녹즙의 위생화와 저장.유통 안정성 확보를 위해 10kGy 감마선 조사된 녹즙(돌미나리, 당근, 케일 및 신선초)의 유전 독성학적 안전성 검증의 일환으로 Salmonella typhimurium 균주를 이용한 복귀돌연변이 실험과 Escherichia coli PQ37 균주를 이용한 SOS chromotest 및 CHL 세포를 이용한 염색체 이상시험을 수행하였다. 10 kGy로 감마선 조사된 녹즙은 위 세가지 in vitro 유전독성시험을 한 결과, 음성을 나타내었다. 결과적으로 10 kGy로 조사된 녹즙은 어떠한 돌연변이도 유발시키지 않았으며 감마선 조사된 녹즙이 in vitro에서 유전독성학적으로 안전하였다.
항돌연변이원성 물질을 탐색하기 위하여 $AFB_1$, B(a)P의 돌연변이원성에 대한 95종 생약재 열수 추출물의 효과를 SOS Chromotest를 이용하여 검색하였다. $AFB_1$의 변이원성을 26%이상 억제시킨 생약재는 익모초와 지실이었으며, B(a)P의 변이원성을 26%이상 억제시킨 생약재는 건부자 외 7종이었다. 두 종류의 변이원 모두에 대하여 억제활성을 나타낸 생약재는 시호, 현호색, 천마, 강활, 반하, 지실, 행인 및 숙지황이었다. $AFB_1$의 변이원성을 26%이상 상승시킨 생약재는 계피 외 45종이었으며, B(a)P의 변이원성을 26%이상 상승시킨 생약재는 연자육과 감국이었다. 생약재의 열수 추출물은 $AFB_1$으로 유도된 변이원성을 대부분 증가시켰으나 B(a)P의 변이원성은 증가시키지 않았다. 두 종류의 변이원성을 모두 뚜렷하게 증가시킨 생약재(감국, 계피, 향부자, 삼백피, 패장, 관동화, 적하수오, 측백옆)의 열수 추출물 그 자체는 변이원성을 나타내지 않았으므로 변이원성 유발을 도와주는 보돌연변이 활성을 나타냈다. Ames test에서도 강활, 정향, 황금을 제외한 생약제에서 SOS Chromotest와 유사한 결과가 얻어졌다.
The inhibitory effect of Coprinus comatus on the mutagenicity in Salmonella assay system and SOS chromotest were studied. In Ames test, the ethanol and water extracts and the cultured mycelia fractions of Coprinus comatus did not show any mutagenicity, but the Coprinus comatus ethanol extracts showed inhibitory effects of 8 0∼90% on the mutagenicity induced by indirect mutagen of benzo(a)pyrene(B(a)P) and aflatoxin B1(AFB1) in Salmonella typhimurium TA98 and TA100. The antimutagenic effect increased with increasing concentration of the ethanol extract toward N methyl N' nitro N nitrosoguanidine(MNNG). However, the water extracts inhibited about 40∼50% against direct and indirect mutagen. The cultured mycelial filtrate of Coprinus comatus, the fractionⅡ, showed antimutagenic effect of 90% on MNNG and 25∼50% on B(a)P and AFB1. In SOS chromotest, the ethanol extracts of Coprinus comatus showed antimutagenic effect of 65∼81% on SOS function induced by 4 NQO, and the cultured mycelia fractionⅡ showed low inhibitory effect of 20∼50%.
