With the increasing demand for enzymes in industrial applications there is a growing need to easily produce industrially important microbial enzymes. This study was carried out to screen the indigenous refinery bacterial isolates for their production of two industrially important enzymes i.e. lipase and protease. A total of 15 bacterial strains were isolated using Soil Extract Agar media from the oil-contaminated environment and one was shown to produce high quality lipase and protease enzymes. The culture conditions (culture duration, temperature, source of nitrogen, carbon, and pH) were optimized to produce the optimum amount of both the lipase (37.6 ± 0.2 Uml-1) and the protease (41 ± 0.4 Uml-1) from this isolate. Productivity of both enzymes was shown to be maximized at pH 7.5 in a medium containing yeast extract and peptone as nitrogen sources and sucrose and galactose as carbon sources when incubated at 35 ± 1℃ for 48 h. Bacterial strain SAB06 was identified as Bacillus licheniformis (MT250345) based on biochemical, morphological, and molecular characteristics. Further studies are required to evaluate and optimize the purification and characterization of these enzymes before they can be recommended for industrial or environmental applications.
Cellulolytic enzymes were prepared from alkaline resistant microorganisms which were newly screened from calcic soil. Characteristics of enzymes and enzymatic deinking efficiency of wastepaper were investigated. The results were summarized as fellows: 1. The recovery rate of crude enzyme was 93.7% in Bio-B and 57.4% in Bio-F. 2. The protein content in crude enzymes was lowest and the thermal stability of crude enzymes was highest in Bio-F. 3. The brightness gain of Bio-F deinked pulp was best in ONP and Bio-B deinked pulp was best in MOW. 4. The reject yield was increased with enzymatic deinking flotation process. 5. The residual ink area of paper was increased with enzymatic deinking and large size of ink particles were remained in paper.
A wetland soil was sterilised by two methods and changes in microbial enzyme activities were assessed. The short-term effects were determined by toluene addition, while the longer-term effects of elimination was monitored by ${\gamma}$-radiation. The changes in ${\beta}$- glucosidase, ${\beta}$-xylosidase, cellobiohydrolase, phosphatase, arylsulphatase, and N-acetylglucosaminidase activities were determined by using methylumbelliferyl model substrates and comparing with the activities of control samples. Toluene addition induced different responses of enzymes. For example, phosphatase activity increased by the treatment while ${\beta}$-glucosidase and arylsulphatase activities decreased. In contrast, ${\gamma}$-radiation decreased all enzyme activities compared to control by 40-80%. The overall results of the toluene and ${\gamma}$-radiation experiments indicate that the large amounts of enzymes are stabilised outside of living cells, at least in the short term, but that the persistence of enzymes is maintained by de-novo synthesis of microbes.
The processes to determine the composition, dynamics, and activity of infection mechanisms by the rhizosphere microflora have attracted the interest of scientists from multiple disciplines although considerable progress of the infection pathways and plant-pathogen interactions by soil borne fungal pathogens have been made. Soilborne pathogens are confined within a three-dimensional matrix of mineral soil particles, pores, organic matter in various stages of decomposition and a biological component. Among the physical and chemical properties of soils soil texture and matric water potential may be the two most important factors that determine spread exudates by soil borne fungal pathogens, based on the size of the soil pores. Pathogenic invasion of plant roots involves complex molecular mechanisms which occur in the diffuse interface between the root and the soil created by root exudates. The initial infection by soilborne pathogens can be caused by enzymes which breakdown cell wall layers to penetrate the plant cell wall for the fungus. However, the fate and mobility of the exudates are less well understood. Therefore, it needs to develop methods to control disease caused by enzymes produced by the soilborne pathogens by verifying many other possible pathways and mechanisms of infection processes occurring in soils.
Phytoremediation, using plants to remediate toxic organic and inorganic pollutants in contaminated soils, is an emerging technology for environmental cleanup. Three strategies of this technology are applicable to the remediation of toxic heavy metals, radionuclides, and toxic organic pollutants: They are (1) phytoextraction, in which plants anumulate the contaminants and are harvested for the downstream processing; (2) phytodegradation, in which plant-released enzymes or plant-associated microorganisms convert toxic pollutants into non-toxic materials; and (3) phytostabilization, in which toxic pollutants are precipitated from solution or absorbed in either the plant tissue or the soil matrix. Phytoremediation is more effective and less expensive than other current treatment technologies.
