To evaluate lactation performance and changes in plasma and fecal lipopolysaccharide (LPS) concentrations in response to the supplementation of Saccharomyces cerevisiae fermentation product (SC), two dairy farms were selected. On each farm, 32 cows in early to mid lactation (21 to 140 DIM) were blocked by parity and days in milk (DIM), and randomly assigned to one of the two treatments within block (Control or 56 g SC/cow/d). Effect of SC on lactation performance (daily) and changes in blood and fecal LPS level were examined on d 0 and 28 of supplementation. The results showed that SC supplementation increased lactation performance of dairy cows on both farms. On Farm 1, milk production, 3.5% fat corrected milk (FCM), and yield of milk fat and protein were greater (p<0.01) for cows supplemented with SC. Supplementation of SC increased percentage milk fat (p = 0.029) from 81 to 110 DIM. There was no significant effect (p>0.05) of SC supplementation on percentage of milk protein, dry matter intake and feed efficiency. On Farm 2, cows supplemented with SC had a greater (p<0.05) milk yield, percentage of milk fat and milk protein, yield of milk fat and protein, 3.5% FCM and feed efficiency. Supplemental SC had no effect on LPS concentrations in feces (p>0.05) while it trended to reduce (p = 0.07 or 0.207) the concentration in plasma. The results indicate that supplemental SC can increase lactation performance of dairy cattle and has potential for reducing plasma LPS concentration.
Transcriptional gene silencing is regulated by the chromatin structure, which is by various factors including histones. Saccharomyces cerevisiae contains transcriptionally silenced regions such as telomeric regions and hidden mating (HM) loci. The positively-charged amino acids on the histone H4 tail were reported to be critical for the telomeric silencing in yeast, by interacting with Dot1, a specific methyltransferase for the $79^{th}$ lysine on histone H3. However, Dot1 did not affect gene silencing within HM loci, but whether the positively-charged amino acids on the H4 tail affect HM silencing has not been defined. To elucidate the function of the H4 tail on HM silencing, we created several MATa-type yeast strains bearing the substitution of arginine with alanine or lysine on the histone H4 tail and checked the sensitivity of MATa-type yeast to alpha pheromone. The arginine point mutants substituted by alanine (R17A, R19A, and R23A) did not show sensitivity to alpha pheromone, but only two arginine mutants substituted by lysine (R17K and R19K) restored the sensitivity to alpha pheromone-like wild type. These data suggested that the basic property of arginine at $17^{th}$ and $19^{th}$ positions in the histone H4 tail is critical for maintaining HM silencing, but that of the $23^{rd}$ arginine is not. Our data implicated that the positive charge of two arginine residues on the histone H4 tail is required for HM silencing in a manner independent of Dot1.
금정산성 막걸리$^{(R)}$는 전통적인 수제누룩과 쌀로부터 발효된 한국의 전통적인 술이다. 본 연구에서는 막걸리 발효기간 동안 세균과 진균의 다양성을 특성화하기 위해 16S와 28S rRNA 유전자를 목적으로 하는 PCRDenaturing Gradient Gel Electrophoresis (PCR-DGGE) 분석을 수행하였다. 막걸리 발효기간 동안 PCR-DGGE profile에서 검출된 세균은 16S rRNA 유전자 서열에 기초한 동정결과 Lactobacillus spp. (L. curvatus, L. kisonensis, L. plantarum, L. sakei 및 L. gasseri), Pediococcus spp. (P. acidilactici, P. parvulus, P. agglomerans및 P. pentosaceus), Pantoea spp. (P. agglomerans 및 P. ananatis) 그리고 Citrobacter freundii로 총 12종이었으며, 배양2일 이후 L. curvatus가 주된 우점 종을 형성하였다. 반면 PCR-DGGE profile에서 검출된 진균은 28S rRNA 유전자 서열에 기초한 동정결과 Pichia kudriavzevii, Saccharomyces cerevisiae, Asidia idahoensis, Kluyveromyces marxianus, Saccharomycopsis fibuligera 및 Torulaspora delbrueckii로 6종이었으며 주된 우점 진균은 배양0일에서 2일에 P. kudriavzevii에서 배양 3일에서 6일에 S. cerevisiae로 전환되었다. 결과적으로 PCR-DGGE분석은 막걸리발효기간 동안 미생물의 구조와 다양성을 이해하는 데 유용한 도구임을 보여주었다.
