• Biotechnology and Bioprocess Engineering:BBE
• /
• 제6권2호
• /
• pp.117-127
• /
• 2001

The high-level expression of a human single chain urokinase-type plasminogen activator (scu-PA) was achieved by employing a methotrexate (MTX)-dependent gene amplification system in Chinese hamster ovary (CHO) cells. By cotransfecting and coamplifying a scu-PA expression plasmid and dihydrofolate reductase (DHFR) minigene, several scu-PA expressing CHO cell lines were selected and gene-amplified. These recombinant cell lines, NGpUKs, secreted a completely processed scu-PA of 54 kD and up to 60mg/L was accumulated in the culture medium when they were adapted to an optimal MTX concentration. Over 95% of the scu-PA expressed was secreted in the culture medium and identified having the proper function of a plasminogen activator when activated by plasmin. Based on a genomic Southern analysis, a representative subclone, MGpUK-5, exhibited MTX-dependent scu-PA gene amplification, plus the initial single-copy gene of scu-PA eventually turned into about 150 copies of the amplified gene of scu-PA after gradual adaptation to 2.0$\mu$M of MTX. Meanwhile, the transcripts kof the scu-PA gene increased, although -early saturation of transcription was identified at 0.1$\mu$M of MTX. The scu-PA production by the MGpUK-5 subclone also increased relative to the gene amplification and increased transcripts, however, the relationship was not linearly proportional. Accordingly, since the MGpUK cell lines expressed elevated levels of enzymatically active scu-PA, these cell lines could be applied to the largescale production of scu-PA.

• 한국토양비료학회지
• /
• 제6권4호
• /
• pp.213-219
• /
• 1973

국산(國産)(진해화학제조(鎭海化學製造)) 유황(硫黃)입힌 요소(尿素)(SCU)를 TVA제(製) SCU와 METAP 및 요소분시(尿素分施)와 비교(比較)하여 IR667 (Suwon 213)의 수량(收量)과 질소영양(窒素營養)에 대(對)한 효과(效果)를 조기(早期) 및 적기재배(適期栽培)의 포장시험(圃場試驗)으로 조사(調査)하였다. 1. 국산(國産) SCU는 초기(初期) 다량(多量)의 질소용출(窒素溶出)로 요소분시(尿素分施)에 비(比)하여 수풍(收豊)이나 질소영양면(窒素營養面)에서 우월(優越)한 점(點)이 별로 없었다. 2. 요소분시(尿素分施)보다 약(約) 10%의 증수(增收)를 보인 TVA제(製) SCU는 생육전기간(生育全期間)을 통(通)해 가장 높은 고중(藁中) 질소농도(窒素濃度)를 보이며 건물생산량(乾物生産量) 또는 질소흡수집적곡선(窒素吸收集積曲線)이 가장 균형적(均衡的)인 것이었다. 3. TVA제(製) SCU는 유수형성기(幼穗形成期)에 질소농도(窒素濃度)가 특(特)히 높으며 질소농도(窒素濃度)는 $m^2$ 당립수(當粒數)와 고도(高度)로 정비례(正比例) 하였다. 4. TVA제(製) SCU만이 유수형성기(幼穗形成期)에 질소흡수속도(窒素吸收速度)가 최고(最高)에 오는 일봉식(一峰式) 흡수속도양상(吸收速度樣相)을 보였다(기타(其他)는 이봉식(二峰式)) 5. 적기재배(適期栽培)에서 요소분시(尿素分施)의 질소이용율(窒素利用率)(37.1%)보다 TVA제(製) SCU는 높았으나 (46.0%) 국산(國産) SCU는 큰 차이가 없었으며 (38.9%) 조기재배(早期栽培)는 완효성(緩效性)의 질소이용율(窒素利用率)이 요소분시(尿素分施)보다 높았다. 6. TVA제(製) SCU는 출수후(出穗後)에 질소부족(窒素不足)현상을 보여주므로 용출양상(溶出樣相)이 다른 여러가지 완효성비료(緩效性肥料)를 혼합시비(混合施肥)하는 것이 가장 현상적(現想的)일 것으로 보였다.

