• Tuberculosis and Respiratory Diseases
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• 제44권6호
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• pp.1353-1365
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• 1997

연구배경 : 종양괴사인자(tumor necrosis factor ; TNF)는 다양한 생물학적 기능을 가지고 있는 바, 그 중 생체 외에서 증명된 뚜렷한 항암 효과로 말미암아 최근 항암 유전자요법의 중요한 대상으로 관심을 모으고 있다. 현재 유전자 이입의 기술적 문제로 생체 외에서 암세포에 유전자 이입을 시행한 후 이를 다시 환자의 생체내로 이식하는 방법이 연구의 주종을 이루고 있다. 그러나 저자들의 과거의 연구를 포함한 여러 연구에서 TNF가 이입된 암세포는 TNF에 대해 내성을 보이는 이에는 새로이 방어 단백질을 합성하는 것이 관여할 것이라는 시사가 있었다. 이 획득내성의 기전을 밝히는 것이 종양생물학의 이해를 넓히고 보다 효과적인 항암 유전자요법을 개발하기위한 매우 중요한 과제로 생각된다. 저자들은 TNF 유전자 이입에 따른 암세포의 TNF에 대한 획득내성에, 일부 세포에서 TNF에 의해 발현이 유도된다는 것이 밝혀진, 항산화효소의 하나인 MnSOD의 발현의 변화가 관여하는 지를 규명하고자 본 실험을 수행하였다. 방 법 : TNF에 다양한 감수성을 보이는 인체 및 생쥐 기원의 4가지 암세포주(WEHI164, NCI-H2058, A549, ME180)에 TNF-$\alpha$ 유전자를 retroviral 이용하여 이입하고 TNF의 발현을 시도하여 PCR, ELISA, MTT assay로 확인하였고, TNF 유전자가 이입된 세포(WEHI164-TNF, NCI-H2058-TNF, A549-TNF, ME180-TNF)는 TNF에 내성을 보이는지 역시 MTT assay로 검증하였다. TNF 유전자 이입 전후의 MnSOD mRNA 발현의 차이는 Northern blot analysis를 통하여 비교하였다. 결 과 : 1) TNF-$\alpha$ 유천자 이입 및 발현 확인 PCR을 시행한 결과 TNF 유전자가 이입된 각 세포 790 base pair 표기의 진한 DNA band를 보인 반면 모세포주는 보이지 않아서 retroviral vector를 이용한 유전자 이입이 DNA 수준에서 이루어 있었다. 그리고 TNF 유전자가 이입된 세포의 배양상층액에서 TNF양을 ELISA로 측정한 결과 TNF를 세포에 따라 1.91ng/24hr/$10^6\;cells$에서 3.91ng/24hr/$10^6\;cells$ 생산함을 알 수 있었다. 2) TNF 유전자 이입 전후, 암세포의 TNF에 대한 감수성 비교 TNF 농도 100ng/ml에서 WEHI164-TNF와 ME180-TNF 세포는 통계적으로 유의하게 (p<0.01) TNF에 대한 내성을 획득함을 알 수 있었다. 3) TNF 유전자 이입 전후외 MnSOD mRNA 발현양상 TNF에 감수성을 보이는 WEHl164와 ME180세포는 TNF 유전자 이입 후에 MnSOD mRNA 발현이 증가되지 않았으며, TNF에 내성을 보이는 NCIH2058과 A549 세포는 TNF 유전자 이입 후에 MnSOD mRNA 발현의 증가가 관찰되었으나 이는 모세포에 외부에서 TNF를 주었을 때도 관찰되었다. 결 론 : 세포주에 TNF 유전자를 이입하여 TNF를 발현하게 하였을때 세포 자신은 TNF에 대해 내성을 하게 되는데, 이 획득내성은 MnSOD 발현 능력의 향상에 의한 것은 아닐 것으로 판단되나 각 세포주의 자연 상태의 TNF에 대한 감수성 여부는 MnSOD의 발현 차이가 관련될 것으로 생각된다.

• Tuberculosis and Respiratory Diseases
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• 제63권1호
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• pp.52-58
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• 2007

연구배경: 광역학 치료는 폐암 치료에 실질적으로 이용 가능하며, 많은 연구들에서 폐암 세포에서 세포사멸을 일으킨다는 것이 이미 알려져 있다. 그러나 이 세포사멸의 기전은 아직 정확히 알려져 있지 않으며, 이에 암세포의 전사에서 초기 변화가 어떻게 일어나는 지를 알아보기 위하여 실험을 수행하였다. 방 법: 광과민성 물질인 DH-I-180-3으로 A549 세포에 처리를 하고 광역학 치료를 한 후 관찰하였다. 광역학 치료 후 DEG kit를 이용하여 폐암 세포주에서의 유전자 발현을 보았으며, 유세포 분석기를 이용하여 세포 사멸을 측정하였다. 광역학 치료 후 의미있는 변화를 보인 유전자는 염기서열분석으로 확인하였다. 결 과: 유세포분석 결과 폐암세포주는 대부분 세포괴사에 의하여 사멸되었다.광역학 치료 후, 9개의 유전자에서 명확한 변화가 있음을 발견했으며 이 중8개의 유전자를 밝혀내었다. 3-phosphoglycerate dehydrogenase와 리보솜 단백질 S29의 유전자 발현이 증가되어 있었으며, carbonic anhydrase XII, clusterin, MRP3s1 protein, complement 3, membrane cofactor protein, ${\beta}$-1 integrin의 유전자 발현은 감소되어 있었다. 결 론: 본 연구는 광과민성 물질인 DH-I-180-3을 이용한 광역학 치료에서 폐암 세포의 세포사멸의 주된 기전이 세포괴사에 의해 이루어 진 것임을 밝혀냈으며, 이와 관련된 유전자들 대부분이 막단백의 변화를 통해 이루어짐을 알 수 있었다.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제41권3호
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• pp.379-382
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• 2013