Saccharomyces cerevisiae NS 2031의 유가식 배양에서 기질공급방법에 따라 효모 생육과 RNA 축적을 관찰하였다. Exponential feeding 형태에서 기질공급속도가 빠를 때 최종 배양 시간에서 균체량과 새포내 RNA 함량은 감소하는 경향을 나타내었으며, 배양시간이 경과함에 따라 균체내 RNA 함량은 전반적으로 감소하는 경향을 나타내었다. Exponential feeding 형태의 동일한 기질공급속도에서, 기질공급농도가 높을수록 최종 균체량은 감소하였으며, 균체수율(Yx/s)은 10%의 기질공급농도에서 0.47로 가장 높았다. 균체내 RNA 함량은 기질공급농도가 높을수록 증가하는 경향을 보였다. Parabolic feeding 형태에서는 기질공급속도가 빠를수록 균체량은 감소하였으나, 균체내 RNA 함량은 증가하여 exponential feeding 형태에서와 다른 경향을 나타내었다. 두가지 기질공급형태에서 균체생육에 가장 좋은 기질공급 program의 결과를 비교해 보면, 균체량, 균체수율, 세포내 RNA 함량을 높이려면 exponential feeding 형태가 parabolic feeding 형태보다 유리하였다. 또한, 유가식 배양에서 같은 instantaneous growth rate $({\mu}_{inst})$에서 균체내 RNA 함량을 비교하면, exponential feeding이 parabolic feeding보다 2%가량 높게 유지되어, 기질공급형태가 균체내 RNA 축적 생리에 큰 영향을 주고 있음을 알았다.
To isolate yeast strains producing high concentration of ethanol, 125 strains were subjected to screening. Initially 14 strains able to grow in a medium containing 15%(v/v) ethanol, 7 strains capable of growing in a medium containing 50%(v/v) glucose, 23 strains having relatively fast fermentation rates, 13 strains able to grow at $42^{\circ}C$ were selected. After secondary screening, 11 strains having relatively high ini-tial fermentation rate and producing high concentration of ethanol were selected. After tertiary screening 5 strains producing high concentration of ethanol were selected. These 5 strains were again for their ethanol produc-tion, residual sugar, and viability using fermentation medium containing 25% glucose. The strain producing the highest concentration of ethanol was 20-1 strain which produced 10.56%(v/v) ethanol in 4 days, and the highest viable strain was 11-1 which produced 10.35%(v/v) ethanol(13.1%. v/v) with the viability of 30.44% after 5 days of fermentation. Both of the 20-1 and 11-1 strains were identified as Saccharomyces cerevisiae.
Lee Jung-Ok;Kim Young-Ok;Shin Dong-Hoon;Shin Jeong-Hyun;Kim Eun-Ki
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제16권7호
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pp.1041-1046
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2006
Selenium-containing peptide (selenium peptide) was produced by autolysis of total proteins of Saccharomyces cerevisiae grown with inorganic selenium. Selenium peptide exhibited antioxidant activity as a glutathione peroxidase (GPx) mimic, and its activity was dependent on the hydrolysis methods. The GPx-like activity of the hydrolyzed selenium peptide increased 2.7-folds when digested by protease, but decreased by acid hydrolysis. During the autolysis of the yeast cell, the GPx-like activity and selenium content increased 4.3- and 2.3-folds, respectively, whereas the average molecular weight (MW) of selenium peptide decreased 70%. The GPx-like activity was dependent on the MW of selenium peptide and was the highest (220 U/mg protein) at 9,500 dalton. The maximum GPx-like activity (28,600 U/g cell) was obtained by 48 h of autolysis of the cells, which were precultured with 20 ppm of selenate. Selenium peptide showed little toxicity, compared with highly toxic inorganic selenium. These results show the potential of selenium peptide as a nontoxic antioxidant that can be produced by simple autolysis of yeast cells.
