An antifungal Pseudomonas stutzeri YPL-1 produced extracellular chitinase and .betha.-1, 3-glucanase that were key enzymes in the decomposition of fungal hyphal walls. These lytic extracellular enzymes markedly inhibited mycelial growth of the phytopathogenic fungus Fusarium solani. A chitinase from P. stutzeri YPL-1 inhibited fungal mycelial growth by 87%, whereas a .betha.-1, 3-glucanase from the bacterium inhibited growth by 53%. Furthermore, co-operative action of the enzymes synergistically inhibited 95% of the fungal growth. The lytic enzymes caused absnormal swelling and retreating on the fungal hyphal walls in a dual cultures. Scanning electron microscopy clearly showed hyphal degradation of F. solani in the regions interacting with P. stutzeri YPL-1. In an in vivo pot test, P. stutzeri YPL-1 proved to have biocontrol ability as a powerful agent in controlling plant disease. Planting of kidney bean (Phaseolus vulgaris L.) seedlings with the bacterial suspension in F. solani-infested soil significantly suppressed the development of fusarial root-rot. The characteristics of a crude preparation of .betha.-1, 3-glucanase produced from P. stutzeri YPL-1 were investigated. The bacterium detected after 2 hr of incubation. The enzyme had optimum temperature and pH of 40.deg.C and pH 5.5, respectively. The enzyme was stable in the pH range of 4.5 to 7.0 and at temperatures below 40.deg.C, with a half-life of 40 min at 60.deg.C.
A greenhouse experiment was conducted for evaluation of ecological effects of transgenic melon plants in the rhizospheric soil in terms of soil properties, enzyme activities and microbial communities. Organic matter content of soil under transgenic melon plants was significantly higher than that of soil with non-transgenic melon plants. Significant variations were observed in organic matter, total P and K in soil cultivation with transgenic melon plants. There were also significant variations in the total numbers of colony forming units of fungi, actinomycetes and bacteria between soils treated with transgenic and non-transgenic melon plants. Transgenic and non-transgenic melon significantly enhanced several enzymes activities including urease, acid phosphatase, alkalin phosphatase, arysulphtase, ${\beta}$ glucosidase, dehydrogenase, protease and catalase. Soil polyphenoloxidase activity of $T_1$ transgenic melon was lower than that of $T_0$ transgenic melon and a non-melon plant during the same period. The first generation transgenic melon plants ($T_0$) showed significantly greater (p<0.05) effect on the activitiy of arylsulfatase, which increased from $2.540{\times}10^6CFU\;g^{-1}$ (control) to $19.860{\times}10^6CFU\;g^{-1}$ ($T_0$). These results clearly indicated that transgenic melon might change microbial communities, enzyme activities and soil chemical properties.
Current fuel ethanol research and development deals with process engineering trends for improving biotechnological production of ethanol. Recently, a large amount of studies regarding the utilization of lignocellulosic biomass as a good feedstock for producing fuel ethanol is being carried out worldwide. The plant biomass is mainly composed of cellulose, hemicellulose and lignin. The main challenge in the conversion of biomass into ethanol is the complex, rigid and harsh structures which require efficient process and cost effective to break down. The isolation of microorganisms is one of the means for obtaining enzymes with properties suitable for industrial applications. For these reasons, crude cultures containing cellulosic biomass degrading microorganisms were isolated from rice field soil, cow farm soil and rotten rice straw from cow farm. Carboxymethyl cellulose (CMC), xylan and Avicel (microcrystalline cellulose) degradation zone of clearance on agar platefrom rice field soil resulted approximately at 25 mm, 24 mm and 22 mm respectively. As for cow farm soil, CMC, xylan and Avicel degradation clearancezone on agar plate resulted around at 24mm, 23mm and 21 mm respectively. Rotten rice straw from cow farm also resulted for CMC, xylan and Avicel degradation zone almost at 24 mm, 23 mm and 22 mm respectively. The objective of this study is to isolatebiomass degrading microbial strains having good efficiency in cellulose hydrolysis and observed the effects of different substrates (CMC, xylan and Avicel) on the production of cellulase enzymes (endo-glucanase, exo-glucanase, cellobiase, xylanase and avicelase) for producing low cost biofuel from cellulosic materials.
In this paper, we reviewed the degradation factors of diazinon which was known to be easily degraded by soil microorganisms and lost of its activity. Under submerged soil condition, the contribution of microorganisms to diazinon degradation was about 40% and these microorganisms preferred soil humus as substrates to diazinon itself. The effect of monooxygenase activity in submerged soil was more important than esterase activity on diazinon degradation and these enzymes were inhibited by several chemicals such as piperonyl butoxide(PBO), EPN and tricyclazole. From these results, new formulation type of diazinon (PBO and triphenyl phosphate were added to commercial diazinon formulation by 0.1% respectively.) and diazinon mixture formulation (diazinon was mixed with EPN, tricyclazole and carbofuran in equal amount) were prepared. The new formulation type of diazinon showed better insecticidal activity by 12% and more delayed diazinon degradation in ten days than commercial diazinon.
