Chitinases are glycosyl hydrolases which cleave the ${\beta}$-1,4 linkage of chitin into oligo or monomers of N-acetylglucosamine. These bacterial enzymes have been used for a wide range of applications in the food and pharmaceutical industries. In this study, we isolated two potential chitinolytic strains, BAO-01 and BAO-02, from salt-fermented shrimp, which were shown to belong to the genus Salinivibrio through genetic characterization using 16S rRNA. These isolates were gram-positive, rod-shaped, and non-spore forming. BAO-01 showed greater growth and chitinase activity than BAO-02 after the incubation at $37^{\circ}C$ for 4 days. Both strains grew on a wide range of carbon and nitrogen sources, pH values, temperatures, and salt levels. However, they showed minor biochemical differences. In addition, their antimicrobial activities against foodborne pathogens and antibiotic susceptibilities were evaluated. These Salinivibrio spp. did not show bioamine production, hemolytic activity, and mucin degradation. Therefore, the in vitro screening results suggested that these bacteria could be widely used as new candidates for chitin hydrolyzation and seafood fermentation.
발효가 진행중인 멸치액젓에서 단백질분해효소를 생산하는 3종의 호염성 세균을 분리하였다. 분리된 FAM 10, FAM 114, 그리고 FAM 115는 각각 소금농도가 2~4%, 10%, 6%에서 최적 세포성장이 관찰되었으며, 18~22% 소 금농도까지 생육이 가능했다. 단백질분해효소 생산을 위한 최적 소금농도는 FAM 10은 6%, FAM 114와 FAM 115는 10%로 나타났다. FAM 10의 단백질분해효소 활성은 10%까지 첨가하면 서서히 저하되며, 14% 소금농도에서는 효소활성이 없는 반면, FAM 114와 FAM 115의 경우, 14%까지 효소활성을 나타냈으며 18%에서는 활성을 관찰할 수 없었다. 이러한 결과로부터 분리된 3종의 미생물이 중간 정도의 호염성 세균임을 증명하였다. 16S rRNA 유전자와 16S-23S 유전자 사이 공간(IGS) 서열, 생화학적 실험, 그람염색을 이용하여 비교 분석한 결과, FAM 10, FAM 114, 그리고 FAM 115는 각각 Salinivibrio sp., Halobacillus sp., 그리고 Halobacillus sp.임을 동정하였다. Salinivibrio sp. FAM 10에는 191번째 서열부터 약간 다른 2가지 종류의 16S rDNA와 16S-23S IGS내에 tRNA 유전자가 없는 형태, 이소루이신/알라닌, 글루탐산/라이신/발린을 운반하는 tRNA 유전자들을 함유하는 4가지 종류의 다른 16S-23S IGS가 존재하였다. Hablobacillus sp. FAM 114와 FAM 115는 완전히 동일한 16S rRNA 유전자 서열을 가지고 있었으며, 여러 Halobacillus sp.와 99% 서열동일성을 보여주었다. IGS의 경우, tRNA 유전자가 없는 IGS와 이소루이신/알라닌을 운반하는 tRNA 유전자들을 함유하는 3가지 16S-23S IGS가 존재하였으며, Halobacillus aidingensis와 Halobacillus sp. JM-Hb의 IGS와 99% 서열동일성을 보여주었다.
This study focused on the preparation and characterization of anti-wrinkle peptides from the salted and fermented shrimp (Acetes japonicus) inoculated with Salinivibrio cibaria BAO-01 (SFSC). The results showed the proximate composition of SFSC to be 9.23% water, 75.32% protein, 0.23% fat, and 13.3 mg/g ash. Interestingly, the S. cibaria fermentation significantly increased the amount of methionine, leucine, and arginine. The in vitro antioxidant activity was assayed by the diphenylpicrylhydrazyl method and its IC50 value was found to be 43.02±2.84 ㎍/mL. It was observed to inhibit the activity of elastase, tyrosinase, collagenase, and hyaluronidase. The IC50 values of SFSC were 182.75±12.38 ㎍/mL for anti-elastase activity, 186.78±7.95 ㎍/mL for anti-tyrosinase activity, 444.4±34.81 ㎍/mL for anti-collagenase activity, and 1447.95±28.92 ㎍/mL for anti-hyaluronidase activity. These results suggest that salted and fermented shrimp has strong potential for the development of nutricosmetic products.
우리나라 전남지역에서 생산되는 천일염의 생산공정별 미생물 분포 조사 및 배양 분리법을 이용하여 호염미생물을 분리하여 동정하는 것을 이번 연구의 목표로 삼았다. 천일염 시료는 생산지를 고려하여 육지 염전인 영광군 한 지역과 해안 염전 지역인 신안군 두 군데에서 생산공정별로 세분화하여 총 28개 분석시료를 수집하여 사용하였으며, 이들 시료를 십진 희석하여 4종류의 미생물 분리용 배지에 도말, 배양한 후 나타난 집락(colony)을 계수하였다. 그 결과 천일염 생산 공정 중 대장균 등의 식품 오염지표 미생물은 검출되지 않았지만, 저장수에서 증발지 단계로 진행되면서 $1.1{\times}10^3{\sim}1.8{\times}10^5$ CFU/g의 호염성 미생물들이 검출되었다. 그러나 이후 단계인 함수저장고, 결정지에서는 미생물 수가 점차적으로 감소되었으며, 소금저장소에 보관된 천일염 시료에서는 미생물이 전혀 검출되지 않았다. 이들 분리균들은 형태학적 특성에 따라 무작위로 62개 집락을 선정하여 분리하였다. 순수 분리된 미생물들은 PCR 기법을 통해 16S rRNA 유전자의 염기서열을 분석한 후, 기존에 보고된 미생물 유전자 database와 비교함으로써 12속의 천일염 유래 호염균들의 존재를 확인하였다. 이번 연구 결과 천일염 생산 단계에서 분리된 halophilic bacteria은 Halobacillus, Halomonas, Bacillus, Idiomarina, Marinobacter, Pseudoalteromonas, Vibrio, Salinivibrio, Virgibacillus, Alteromonas, Staphylococcus 및 un-known 등이다.