The recombinant human interferon alpha 2a ($rhIFN-{\alpha}2a$), expressed in Saccharomyces cerevtsiae, was purified from insoluble aggregates. The inclusion body of $rhIFN-{\alpha}$ was solubilized by guanidine salt in the presence of disulfide reducing agent. The refolding of denatured $rhIFN-{\alpha}2a$ was achieved by simple dilution. The authentic interferon alpha, which has two correctly matched disulfide bonds, was seperated from incompletely oxidized $IFN-{\alpha}$ and dimeric $IFN-{\alpha}$ by use of a CM-Sepharose column, followed by size exclusion columns at two different pH conditions. The purified protein has been subjected to detailed physicochemical characterization including sequence determination. Unlike other $rhIFN-{\alpha}2a$ from E. coli reported, the $rhIFN-{\alpha}2a$ from S. cerevisiae has no methionine residue at its N-terminus originating from the start codon, ATG. The pI of the protein was determined to be 6.05 with a single band in the pI gel, which demonstrated that the purified $rhIFN-{\alpha}$ was homogeneous. The structural study using circular dichroism showed that the protein retains its three dimensional structure in the wide range of pH conditions between pH 3 and 9, and only minor strucural deformation was observed at pH 1.0.
본 연구에서는 산업폐수중 유기성분이 많은 식품, 펄프 공장폐수에 대하여 유기들을 영양원으로 하는 미생물을 배양시켜 유기성분을 경감시켜 폐수 정화를 목격으로 하였다. 한편 폐수정화에서 회수되는 균체는 단백질자원으로서의 사료화를 또 다른 목적으로 하고 일련의 실험을 통하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 1. 펄프, 맥주, 빵효모, 주정공장폐수의 총당은 $1.4{\sim}1.54%$, 총 질소는 $0.25{\sim}0.35%$, BOD는 $400{\sim}25,000$, COD는 $500{\sim}28,000$, pH는 $3.8{\sim}7.0$이었고 주정공장 폐수가 BOD, COD는 가장 높았다. 2. 각 폐수중 세균총수는 $4{\times}10^4{\sim}1{\times}10^9$, 효모총수는 $2{\times}10^2{\sim}7{\times}10^4$이었다. 3. 폐수별로가 생장속도 우수한 균주로는 펄프공장폐수에서는 세균을, 맥주, 빵효모, 주정공장폐수에서는 효모를 선정 하였다. 4. 주정공장폐수정화에 최적인균주로서는 Candida curvata SAFM 70, Saccharomyces cerevisiae SAFM 1008을 선정하였다. 5. 주정중류폐액 및 중류잔사에 미생물성 cellulase, xylanase, pectinase를 처리함으로서 처리전보다 잔사량을 36% 감소시키면서 가용성화를 높여서 환원당량을 1.3배 증가시켰으므로 효모배양에 좋은 조건임을 확인하였다. 6. 효소처리한 주정증류제액에 선정된 효모를 배양하면서 배양최적조건을 확인하였다. a. Candida curvata SAFM 70 및 Saccharomyces cerevisiae SAFM 1008 2균주 모두 최적 pH는 5.0이었다. b. 2균주 모두 질소원으로는 요소, 질소농도로는 0.2%가 최적조건이었고 인삼염으로서는 $KH_2PO_4$, 그의 농도는 0,1% 그러고 Mg원으로서는 $MgSO_4$, 그의 농도는 0.02% 이었다. c. 2균주 모두 최적온도는 $30^{\circ}C$이었고 통기, 교반효과는 증식도에 크게 영향끼침을 알었다. 7. 종효모의 생포수는 적어도 $1.8{\times}f10^5/ml$ 이상이어야 증식이 순조로움을 알었다. 8. 미생들 효소를 처리한 주정증류폐액에 선정효모를 배양하여 건조균체를 생산하는데는 Saccharomyces cerevisiae SAFM 1008 보다 Candida curvata SAFM 70이 우수하였다. 9. 미생물성효소를 처리한 주정증류폐액 1000ml 당 Saccharomyces cerevisiae SAFM 1008은 16g, Candida curvata SAFM 70은 17.6g의 건조균체를 해수할 수 있었다. 주정증류공장폐수의 BOD 제거율은 전자의 효모에서 46a, 후자의 효모에서 52%이었다. 10. 주정증류공장폐수에서 생산된 효모균체는 단백질 함량이 $46{\sim}$52%임으로 사료용효모로서 적당함을 확인하였다.
