
no.2
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pp.95-101
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2013
The study was carried out to evaluate and compare the immune responses in mice experimentally infected with either wild-type or isogenic mutants of Salmonella enterica serovars Enteritidis (SE), Salmonella Typhimurium (ST) and Gallinarum (SG). The mutant strains were constructed by allelic replacement of some virulence-associated genes in the wild-type strains. Seven-week-old female BALB/c mice were orally or intraperitoneally inoculated by injecting bacterial suspension. To evaluate the immune responses, enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) and enzyme-linked immunospot (ELISPOT) assay were conducted with serum and fecal samples. As a result, the mice group infected orally with the SE mutant strain showed the highest level of specific IgA-secreting splenocytes, compared to the other groups. The peritoneally injected groups showed the greater levels of IgG1 than the orally injected groups, which was in a good agreement with the previous studies. In addition, the mutant infected groups had the similar secretion levels of antibodies with the wild-type infected groups. These results demonstrated that the SE mutant strain elicited humoral immune response as much as wild-type, implying that it can be useful as a delivery vehicle as well as a candidate of a live attenuated vaccine.
Baek, Jee Yeon;Shin, Jehee;Lim, Sungmin;Kang, Ji-Man;Ahn, Jong Gyun
Pediatric Infection and Vaccine
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v.28
no.3
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pp.160-167
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2021
Pyogenic spondylitis, an extremely rare complication of nontyphoidal Salmonella infection in immunocompetent children, occurs more commonly in patients with hemoglobinopathies such as sickle cell disease or in immunocompromised patients. In this study, we report a case of pyogenic spondylitis in a previously healthy 13-year-old immunocompetent adolescent, who presented with prolonged fever and right upper quadrant pain. Stool culture results comfirmed nontyphoidal Salmonella infection, and the patient was diagnosed with pyogenic spondylitis caused by nontyphoidal Salmonella based on additional imaging studies performed for evaluation of the patient's prolonged fever. This case highlights the importance of culture studies for evaluation of patients with fever of unknown origin and also the importance of detailed investigations for early detection of complications of extra-intestinal infections in patients with an unusual clinical course of salmonellosis.
Salmonella infections cause the disease in pigs but also some zoonotic Salmonella serotypes can be transmitted to human through swine products, resulting in food poisoning. The objective of this study was to investigate the bacteriological prevalence and detection of invA gene using Salmonella specific polymerase chain reaction (PCR), the epidemiological characteristics related to Salmonella strains cultured from pig samples in Gangwon areas using serotyping, random amplified polymorphic DNA (RAPD) and pulsed field gel electrophoresis (PFGE) methods. During the period of November 2001 through April 2002, 1,174 ileocecal lymph node were collected from the slaughtered pigs raised in 38 farms located in Gangwon province. The samples were submerged in boiling water and macerated in saline and lymph node homogenates were inoculated into Tetrathionate broth with iodine (TTB, Difco, 0.5% iodine was added) for enrichment growth. Then additional tests were performed using several mediums, and suspects were identified by API 20E kit (BioMerieux) and PCR. Of total 1,174 samples from 38 farms, 44 (3.7%) were isolated as Salmonella spp from 13 farms (34.2%). Of 44 isolates, 31 were in Yangyang region, followed by 9 in Goseong, 2 in both Gangneung and Sokcho. However, there was no difference in regional isolation frequency. All isolates have a 521bp amplified product in Salmonella specific PCR with primer invA which encodes in proteins for invasion of epithelial cells. Of 44 recovered serotypes, 23 (52.3%) were S Eingedi, 10 (22.7%) S Schwarzengrund, 9 (20.5%) S Typhimurium, and 2 (4.5%) S Mbandaka. In RAPD analysis, there appeared to be unique bands distinguishing each serotype, although similarities exist between the different serotypes. Four serotypes of 44 Salmonella isolates appeared to fall into 14 different RAPD types. In PFGE analysis, 9 S Typhimurium were tested with XbaI enzyme and SpeI enzyme. The combination of results obtained with two enzymes subdivided the 9 S Typhimurium into 4 PFGE types.
CJ-50005 is an inactivated whole virus vaccine derived from hepatitis A virus (HM175) grown in human MRC-5 diploid fibroblasts cell culture. In order to evaluate the mutagenic potential of CJ-50005, : 3 sets of mutagenicity tests were performed. In the reverse mutation test wing Salmonella typhimurium TA1535, TA1 537, TA98, TA100 and TA102, CJ-50005 did not increase the number of revertants at any concentration tested in this study (2.8, 1.4, 0.7, 0.35 and 0.175 $\mu\textrm{g}$/plate). CJ-50005, at concentration of 2.8, 1.4 and 0.7 $\mu\textrm{g}$/ml, did not increase the number of cells having structural or numerical chromosome aberration in cytogenic test using Chinese Hamster Lung cells. In mouse micronucleus test, no significant increase in the occurrence of micronucleated polychromatic erythrocytes was observed in ICR male and female mice intraperitoneally administered with CJ-50005 at the doses of 25, 12.5 and 6.25 $\mu\textrm{g}$/kg. These results indicate that CJ-50005 has no mutagenic potential in these in vitro and in vivo system.