Soil microbes perform crucial roles in the nutrient cycles of forest ecosystems, by effecting the decomposition of organic matter. Enzyme activities have been used to evaluate decomposition rates, as well as microbial activities. The principal objectives of this study were to determine the activities of different soil enzymes, to compare enzyme activities at different elevations, and to elucidate the most important controlling variables for enzyme activities. We conducted a field survey at three sites in Mt. Jumbong on a monthly basis from May, 2004 to September, 2005. Enzyme activities did not change substantially over different seasons. However, the spatial differences were distinct; the lowest elevation site evidenced the lowest levels of enzyme activity. Soils at the lowest elevation were nutrient-depleted soils, and enzyme activities appeared to be affected by precipitation and temperature. However, enzyme activities in fertile soils at high elevations were associated with nutrients and organic matter. The enzyme activities detected in this study differed significantly at the three elevations, and their controlling variables also evidenced different factors.
Biomass is originally photosynthesized from inorgainic compounds such as $CO_2$, minerals, water and solar energy. Recent studies have shown that anaerobic bacteria have the ability to convert recalcitrant biomass such as cellullosic or chitinoic materials to useful compounds. The biomass containing agricultural waste, unutilized wood and other garbage is expected to utilize as feed, food and fuel by microbial degradation and other metabolic functions. In this study we isolated several anaerobic, cellulolytic and chitinolytic bacteria from rumen fluid, compost and soil to study their related enzymes and genes. The anaerobic and cellulolytic bacteria, Clostridium thermocellum, Clostridium stercorarium, and Clostridium josui, were isolated from compost and the chitinolytic Clostridium paraputrificum from beach soil and Ruminococcus albus was isolated from cow rumen. After isolation, novel cellulase and xylanase genes from these anaerobes were cloned and expressed in Escherichia coli. The properties of the cloned enzymes showed that some of them were the components of the enzyme (cellulase) complex, i.e., cellulosome, which is known to form complexes by binding cohesin domains on the cellulase integrating protein (Cip: or core protein) and dockerin domains on the enzymes. Several dockerin and cohesin polypeptides were independently produced by E. coli and their binding properties were specified with BIAcore by measuring surface plasmon resonance. Three pairs of cohesin-dockerin with differing binding specificities were selected. Two of their genes encoding their respective cohesin polypeptides were combined to one gene and expressed in E. coli as a chimeric core protein, on which two dockerin-dehydrogenase chimeras, the dockerin-formaldehyde dehydrogenase and the dockerin-NADH dehydrogenase are planning to bind for catalyzing $CO_2$ reduction to formic acid by feeding NADH. This reaction may represent a novel strategy for the reduction of the green house gases. Enzymes from the anaerobes were also expressed in tobacco and rice plants. The activity of a xylanase from C. stercorarium was detected in leaves, stems, and rice grain under the control of CaMV35S promoter. The digestibility of transgenic rice leaves in goat rumen was slightly accelerated. C. paraputrificum was found to solubilize shrimp shells and chitin to generate hydrogen gas. Hydrogen productivity (1.7 mol $H_2/mol$ glucos) of the organism was improved up to 1.8 times by additional expression of the own hydrogenase gene in C. paraputrficum using a modified vector of Clostridiu, perfringens. The hydrygen producing microflora from soil, garbage and dried pelletted garbage, known as refuse derived fuel(RDF), were also found to be effective in converting biomass waste to hydrogen gas.
Kim, Kye-Hoon;Kim, Young-Nam;Lim, Ga-Hee;Lee, Mi-Na;Jung, Yoon-Hwa
한국토양비료학회지
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제44권1호
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pp.53-57
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2011
The MuSI is known as a multiple stress resistant gene with several lines. A previous study using RT-PCR showed that the expression of MuSI gene in tobacco plant induced its tolerance to Cd stress. This study was conducted to examine the enhanced Cd tolerance of the MuSI transgenic tobacco plant through germination test and to understand the role of the involved antioxidant enzymes for the exhibited tolerance. Germination rate of MuSI transgenic tobacco was more than 10% higher than that of wild-type tobacco, and seedlings of MuSI transgenic tobacco grew up to 1.6 times larger and greener than seedlings of wild-type tobacco at 200 and 300 ${\mu}M$ Cd. From the third to the fifth day, CAT activities at 100 and 200 ${\mu}M$ Cd and APX activities at 100, 200 and 300 ${\mu}M$ Cd of MuSI transgenic tobacco were up to two times higher than those of wild-type tobacco. MuSI gene is shown to enhance the activities of antioxidant enzymes resulting in higher tolerance to oxidative stress compared with the control plant.
