Coenzyme Q는 지용성 퀴논 유도체로서 미토콘드리아의 내막과 원핵생명체의 세포막에 위치하는 전자전달계에서 전자 운반체로 이용되며 또한 항산화제의 기능도 갖는다. Coenzyme Q의 생합성에 관여하는 Saccharomyces cerevisiae의 coq4 유전자에 유사성을 나타내는 Neurospora crassa coq-4유전자를 클로닝하여 S. cerevisiae coq4 돌연변이체에서 기능적으로 발현하였다. 상보된 S. cerevisiae 균주들은 coenzyme $Q_{6}$의 생산능력을 회복하였으며 정상적인 성장률을 보였다. 또한 linoleic acid 및 linolenic acid와 같은 불포화지방산에 대한 낮은 감수성을 보였다. N. crassa의 COQ4 단백질은 39.7 kDa의 분자량을 갖는 347개의 아미노산으로 구성되어 있는 것으로 예상되며, S. cerevisiae의 Coq4p와 35%의 일치도 및 52%의 유사도를 보인다.
본인 등은 베타-1,3-글루칸 합성효소능이 낮은 Saccharomyces cerevisiae의 조건성 돌연변이주들을 분리하여 그 특성을 조사하였다. 이 돌연변이주들은 비허용온도인 37'C에서 삼투감수성을 나타나며, 세포벽 성분 중 알칼리 비용해성 글루칸의 함량이 낮았다. 베타-1,3-글루칸의 합성효소능의 결함원인을 조사한 결과, 효모의 베타-1,3-글루칸 합성효소를 구성하는 촉매성분(cataytic component)과 GTP-결합성분 두가지 중 촉매 성분의 결함이 이 돌연변이주들의 베타-1,3-글루칸 합성효소능의 손상원인인 것으로 추정되었다.
We displayed four types of Solanum nigrum metallothionein (SMT) for the first time on the surface of Saccharomyces cerevisiae using an α-agglutinin-based display system. The SMT genes were amplified by RT-PCR. The plasmid pYES2 was used to construct the expression vector. Transformed yeast strains were confirmed by PCR amplification and custom sequencing. Surface-expressed metallothioneins were indirectly indicated by the enhanced cadmium sorption capacity. Flame atomic absorption spectrophotometry was used to examine the concentration of Cd2+ in this study. The transformed yeast strains showed much higher resistance ability to Cd2+ compared with the control. Strikingly, their Cd2+ accumulation was almost twice as much as that of the wild-type yeast cells. Furthermore, surface-engineered yeast strains could effectively adsorb ultra-trace cadmium and accumulate Cd2+ under a wide range of pH levels, from 3 to 7, without disturbing the Cu2+ and Hg2+. Four types of surfaceengineered Saccharomyces cerevisiae strains were constructed and they could be used to purify Cd2+-contaminated water and adsorb ultra-trace cadmium effectively. The surface-engineered Saccharomyces cerevisiae strains would be useful tools for the bioremediation and biosorption of environmental cadmium contaminants.
Ergosterol을 생산하기 위하여 Saccharomyces sake KBA No. 6가 사용되었으며 ergosterol축적에 관여하는 각종 요인들이 검토되었다. 가장 효율적인 무기 질소원은 ammonium chloride이었으며, C/N 비율이 200/l이었을 경우 3.5%의 ergosterol이 세포 내에 축적되었다. Tween 80 0.2 %와 potassium nitrite 0.1 %를 동시에 사용하였을 경우, ergosterol 함량(%) 과 총 ergosterol량(mg/L)은 각각 56 %와 45% 증가하였다. 최적조건에서 ergosterol 함량은 1.73%에서 5.3%로 증가하였으며, 총 ergosterol량은 65.2 mg/L에서 135.15 mg/L로 증가하였다.
Jun, Kyung Ok;Yang, Eun Ji;Lee, Byeong Jeong;Park, Jeong Ro;Lee, Joon H.;Choi, Sang Ki
Molecules and Cells
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제25권2호
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pp.172-177
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2008
Eukaryotic translation initiation factor 5B (eIF5B) plays a role in recognition of the AUG codon in conjunction with translation factor eIF2, and promotes joining of the 60S ribosomal subunit. To see whether the eIF5B proteins of other organisms function in Saccharomyces cerevisiae, we cloned the corresponding genes from Oryza sativa, Arabidopsis thaliana, Aspergillus nidulans and Candida albican and expressed them under the control of the galactose-inducible GAL promoter in the $fun12{\Delta}$ strain of Saccharomyces cerevisiae. Expression of Candida albicans eIF5B complemented the slow-growth phenotype of the $fun12{\Delta}$ strain, but that of Aspergillus nidulance did not, despite the fact that its protein was expressed better than that of Candida albicans. The Arabidopsis thaliana protein was also not functional in Saccharomyces. These results reveal that the eIF5B in Candida albicans has a close functional relationship with that of Sacharomyces cerevisiae, as also shown by a phylogenetic analysis based on the amino acid sequences of the eIF5Bs.