Yang, Su Jin;Lee, Si Young;Lee, Hannah;Park, Yeong Chul;Choi, Seon Kang;Yu, Chang Yeon;Chung, Ill Min;Lim, Jung Dae
Korean Journal of Medicinal Crop Science
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v.24
no.5
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pp.408-419
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2016
Background: In recent years, adjuvants have received increasing attention owing to the development of purified subunit and synthetic vaccines which are poor immunogens and require additional adjuvants to evoke an immune response. Therefore, immunologic adjuvants have been developed and tested. Plant polysaccharides have been recognized as effective biological response modifiers with low toxicity. Methods and Results: In this study, the polysaccharide from the aboveground part of Astragalus membranaceus Bunge containing immunomodulating arabino-3,6-galactan was evaluated for its hemolytic activity and adjuvant potential in the specific cellular and humoral immune responses to ovalbumin. The polysaccharide from the aboveground part of Astragalus membranaceus Bunge was co-immunized with the purified Vi capsular polysaccharide of Salmonella typhi vaccine in mice. The polysaccharide from the aboveground part of Astragalus membranaceus Bunge did not induce any hemolytic activity or side effects at doses up to $500{\mu}g/m{\ell}$. The concanavalin A-, lipopolysaccharide-, and ovalbumin-induced splenocyte proliferation and serum ovalbumin-specific IgG, IgG1 and IgG2b antibody titers in immunized mice were significantly enhanced by AMA. Pharmacological data revealed that the polysaccharide from the aboveground part of Astragalus membranaceus Bunge increased antigen-specific antibody levels in immunized mice. The polysaccharide from the aboveground part of Astragalus membranaceus Bunge-adjuvanted purified Vi capsular polysaccharide of Salmonella typhi vaccine improved the proliferation of splenocytes and macrophages as well as stimulated cytokine production. Conclusions: These results suggest that the polysaccharide from the aboveground part of Astragalus membranaceus Bunge-adjuvanted vaccines enhanced humoral and cellular immunity and that the polysaccharide from the aboveground part of Astragalus membranaceus Bunge is a safe and efficacious adjuvant candidate suitable for use in prophylactic and therapeutic vaccines.
Cho, Youngjae;Park, Soyeon;Barate, Abhijit Kashinath;Truong, Quang Lam;Han, Jang Hyuck;Jung, Cheong-Hwan;Yoon, Jang Won;Cho, Seongbeom;Hahn, Tae-Wook
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.25
no.2
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pp.288-295
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2015
Salmonella enterica serovar Enteritidis is the predominant agent causing salmonellosis in chickens and other domestic animals. In an attempt to identify antigenic S. Enteritidis outer membrane proteins (OMPs) that may be useful for subunit vaccine development, we established a proteomic map and database of antigenic S. Enteritidis OMPs. In total, 351 and 301 spots respectively from S. Enteritidis strain 270 and strain 350 were detected by two-dimensional gel electrophoresis. Fifty-one antigen-reactive spots were detected by antisera on two-dimensional immunoblots and identified as 12 specific proteins by matrix-assisted laser desorption ionization time-of-flight mass spectrometry. OmpA and DNA starvation/stationary phase protection protein (Dps) were the most abundant proteins among the identified OMPs, comprising 22 and 12 protein species, respectively. Interestingly, we found that the Dps of S. Enteritidis is also antigenic. OmpW was also verified to have high antigenicity. These results show that OmpA, Dps, and possibly OmpW are antigenic proteins. This study provides new insights into our understanding of the immunogenic characteristics of S. Enteritidis OMPs.
Feeding probiotics in broiler chicks still critical in several aspects. Thus, this study was conducted to investigate the impact of feeding multiple probiotics on performance, intestinal microflora, blood cholesterol and ND antibody vaccine titer in broiler chicks. Three hundred twenty one day old male broiler chicks(cobb ${\times}$ cobb) were divided into four levels of multiple probiotics(0, 0.1, 0.2, 0.3%) with five replicates for 35 days. Basal diets contained 21.5, 19.0% CP and 3,100 kcal/kg ME for starting and finishing period, respectively. Weight gain, feed intake and feed conversion were measured weekly. The number of Salmonella, E. coli, Lactobacillus, and yeast were examined from ileum and cecum at the end of experiment. ND vaccine titer, cholesterol were detected from sera. Weight gain of birds fed probiotics were 669.33, 679.75 at the level of 0.1 and 0.2% supplemental groups for starting period. It was also improved in those treatments for finishing period and higher than control for total period. Feed conversion tended to be improved compared to that of control by the supplementation of probiotics for the first three weeks and seemed to show the similar tendency for the rest of two weeks. It was 1.611, 1.621 for the entire feeding period and improved compared with control. Total salmonella, was not decreased in ileal digesta of birds fed the probiotics compared with control, whereas the number of yeast increased in 0.1% treatment. However, the number of Lactobacillus and yeast in cecum was higher than control. Even though the blood cholesterol seem to high in 0.1% probiotics treatment, the ratio of HDL to total cholesterol showed higher than control. ND vaccine titer of birds fed probiotics were significantly higher than control (P<0.05). These results 0.1% multiple probiotics would be possible to improve the performance of broiler chicks and ND vaccine titer.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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