The feasibility of stimulating in situ aerobic cometabolic activity of indigenous microorganisms was investigated in a trichloroethene(TCE)-contaminated aquifer, A series of single-well natural drift tests (SWNDT) was conducted by injecting site groundwater amended with a bromide tracer and combinations of toluene, oxygen, nitrate, ethylene and TCE into an existing monitoring well and by sampling the same well over time. Transformation of ethylene, a surrogate of overall TCE transformation activity, was also observed, and its transformation results in the production of ethylene oxide, suggesting that some tolune-oxidizing microorganisms stimulated may express a monooxygenase enzymes. Also in situ transformation of TCE was confirmed by dilution-adjusted data analysis developed in this study. These results indicate that, in this environment, toluene and oxygen additions stimulated the growth and aerobic cometabolic activity of indigenous microorganisms expressing monooxygenase enzymes and that these are responsible for observed toluene utilization and cometabolism of ethylene and TCE. The simple, low-cost field test method provides an effective method for conducting rapid field assessments and pilot testing of aerobic cometabolism of TCE, which has previously hindered application of this technology to groundwater remediation.
대두에서 한발과 담수와 같은 수분스트레스시 항산화제의 함량변화와 항산화 효소의 활성도 턴화를 확인한 결과는 다음과 같다. 대두에서 한발과 담수 수분스트레스 처리시 두 품종모두 수분 함량과 가용성 단백질 함량이 감소하는 미성숙 노화를 나타내었으며 스트레스의 회복시는 회복되었다. 수분스트레스시 APOX, GR의 효소활성은 감소하였고, 스트레스의 회복시 효소활성이 회복되었다. MDHAR 효소 활성은 기간별 처리시 품종별 차이는 있었지만 증가하는 경향을 나타내었고, 회복기를 주었을 때 조금 감소하였지만 일정수준을 유지하였다. DHAR의 효소활성은 기간별 처리시와 회복시 모두 증가하는 경향을 나타내었다. 3일간의 회복기를 주었을 때 효소활성변화는 스트레스시의 결과와 비슷하였으나, 처리기간별 수분 스트레스시 은하콩의 경우 MDHAR과 DHAR의 효소활성이 모두 증가하였다. 아스코브산의 함량온수분 스트레스 처리 기간별과 수분 스트레스 회복시 모두 MDHAR과 DHAR의 효소활성과 상호관련이 높았고, 환원형 글루타치온의 함량은 수분 스트레스 처리 기간별에서는 GR의 활성과 관련이 없었으나 수분 스트레스 회복기를 주었을 때 상호관련이 높게 나타났다.
This study was done to know a kind and change (transition) of enzymes produceed by Streptomyces halstedii ssp. scabies SA1-27 and Streptomyces violaceusinger C1-6 which showed good lignolytic activity and a good decolorization ratio of remazol brilliant blue R(RBBR) dye. These strains were isolated from soil and identified by the author. The basal medium containg 0.2% glucose was used to measure enzyme activity, Lignin peroxidase 1 (Lip 1) was measured by the methods of Choi, and Bourbonnais and Paice. Lignin peroxidase 2 (Lip 2) was measured by the methods of Ishida et al and Ramachandra et al using 2.4-dichlorophenol(2.4 DCP), manganese peroxidase(Mnp), veratryl alcohol oxidase (VAO), and laccase. They were measured by each of the methods of Choi and Paszczynski et al, and Bourbonnais and Paice, and De Jong et al. In the results, the kind of enzymes produced by Streptomyces halstedii ssp. scabies SA1-27 were Lip 1, Lip 2, VAO, and laccase, and their activities indicated the highest value as each 4.95 nmol/mg protein, $8.45({\times}100^{-3})unit$, 10.25 nmol/mg protein, 9.20 nmol/mg protein on the sixth day of the culture and decreased gradually over time. The kind of enzymes produced by Streptomyces violaceusinger C1-6 were Lip 1, Lip 2, Mnp, VAO, and laccase, and their activities indicated the highest value as each 4.90 nmol/mg protein, $13.85({\times}100^{-3})unit$, 3.10 nmol/mg protein, 11.30 nmol/mg protein, 4.45 nmol/mg protein on the sixth day of the culture and decreased gradually over time. Consequently, the author knew the fact that there were few differences in the kind and quantity of enzymes produced by the two Streptomyces strains, but all enzyme activities indicated the highest value on the sixth day of the culture and decreased gradually over time.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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