양송이(mushroom : Agaricus bisporus)로부터 polyphenol oxidase를 추출하여 4종류의 polyphenol 화합물과 반응시켜 양송이 효소 갈변반응생성물을 얻고, 이들 갈변물질들에 대하여 B. subtilis $H17(rec^+)$과 $M45(rec^-)$를 이용한 spore rec-assay, S. typhimurium TA98과 TA100을 이용한 Ames test 그리고 E. coli PQ37을 이용한 SOS chromotest를 실시하여 돌연변이원성 및 항돌연변이원성을 검토하였다. Spore rec-assay에서는 4가지 갈변물질 모두 B. subtilis $H17(rec^+)$과 $M45(rec^-)$ 두 균주에 대하여 생육저지대의 차이가 없었으므로 갈변물질 자체로서는 돌연변이원성이 없는 것으로 나타났으며, MNNG에 대한 항돌연변이원성 실험에서는 시료 모두 돌연변이에 대하여 억제활성을 나타내었으며 그중 HHQ-MEBRP는 가장 강한 억제활성을 나타내었다. Ames test에서는 4가지 시료 모두 돌연변이원성은 인정되지 않았으며, 항돌연변이원성 실험에서는 시료 $300\;{\mu}l$ 첨가시 $B({\alpha})P(20\;{\mu}g)$에 대하여 S. typhimurium TA98 및 TA100 두 균주에서 Ca-MEBRP와 HHQ-MEBRP는 $91{\sim}95%$, HCa-MEBRP와 Py-MEBRP는 $50{\sim}80%$의 억제활성을 나타내었다. $Trp-P-1(2\;{\mu}g)$에 대해서도 4가지 시료 모두 억제활성을 나타내었으며, HHQ-MEBRP는 TA98과 TA100 두 균주 모두에서 99%, HCa-MEBRP도 96%의 강한 억제활성을 나타내었다. SOS chromotest에서도 spore rec-assay와 Ames test에서와 같이 시료 자체의 돌연변이원성은 없는 것으로 나타났으며 4NQO와 MMC와 같은 돌연변이원물질에 의한 SOS-inducing function에 대하여 억제효과가 있었으므로 항돌연변이원성이 있음이 확인되었다.
Thirty six crude drug samples have been prepared from different parts of twenty five plants belonging to different families, and antimutangenic activities were studied by using SOS chromotest (E. coli PQ 37). The following crude extracts of PNG medicinal plants which had a appreciable antimutagenic activity against mitomycin C were: Artocarpus communis (stem bark), Cycas circinalis (leaves), Merremia peltata (leaves), Intsia palembanica (leaves), Annona muricata (stem bark), and Artocarpus altilis (root bark).
감잎 열수 추출물 및 감잎 탄닌의 항돌연변이 효과를 Ames test, spore rec assay 및 SOS chromotest 방법을 이용하여 검토하엿다. Salmonella typhimurium TA100에서 aflatoxin $B_{1}(AFB_{1})$, dimethyl-amino-biphenyl(DMAB)와 같은 간접 돌연변이워에 대해서 뿐만아니라 N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine(MNNG), 4-nitroquinoline-1-oxide(4-NQO)와 같은 직접 돌연변이원에 대해서도 강력한 항돌연변이성을 관찰할 수 있었다. Bacillus subtilis H17($rec^{+}$)와 M45($rec^{-$)를 사용한 spore rec assay에서도 감잎 탄닌은 MNNG에 대한 강한 항돌연변이 효과를 나타내었고, Escherichia coli PQ37을 사용한 SOS chromotest에서도 4-NQO의 돌연변이성이 크게 저해되었다. 또한 감잎차 부터 탄닌을 추출하여 이미 그 효과가 알려진 녹차 탄닌과 함께 항돌연변이 효과를 살펴본 결과 시료의 농도에 비례해서 녹차탄니과 비슷한 수준으로 현저한 항돌연변이 효과를 나타내었다. 이들 항돌연변이 실험계에서 감잎 탄닌이 감잎 열수 추출물에 비해 활성이 크게 나타났다.