We isolated and cultured bacteria inhabiting solar saltern ponds in Taean-Gun, Chungnam Province, Korea. All of the isolated 64 strains were found to be moderately halophilic bacteria, growing in a salt range of 2-20 %, with an optimal concentration of 5% salt. Bacterial diversity among the isolated halophiles was evaluated via RFLP analyses of PCR-amplified 16S rDNAs, followed by phylogenetic analysis of the partial 16S rDNA sequences. The combination of restriction enzyme digestions with HaeIII, CfoI, MspI and RsaI generated 54 distinct patterns. A neighbor-joining tree of the partial 16S rDNA sequences resulted in the division of the 64 strains into 2 major groups, 45 strains of ${\gamma}-Proteobacteria$ (70.3%) and 19 strains of Firmicutes (29.7%). The ${\alpha}-Proteobacteria$ and Cytophaga-Flavobacterium-Bacterioides groups, which were repeatedly found to exist in thalassohaline environments, were not represented in our isolates. The ${\gamma}-Proteobacteria$ group consisted of several subgroups of the Vibrionaceae (37.5%), Pseudoalteromonadaceae (10.9%), Halomonadaceae (7.8%), Alteromonadaceae (7.8%), and Idiomarinaceae (6.3%). Members of Salinivibrio costicola (29.7%) were the most predominant species among all of the isolates, followed by Halobacillus treperi (12.5%). Additionally, three new species candidates were found, based on similarities of the 16S rDNA sequences to those of previously published species.
Kim, Min-Kyeong;Park, Jisun;Yun, Bo-Ram;Bae, Jin-Woo;Cha, Chang-Jun;Cho, Jang-Cheon;Im, Wan-Taek;Jahng, Kwang Yeop;Jeon, Che Ok;Joh, Kiseong;Kim, Wonyong;Lee, Soon Dong;Seong, Chi Nam;Yi, Hana;Kim, Seung-Bum
Journal of Species Research
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제7권1호
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pp.24-35
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2018
During a series of extensive surveys of prokaryotic species diversity in Korea, bacterial strains belonging to Gammaproteobacteria were isolated from various sources of aquatic and terrestrial environments. A total of 39 isolates were obtained, which represented 39 unrecorded species in Korea belonging to 20 genera in 12 families. Enterobacteriaceae was the largest family, as eight species were assigned, which was followed by Moraxellaceae (6 species) and Pseudomonadaceae (5 species). At the genus level, Marinobacter (6 species), and Pseudomonas (5 species) were the main genera, and at least two species were obtained for Acinetobacter (3 species), Psychrobacter (3 species), Shewanella (2 species), Dickeya (2 species), Salinivibrio (2 species), Vibrio (2 species) and Rhodanobacter(2 species). The detailed description of each unrecorded species is provided.
젓갈의 숙성에 미치는 bacteria의 역할 규명을 목표로 고염에서 생장하며 단백질 분해활성을 나타내는 bacteria를 멸치젓과 새우젓으로부터 분리하여 이들의 고염에서의 생장을 검토하였다. NaCl이 15% 첨가된 고체배지를 이용하여 bacteria를 분리한 경우, 멸치젓으로부터는 Bacillus 및 근연속이, 새우젓으로부터는 Staphylococcus 속이 우점으로 분리되었고, 멸치젓으로부터 분리된 Virgibacillus halodenitrificans와 새우젓으로부터 분리된 Halobacillus trueperi가 단백질 분해활성을 나타내었다. NaCl이 8% 첨가된 고체배지에서 단백질 분해활성을 나타낸 멸치젓 유래 bacteria는 Vb. halodenitrificans를 중심으로 한 Bacillus 근연 속으로 NaCl 농도 15%에서 생장하는 bacteria의 군집과 크게 다르지 않았다. 그러나 NaCl이 8% 첨가된 고체배지에서 단백질 분해 활성을 나타낸 새우젓 유래 bacteria는 NaCl 농도 15%에서 분리된 우점균 Staphylococcus, Salinicoccus, Salimicrobium 속이 아닌 Bacillus 속과 Planococcus, Salinivibrio 속으로 확인되어 새우젓의 우점종은 단백질 분해와 큰 관련이 없는 것으로 추정된다. 멸치젓의 우점종 Vb. halodenitrificans와 새우젓의 우점종 Staphylococcus equorum은 NaCl이 25% 첨가된 배지에서도 생장을 나타내어 젓갈 숙성과 높은 관련성을 가지고 있으며, 종균으로 이용될 높은 가능성을 가지고 있다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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