In this paper, fractional factorial screening design (FFSD) and central composition design (CCD) were used to optimize the medium components for producing chitinase and gelatinase by Lysobacter capsici YS1215. Crab shell powder, nutrient broth and gelatin were proved to have significant effects on chitinase and gelatinase activity by FFSD first. An optimal medium was obtained by using a three factor CCD, which consisted of nutrient broth of $2.0gL^{-1}$, crab shell powder of $2.0gL^{-1}$ and gelatin of $1.0gL^{-1}$, respectively with the highest chitinase activity ($3.34UmL^{-1}$) and gelatinase activity ($14.15UmL^{-1}$). This value was 3.76 and 1.11 fold of the chitinase and gelatinase activity, respectively, compared to the lowest productive medium in the design matrix. In investigating potential of these enzymes partially purified from L. capsici YS1215 for biotechnological use, the crude enzymes was found to be inhibition against pathogenic fungal mycelia: Colletotrichum gleosporioides, Phytophthora capsici, and Rhizoctonia solani. In this study, we demonstrated the optimal medium for producing the chitinolytic and gelatinolytic enzymes by the strain YS1215 and the role of their enzymes that may be useful for further development of a biotechnological use and agricultural use for biological control of phytopathogenic fungi.
A newly isolated active producer of raw-starch-digesting amyloytic enzymes, Rhizopus microsporus var. chinensis CICIM-CU F0088, was screened and identified by morphological characteristics and molecular phylogenetic analyses. This fungus was isolated from the soil of Chinese glue pudding mill, and produced high levels of amylolytic activity under solid-state fermentation with supplementation of starch and wheat bran. Results of thin-layer chromatography showed there are two kinds of amyloytic enzymes formed by this strain, including one $\alpha$-amylase and two glucoamylases. It was found in the electron microscope experiments that the two glucoamylases can digest raw corn starch and have an optimal temperature of $70^{\circ}C$. These results signified that amyloytic enzymes secreted by strain Rhizopus microsporus var. chinensis CICIM-CU F0088 were types of thermostable amyloytic enzymes and able to digest raw corn starch.
Identification of the biochemical metabolic pathway for lignin decomposition and the responsible degradative enzymes is needed for the effective biotechnological valorization of lignin to renewable chemical products. In this study, we investigated the decomposition of kraft lignin by the soil bacterium Pseudomonas kribbensis CHA-19, a strain that can utilize kraft lignin and its main degradation metabolite, vanillic acid, as growth substrates. Gel permeation chromatography revealed that CHA-19 decomposed polymeric lignin and degraded dehydrodivanillin (a representative lignin model compound); however, the degradative enzyme(s) and mechanism were not identified. Quantitative polymerase chain reaction with mRNAs from CHA-19 cells induced in the presence of lignin showed that the putative genes coding for two laccase-like multicopper oxidases (LMCOs) and three dye-decolorizing peroxidases (DyPs) were upregulated by 2.0- to 7.9-fold compared with glucose-induced cells, which indicates possible cooperation with multiple enzymes for lignin decomposition. Computational homology analysis of the protein sequences of LMCOs and DyPs also predicted their roles in lignin decomposition. Based on the above data, CHA-19 appears to initiate oxidative lignin decomposition using multifunctional LMCOs and DyPs, producing smaller metabolites such as vanillic acid, which is further degraded via ortho- and meta-ring cleavage pathways. This study not only helps to better understand the role of bacteria in lignin decomposition and thus in terrestrial ecosystems, but also expands the biocatalytic toolbox with new bacterial cells and their degradative enzymes for lignin valorization.
The United Nations project the world population to reach 10 billion by the year 2057. To increase the food of the ever-increasing world population, agrochemicals are indispensable tools to the boon in agriculture production. These agrochemicals are a serious threat to the health of humans, plants, and animals. Agrochemicals are ultimately reached to the main reservoir/sink such as soil and contaminating the groundwater, disturb the soil health and in turn a serious threat to biogeochemical cycling and the entire biosphere. Among agrochemicals, quinalphosis one of the most repeatedly and widely used insecticides in the control of a wide range of pests that attack various crops. Quinalphos is shown to be primarily toxic in organisms by acetylcholinesterase enzyme action. Hydrolysis of quinalphos produces amajor metabolite 2-hydroxyquinoxaline (2-HQ), which has shown secondary toxicity in organisms. 2-HQ is reported to be mutagenic, carcinogenic, growth inhibition and induce oxidative stress in organisms. Quinoline is a heterocyclic compound and structural resemblance of 2-HQ with minor changes, but its degradation studies are enormous compared to the 2-HQ compound. Biotic factors in fate and behavior of 2-HQ in the environment are least studied. 2-HQ interactions with soil enzymes are vary from soil to soil. Based on the toxicity of 2-HQ in our stockpile we need to isolate a handful of microorganisms to treat this persistent metabolite and also other metabolites/compounds.This brief review will be significant from the point of biological and environmental safety.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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