• KSBB Journal
• /
• 제9권1호
• /
• pp.48-54
• /
• 1994

HEK 세포 배양액 중에 존재하는 scu-PA와 tc-PA의 보다 정확한 측정을 위해 fibrin plate법과 기존의 amidolytic 방법을 변형시킨 측정법을 이용했다. 1%의 저혈청 배지를 이용한 T-flask 배양에서 $1.65{\times}10^6$(viable cells/ml)의 최대 세포수에 도달하여 1670(IU/ml)의 scu-PA 생산량을 보였으며 평균 10% 미만이 변환율을 보였다. 또한 Spinner vessel에서의 회분배양시 최대 세포수가 $4.43{\times}10^6(total cells/ml)$ 와 1560(IU/ml)의 scu-PA 생산량을 나타냈으며 평균 11.4%의 변환율을 보였다. 연속배양에서는 0.449(1/day)의 비생육속도와 $3.13{\times}10^{-4}(IU/cell)$의 비생산속도를 보였으며 평균 10.18% 정도의 전환율을 보였다. 이는 회분식 및 유가식 배양 결과와 큰 차이가 없으며 배양공정에 관계없이 약 90% 이상의 회수율이 가능하다는 것을 의미한다.

• 생물환경조절학회지
• /
• 제6권1호
• /
• pp.1-14
• /
• 1997

환경 보전에 대한 필요성이 대두되면서 비순환식 양액재배 시스템이 순환식 양액재배 시스템으로 전환됨에 따라 순환식 양액재배 시스템에 적합한 배양액의 개발이 시급히 요구되고 있다. 따라서, 순환식 고형배지경에 적합한 배양액을 개발하기 위하여 본 실험을 수행하였으며 그 결과는 다음과 같다. 1. 오이 순환식 고형배지경에 적합한 배양액 조성 및 농도를 알아보기 위하여 일본 야채 시험장 표준액을 1/2 배액, 1 배액 및 3/2 배액으로 조제하여 오이를 재배한 결과, 오이의 초장은 배양액농도를 높임에 따라 짧아졌으며 엽장, 엽폭 및 처리 농도간에 차이가 없었고 상품과수와 상품수량은 1 배액에서 가장 많았다. 양수분흡수율(n/w)에 따라 개발된 오이 순환식 고형배지경에 적합한 배양액 조성(SCU 배양액)은 영양 생장기 동안 N 11.4, P 3.3, K 6.0, Ca 4.5 및 Mg 3.5 me.$\ell$$^{-1}$, 생식 생장기 동안 N 10.4, P 3.3, K 5.0, Ca 4.5 및 Mg 3.5 me.$\ell$$^{-1}$이었다. 2. 순환식 배양액으로 개발된 SCU 배양액의 적합성을 검정하기 위하여 산기 배양액, PTG 배양액 및 SCU 배양액에서 오이를 재배한 결과, 근권내 EC와 pH는 모든 배양액에서 생육기간 동안 안정적이었다. 배양액 내의 다량원소를 측정한 결과, 산기 1 배액, PTG 1 배액, SCU 1/2 배액, SCU 1 배액 및 SCU 3/2 배액 모두 오이의 생육이 진전됨에 따라 배양액내 N, P 및 K 농도는 감소하였으며 Ca 농도는 완만하게 상승하였다. Mg는 뚜렷한 경향을 보이지 않았다. 오이의 광합성속도는 SCU 1 배액, SCU 3/2 배액 및 산기 1 배액에서 높았다. 생육은 SCU 1/2 배액에서 가장 낮았고 SCU 1 배액과 SCU 3/2 배액, 산기 1 배액 및 PTG 1 배액에서는 처리간에 차이를 보이지 않았다. 엽내 N, P, K 및 Mg 함량은 SCU 1 배액, 산기 1 배액 및 PTG 1 배액에서 적정 수준을 나타냈고 엽내 Ca 함량은 PTG 1 배액에서 낮았다. 총수량은 SCU 1 배액에서 가장 높았고 다음으로 산기 1 배액에서 높았다. 따라서 본 실험에서 개발된 배양액(SCU 배양액)은 오이 순환식 고형배지경에 적합한 배양액이라 할 수 있다.