지난 20여년 동안 항생제나 화학 요법의 문제점을 줄이고 외부 환경의 변화에 민감하게 반응하는 장내 미생물들의 균총을 유지시켜주기 위해 살아있는 미생물제제(direct-fed microbial agents, DFM)를 반추가축의 사료에 직접 첨가하고 있다. 반추동물 사료에도 생산성을 개선하기 위하여 여러 종류의 DFM이 널리 이용이 되고 있는데, DFM은 건물섭취량(dry matter intake, DMI)의 증가 및 반추위내에서의 영양소 분해율 향상 그리고 유생산량의 증가와 체온감소 등에 효과적이다(Piva 등, 1993; Higginb- otham 등, 1994; MacGilliard와 Stallings, 1998; Nocek와 Kautz, 2006). 대표적인 DFM으로는 효모균, 곰팡이, 박테리아 및 세포 구성물질 등이 이에 속한다(Beharka와 Nagaraja, 1993; Sullivan과 Martin 1999). 효모 및 효모배양물은 대표적인 DFM의 한 종류인데, 반추가축에게 효모(yeast) 및 효모 배양물(yeast culture)을 급여하였을 때 반추위 내 발효 특성을 변화시키고(Harrison 등, 1988; Martin과 Nisbet, 1990) 반추위 내에서 조단백질과 조섬유의 반추위내 분해율을 개선시키며(Gomez-Alarcon 등, 1990; Williams 등, 1991), 체내 전장소화율(Gomez-Alarcon 등, 1990; Wiede- mier 등, 1987)을 향상시키는 효과가 있다고 보고된 바 있다. 한편, 일반적으로 대부분의 Clostridium 균들은 독소를 생산하거나 인체에 유해한 물질들을 생산하여 사람과 가축에게 좋지 않은 영향을 주고 있으나, Clostridium butyricum은 장내 유익한 균으로서 유산균과의 공생이 가능하고 반추위 내에서 주요 VFA 생산에 관여하기도 하며(Araki 등, 2002a, 2002b) 많은 종류의 비타민 B군을 생산하여 유산균이 이용할 수 있게 한다. 또한 생산되어진 acetic acid와 butyric acid는 장관 상피세포를 흡수되어 상피세포에서 에너지원으로 사용되어진다고 하였다(김 등, 2001). 낙산균은 주로 단위동물에서 사용되어 왔는데, 일부 복합생균제의 형태로 사용하였을 경우 유해세균이 장 점막을 침입하는 것을 방지하고(Fuller와 Brooker, 1974), butyric acid를 생산하여 장내 pH를 저하시키며 항균작용(Under-dahl 등, 1982)을 하는 것으로 알려져 있다. S. cerevisiae는 가장 일반적으로 사용되는 균주로써 이의 효과와 효능에 관한 연구는 비육우와 착유우를 대상으로 많이 이루어져 왔지만, 낙산균은 일부 국내 젖소 사육농가에서 사용되고 있음에도 불구하고 이에 대한 연구는 단위동물 및 어린송아지의 경우(최 등, 1991)를 제외하고는 거의 이루어지지 않았다. 따라서 본 연구는 S. cerevisiae 및 C. butyricum을 단독으로 또는 혼합하여 급여할 때 면양에서의 반추위내 발효성상과 소화율, 그리고 젖소를 이용한 사양시험을 통해 산유량과 유조성에 미치는 효과를 비교하기 위하여 실시되었다.
We have cloned a ${\alpha}-COP$ homolog, ancop, from Aspergillus nidulans by colony hybridization of chromosome specific library using ${\alpha}-COP$ homologous fragment as a probe. The probe DNA was amplified with degenerated primers designed by comparison of conserved region of the amino acid sequences of Saccharomyces cerevisiae ${\alpha}-COP$, Homo sapiens HEP-COP, and Drosophila melanogaster ${\alpha}-COP$. Full length cDNA clone was also amplified by RT-PCR. Comparison of genomic DNA sequence with cDNA sequence obtained by RT-PCR revealed 7 introns. Amino acid sequence similarity search of the anCop with other ${\alpha}-COPs$ gave an overall identity of 52% with S. cerevisiae, 47% with human and bovine, 45% with Drosophila and Arabidopsis. In upstream region from the transcription start site, a putative TATA and CAAT motif were also identified.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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