대두유의 oligosaccharide를 분해할 수 있는 S. uvarum을 이용하여 L. acidophilus와 혼합배양을 행하여 당대사의 상호작용을 검토한 결과 대두유에 glucose, fructose, galactose 등의 단당류를 첨가하여 L. acidophilus 단독배양만으로도 높은 산생성을 보여주었으며 혼합배양의 경우도 단당류를 잘 이용하였다. Sucrose가 첨가된 배지에서의 L. acidophilus의 단독배양에서는 산생성이 낮았으나 혼합배양을 했을 때는 다른 단당류만큼 증가되었다. 배양시간에 다른 soywhey의 당변화를 검토한 결과 L. acidophilus 배양에서는 당변화가 거의 없었으나 S. uvarum은 sucrose, stachyose, raffinose와 같은 oligosaccharide를 분해하고 있어 혼합배양중 oligosaccharide로부터 분해된 단당류를 L. acidophilus가 젖산 발효에 이용하는 것으로 생각되었다.
To produce ginsenoside-Rg$_3$ enriched edible yeast, ginseng steaming effluent (GSE) was used for yeast cultivation in this study. Four kinds of edible yeasts were cultured in sterilized GSE (2% w/v, pH 6.5), without any nutrient, for 48 h at 30$^{\circ}C$, and their growth and ginsenoside compositions were determined. Among the yeasts, Saccharomyces cerevisiae showed the highest growth in the GSE medium. 267.1 mg of Saccharomyces cerevisiae biomass was produced from 1 g of GSE solid and ginsenoside-Rg$_3$ contents was determined with 0.033 mg. Saccharomyces cerevisiae also showed the best overall acceptability, with a herbal and fermentative flavor and a slightly bitter taste. From these data, we conclude that Saccharomyces cerevisiae is the excellent strain for production of ginsenoside-Rg$_3$ enriched edible yeast using GSE.
Saccharomyces cerevisiae의 RNAI 유전자의 온도 감수성 돌연변이 균주는 성장허용 온도인 23"C에서는 정상적인 성"J--을하나, 성 장억제 온도인 36°C에서는 tRNA, rRNA 그러고 mRNA 의 선우울질을을 핵내에 축적함으후써 성장을 못한다. 본 실 험에서는 complementation 에 의하여 RNAI 유전자를 클로녕하였으며 concomitant loss 실험에 의하여 이 유천자의 클로닝 을 확인하였다. 유전자의 위치를 확인한 결과 3.5kb의 Bgl II 조각내에 RNAI 유전자가 존재함을 알 수 있였으며, 2.1kb에 해당하는 BamH I -Bgl II 조각에서는 RNAI 유전지에 의한 complementation 능력이 상실되는 것으후 보아 RNAI 유전자 는 3.5kb의 BglIl 조각내에 포함되는 BamH 1 자리 주위에 결쳐 있픔을 알 수 있었다.
Saccharomyces cerevisiae 의 mother cell과 daughter cell 의 연결 부위의 원형질막 바로 안쪽에 존재하는 10-nm filament ring 은 세포형태 형성과정에 중요한 역할을 하리라 간주되나 그 명확한 생성기작과 기능은 밝혀지지 않았다. 본연구에서는 CDC12 유전자로부터 gene fusion technique 을 이용하여 CDC12 단백질을 만들고 이로부터 항체를 형성하였다. 이항체를 이용하여 10-nm filament ring 의 생성기작과 기능에 대하여 연구하였다. 그 결과 CDC12 단백질은 cell cycle 전주기동안 항상 정이되나 bud 가 나오기 바고 직전에 bud 가 나올 부위에 polymerization 되었다가 세포질분열 바로 직후에 unpolymerization 되며 cytoskeletal element 의 일종인 actin 과는 무관하게 행동하는 건이 밝혀졌다. 이러한 10-nm filament 는 bud 가 나올 부위의 올바른 선정과 세포질 분열에 중요한 역할을 하리라 간주된다.
Saccharomyces distaticus 의 glucoamylase 생성능을 증진시킬 목적으로 STA1 유전자를 YIp vector 를 이용하여 염색체에 도입해 주고자 하였다. STA1 유전자 5.8-Kb 를 YIp vector 에 재조합하여 YIp-STA 를 재작하고, S. diastaticus GMT-11 (a, ura 3, STA1) 을 숙주균주로 하여 염색체의 STA1 유전자 부위에 homologous recombination 되어 삽입하도록 형질전환을 실시하였다. 이렇게 하여 glucoamylase 생성능이 모균주에 비해 최대 6배까지 증대된 다양한 형질전환체들을 얻을 수 있었다. 그리고 glycoamylase 생성능이 증대된 형질전환체들의 염색체 DNA 를 분리하여 Southern hybridization 을 실시한 결과 YIp-STA 가 multi-copy integration 되었음을 확인하였고, 또한 도입해 준 YIp-STA 는 세포분열인 30세대기간 동안 계속되었어도 안정하게 유지되었음을 알았다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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