• 생물환경조절학회지
• /
• 제6권4호
• /
• pp.299-309
• /
• 1997

본 실험은 수경재배에서 딜의 양수분 흡수 패턴을 밝히고 생육과 환경특성에 적합한 배양액을 개발하여 실제 재배에 응용하고자 수행하였다. 이를 위해 딜의 양분 홉수율에 의한 배양액을 조성하였으며 그 적합성을 검정하기 위해 기존배양액과 비교실험을 실시하였다. 딜의 NFT재배에 적합한 배양액을 개발하기 위해서 일본야채시험장 표준액을 1/4배액, 1/2배액 및 1배액으로 조성하여 재배한 결과, 1/2배액에서 생육과 수량이 가장 높았으며 근권내 pH와 EC의 변화도 안정되었고, 식물체내 무기이온 합량도 적정치로 나타나 딜의 양분흡수특성에 적합할 것으로 판단되었다. 따라서 일본야채시험장 1/2 배액의 양수분 흡수율(n/w)을 기준으로 새로운 배양액을 조성하였으며, 이온의 조성은 NO$_3$―N 8.85, NH$_4$―N 0.55, P 2.1, K 6.2, Ca 2.8, Mg 1.7 me.L$^{-1}$였다. 딜의 순환식 NFT 재배용으로 개발한 배양액의 적합성 검정실험 결과, 근권내 pH와 EC는 저농도인 SCU 1/2배액을 제외하고는 변화폭이 크게 나타나지 않았다. 본 실험에서 개발된 SCU 1배액은 기존에 허브 배양액으로 사용된 일본 야채 시험장 배양액과 비교할 때 생육과 수량면에서 우수하였으며, 엽내 무기성분 함량도 적정수준을 나타내었다. 따라서, 본 실험에서 개발된 SCU 배양액은 딜의 NFT재배에 적합한 배양액이라 할 수 있다.

• KSBB Journal
• /
• 제9권5호
• /
• pp.518-524
• /
• 1994

Cytodex III 마립담체를 이용하여 무혈청배지에서 인간선장 세포를 배양하였다. 무혈청애지에서 미립담체 표변에 세포들은 정상적으로 부착하고 확 산하면셔 세포들은 담체에서 담체로 이동하여 생육 하였다. 미립담체에 접착 수율은 1%의 혈청 을 포 함된 배지에서는 약 93%인 반면에 무혈청배지에 서는 85% 정도로 나타났다. 접착된 세포의 90% 이상이 유가식 및 연속배양에서 탐체의 표변에 접 착한 후 6시간 후에 확산하며 생육하였다. 유가식 배양에셔 서1포농도와 최대 scu-P A 농도는 각각 $9.1{\times}10^5$ cells/m!와 1790 IU/ml이였고 연속배양에 셔는 각각 $2.5{\times}10^6$ cells/m]와 1820 IU/ml로 나타났다. 또한 저혈청배지에셔는 scu-P A가 tc-P A로의 전환율이 10% 정도로 높은데 비교하여 무혈 청배지에서는 전환율이 4.8%로 낮은 것으로 나타났 다. 이처럼 무혈청배지는 저혈청배지에셔보다 낮은 tc-P A로의 전환율을 유지할 수 있는 이점이 었다.

