• 제목/요약/키워드: S1muclease mapping

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Poly A tail을 결핍한 Simian virus 40 spliced RNA의 세포내 분포 (The abundant presence of nonpolyadenylated SV40 late 19S spliced RNA in the nucleus of monkey cell)

  • 노정혜
    • 미생물학회지
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    • 제26권2호
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    • pp.106-112
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    • 1988
  • We have examined the structures and cellular distributions of the SV40 late RNAs present in monkey cells at late times after infection. One particular RNA species, spliced at residue 373(373-RNA), was found to be as abundant as the major late 16S RNAs. This result was unexpected since previous reports showed that the molecular ratio of the 373-spliced 19S RNA to 16S RNA is approximately 0.1 among either cytoplasmic polyadenylated or polysomal viral RNAs. Both sedimentation and electrophoretic analysis indicated that the 373-RNA was approximately 16S to 19S in size. Therefore, it was not a splicing intermediate or the product of premature termination of transcription within the late leader region. Whereas most SV40 late 16S RNA is polyadenylated and located in the cytoplasm, the majority of 373-RNA was found to lack poly A, and be located in the nucleus.

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Poly A tail이 없는 SV 40 spliced RNA의 구조 및 핵내 축적의 원인 (The Structure and The Reason for Nuclear Accumulation of Poly A(-) Spliced SV40 RNA)

  • 박주상;노정혜
    • 미생물학회지
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    • 제27권1호
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    • pp.1-9
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    • 1989
  • SV40 바이러스가 원숭이 세포(CVIP)에 감염한 후기에 생기는 poly A(-) 19S RNA의 5'끝과 splicing 유형을 알아보기 위하여 primer extension 및 그 변형방법을 행하였다. 이 RNA의 5' 끝은 SV40 후가 RNA들이 가장 많이 사용하는 cap 자리 인 잔기 325 위치임이 밝혀졌다. 또한 splicing 유형도 세포질의 polyA(+)인 19S RNA와 같은 잔기 373에서 잔기 5581까지의 intron이 제거된 형태이었다. Sl 뉴클리아제에 의한 분석결과 이 RNA의 3' 끝은 polyadenylation 위치로부터 상위로 약11kb에 걸쳐 다양하게 존재함을 알았다. 정상적인 cap 자리와 splicing 형태를 지닌 이 RNA가 왜 핵에 축적되는지의 이유를 조사하였다. 이 RNA상에 사용되지 못한채로 남아있는 3' splice 부위가 핵내 편재를 유발했는지의 여부를 알아보기 위하여, 3' splice 부위를 결손시킨 돌연변이 SV 40 pNA를 세포에 도입시켰다.. 그 결과 3'splice 자리가 없는 RNA는 세포질에 많이 축적됨을 관찰하였다. 이 결손 RNA의 세포질내 축적은 결손으로 인해 RNA의 안정성이 증가함으로써 비롯된 것이 아니라는 것을 actinomycin D 추적실험을 통해 밝혔다. 따라서 정상적인 19S spliced RNA가 세포질로 이동되는 과정을 방해하는 것은 사용되지 않은 3' splice 부위에 형성된 pre-splicing 복합체 때문인 것으로 여겨진다.

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