키토산의 in vitro 돌연변이 억제활성을 Salmonella typhimurium reversion assay와 SOS chromotest 이용하여 살펴보았다. S. typhimurium에 의한 시험된 간접변이원 Trp-P-2에 대해서 0.1-1.0 mg/plate의 chitosan농도로 시험하였을 때, 24-65%의 돌연변이 억제활성을 나타내었다(p<0.01). Chitosan농도 0.1-0.5 mg/plate 범위에서는 용량-반응(dose-responese)관계를 나타내면서 저해효과를 나타내었으며, 0.5 mg/plate이상의 농도에서는 오히려 저해효과가 감소하는 경향이었다. 반면, 직접변이원인 SA 및 2-NF로 유도된 돌연변이에 대해서는 시험한 어느 농도에서는 chitosan에 의한 돌연변이 억제효과가 나타나지 않았다. Chitosan은 직접변이원인 4-NQO에 의한 SOS 유도에 대해 chitosan농도가 0.15 mg/assay 및 0.20 mg/assay일 때 4-NQO에 의해 유도된 유도지수(induction factor) 8.290을 4.226및 4.516으로 낮추어 46-49%의 저해활성을 나타내었다. 간접변이원인 Trp-P-2에 의한 SOS 유도에 대한 chitiosan의 억제효과는 시험한 chitosan의 농도범위에서 약 9-39%의 저해활성을 나타내었으며, chitosan농도가 0.1 mg/assay이 경우를 제외하고는 chitosan농도 증가에 따라 비례적으로 SOS유도 저해활성이 나타났다. Trp-P-2d 의해 DNA 손상을 유도한 다음 chitosan의 세포내 역제(bio-antimutagenicity) 활성을 살펴 본 결과, 저농도에서는 세포의 억제(desmutagenicity) 특성을, 0.75-1.0 mg/plate의 비교적 고농도에서는 세포내 억제특성을 나타내었다.
In vitro antimutagenic activity of methanol extract from brrwn rice and its physico-chemical characteristics were investigated using Salmonella typhimurium reversion assay and SOS chromotest. Methanol extracts of brown rice were not mutagenic compared with direct and indirect, mutagenicities of 4NQO (4-nitroquinoline oxide), 2NF(2-nitrofluorene), Trp-p-1(3-Amino-1,4-dimethyl-5H-pyrido-[4,3-b]indole), and Trp-p-2(3-Amino-1-methy-5H-pyrido-[4,3-b]indole). Antimutagenic activity against the indirect mutagenicties induced by Trp-p-1, Trp-p-2 and AFB1 (aflatoxin B1) was found in methanol extract. Even though antimutagenic activity showed dose-dependent, it remained constant at inhibition rate ranging 60~90% when the concentration was abov 3mg/plate in the S. typhimurium reversion assay and 0.2~0.6 mg/assay in the SOS chromotest. The antimutagenic activity of the methanol extracts was stable at various pH (2, 7 and 10), temperatures (60, 80 and 10$0^{\circ}C$)and heation times (2, 4, 6, 8, 10 min at 10$0^{\circ}C$).
Antimutagenic effects of 5 kinds of kochujang(Korean red pepper soybean paste) samples compared with doenjang(Korean soy paste) were studied using the Ames test with Salmonella typhimurium TA100 and the SOS chromotest, with E. Coli PQ37. Th eantimutatenic effects of methanol extracts from red pepper powder and meju(fermented soybean) powder, the major ingredients of the kochujang,were also evaluated for the mutagenicity of aflatoxin B1 (AFB1) in the Ames assay. The methanol extracts from the kochujang samples showed lower antimutagenicities than those of doenjang against AFB1 and N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine (MNNG) in the Ames assay. Traditional kochujang I and II exhibited strong antimutagenic activity against AFB1 and MNNG. The traditional kochujang samples against MNNG were aslo observed in the SOS chromotest system with the same fashions as shown in the Ames mutagenicity test. The methanol extracts from meju powder had the strongest inhibitory effects on mutabenicity induced by AFB1, however, those form red pepper powder showed lower inhibition rate than kochujang. These results suggest that traditional kochujang exhibit higher antimutagenic acitivity than the commercial variety, and that meju powder seems to be one of the major antimutagenic components in kochujang.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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