• Journal of Nutrition and Health
• /
• 제37권6호
• /
• pp.431-439
• /
• 2004

Scutellariae Radix (Scu.), one of the immune-regulatory substances, is recognized to play the role in the metabolic process of inflammation, allergy and immunity. It has been traditionally used in the Oriental medicine to treat inflammatory bowel diseases (IBD). The purpose of this study was to evaluate the effects of water extracts of Scutellariae Radix on the spleen lymphocyte immune function in the Balb/c female mice treated with dextran sodium sulfate (DSS) to induce colitis. Water extract of Scutellariae Radix (100 mg/kg) and sulfasalazine (50 mg/kg) were administrated orally for 2 weeks of experimental period. Mice were divided into three experimental groups randomly: DSS group (5％ DSS was ad libitum for 5 days) as control group, DSS ＋ Scu. (water extracts of Scutellariae Radix for 2 weeks after 5％ DSS was ad libitum for 5 days) as experimental group, and DSS ＋ Sulfasalazine group (Sulfasalazine for 2 weeks after 5％ DSS was ad libitum for 5 days) as positive control group. Levels of Ig A, Ig E, CD4$^{＋}$, CD8$^{＋}$, TNF-$\alpha$ and other cytokines were measured. Treatment of DSS for 5 days induced bowel inflammation and the treatment with Scu. water exteract and sulfasalazine significantly recovered the damage. The length of intestine of DSS group was significantly shorter than that of other groups. The serum and fecal concentration of Ig A of SS ＋ Scu group was higher than those of DSS group. The contents of CD4$^{＋}$ T cells was higher in the DSS ＋ Scu. group than the other groups and CD8$^{＋}$ T cells was the lowest in DSS ＋ Sulfasalazine group. The Ig A level of cultured supernatant of spleen lymphocyte was the highest, while the Ig E level was the lowest in SS ＋ Scu group. The concentration of TNF-$\alpha$, cytokine secreted from the Th1 cell in the supernatant spleen lymphocyte, was the highest in the DSS group and the lowest in the DSS ＋ Scu. group. The concentration of IFN-${\gamma}$ and ll...-12 was lower in the DSS ＋ Scu. group than those of the other groups. The concentration of IL-4 in the supernatant of spleen lymphocyte was the lowest in the DSS ＋ Scu. group but IL-10 was not significantly different. Based on these findings, water extract of Scutellariae Radix exhibited the inhibitory effect via IL-4 production thereby inhibited the production of Ig E and strengthened immune system, and alleviated injury in DSS- induced colitis mice model.

• 한국콘크리트학회:학술대회논문집
• /
• 한국콘크리트학회 2002년도 봄 학술발표회 논문집
• /
• pp.817-822
• /
• 2002

In this paper, the strengthening analysis by strut-tie model for strengthened shear failed RC deep beam by the so-called the Steel Clamping Unit (SCU), which is a strengthening equipment, is carried out. The analysis considers the span-to-depth ratio, the existence of prestressing and stirrup, the shape of shear crack, and the strengthening position of the SCU. Based on analytical results, optimized strengthening analysis and design are carried out by investigating the behavior of the strengthened deep beams. The comparison between analytical results and experimental results shows that optimum strengthening effect by the SCU can be obtained when compressive strut zone created by SCU is away from major shear crack of the beam as far as possible.

• KSBB Journal
• /
• 제5권4호
• /
• pp.391-396
• /
• 1990

4.0$\times$10-3 (IU/cells/day) of maximum specific scu-PA production, which was higher than those by a 75$\textrm{cm}^2$ T-flask and conventional perfusion systems, was maintained by tube-type bioreactor at 0.35 (1/h) of perfusion rate corresponding to 0.15 (dynes/$\textrm{cm}^2$) of shear stress. The production of scu-PA is also increased as shear stress was slowly increased, which is similar to natural human blood circulation. The tube reactor proves that there may be no limitation of oxygen supply by showing 1.0 (1/h) of oxygen transfer coefficient at steady state and this system yields much lower shear stress of 0.3(dynes/$\textrm{cm}^2$) than that of 5-8(dynes/$\textrm{cm}^2$) by conventional agitation systems.

• Bulletin of the Korean Chemical Society
• /
• 제28권9호
• /
• pp.1515-1518
• /
• 2007

A preparative method of Me2SCuX (X = Cl, Br) via one-pot reaction was developed from common chemicals such as benzyl halide, DMSO, and Cu(0). In the reaction mixture small molecules such as methyl halide and dimethyl sulfide etc. were efficiently generated in situ, resulting in the formation of Me2SCuX. Oxidation of Cu(0) in reacting with both benzyl halide (starting material) and methyl halide (in situ generated product) to Cu(I) followed by complexing with dimethyl sulfide (in situ generated product) could explain the formation of Me2SCuX. In particular we found out that heterogeneous reaction of Me2SCuX and arenediazonium tetrafluoroborate in acetonitrile was so effective to afford corresponding bromoaromatics under mild conditions.