Rhanella aquatilis AY2000 균주가 생산하는 일종의 당단백질인 항효모성 물질 (AYS)에 대한 항암활성을 조사하기 위해 in vitro에서 암세포에 대한 AYS의 세포독성을 조사하였다. 그 결과 AYS는 인체의 Jurkat T 세포와 마우스의 sarcoma 180 세포에 대해서는 세포독성을 나타내지 않았으나, 인체 대장암세포인 colon cancer TH20 세포에는 세포독성을 나타내었다. 또한 이 AYS는 62.5에서 500 ${\mu}g/ml$까지 농도의존적으로 인체대장암세포에 대해 세포독성을 증가시켰다. 뿐만 아니라 이 AYS와 시판 항암제를 혼합하여 처리한 결과 시판 항암제를 단독으로 처리한 것 보다 인체대장암세포에 대한 항암효과가 더욱 상승되었다.

• BMB Reports
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• 제36권4호
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• pp.379-386
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• 2003

A mutant herpes simplex virus 1, mtHSV, was constructed by inserting the E. coli beta-galactosidase gene into the loci of icp34.5, the apoptosis-inhibiting gene of HSV. The mtHSV replicated in and lysed U251 (human glioma cells), EJ (human bladder cells), and S-180 (mice sarcoma cells), but not Wish (human amnion cells) cells. With its intact tk (thymidine kinase) gene, mtHSV exhibited susceptibility to acyclovir (ACV), which provided an approach to control viral replication. An in vivo test with mtHSV was conducted in immune-competent mice bearing sarcoma S-180 tumors, which were treated with a single intratumoral injection of mtHSV or PBS. Tumor dimensions then were measured at serial time points, and the tumor volumes were calculated. Sarcoma growth was significantly inhibited with prolonged time and reduced tumor volume. There was microscopic evidence of necrosis of tumors in treated mice, whereas no damage was found in other organs. Immunohistochemical staining revealed that virus replication was exclusively confined to the treated tumor cells. HSV-1 DNA was detected in tumors, but not in the other organs by a polymerase chain reaction analysis. From these experiments, we concluded that mtHSV should be a safe and promising oncolytic agent for cancer treatment.

• Biomolecules & Therapeutics
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• 제30권4호
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• pp.299-308
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• 2022

T cells are attractive targets for the development of immunotherapy to treat cancer due to their biological features, capacity of cytotoxicity, and antigen-specific binding of receptors. Novel strategies that can modulate T cell functions or receptor reactivity provide effective therapies, including checkpoint inhibitor, bispecific antibody, and adoptive transfer of T cells transduced with tumor antigen-specific receptors. T cell-based therapies have presented successful pre-clinical/clinical outcomes despite their common immune-related adverse effects. Ongoing studies will allow us to advance current T cell therapies and develop innovative personalized T cell therapies. This review summarizes immunotherapeutic approaches with a focus on T cells. Anti-cancer T cell therapies are also discussed regarding their biological perspectives, efficacy, toxicity, challenges, and opportunities.

• Preventive Nutrition and Food Science
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• 제5권1호
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• pp.48-53
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• 2000

Inhibitory effects of the methanol extract, hexane extract, methanol soluble fraction (MSF) and juice from 3 weeks fermented Kimchi on the tumor formation in sarcoma-180 cell transplanted mice were studied. Effects of the solvent extracts and juice of the Kimchi on the levels of lipid peroxide, glutathione, and the enzyme activities of the liver were also investigated in normal and sarcoma-180 cell transplanted mice. At 32 days following trans-plantation, MSF reduced the tumor formation by 54% compared with the control group, resulting in the smallest tumor weight. Lipid peroxided content in liver increased by the transplantation of sarcoma-180 cells. However, it decreased when MSF of Kimchi was treated to the mice. MSF also suppressed xanthine oxidase activity in cytosol of the liver cells in mice transplanted by sarcoma-180 cells. Kimchi extracts had no inhibitory effect on hepatic aminopyrine-N-demethylase activity in sarcoma-180 cell transplanted or normal mice. Methanol extract and hexane extract of Kimchi slightly increased hepatic glutathione contents in sarcoma-180 treated mice. The injection of MSF from Kimchi markedly increased glutathione levels in the liver of sarcoma-180 treated mice. The injection of MSF from Kimchi markedly increased glutathione levels in the liver of sarcoma-180 treated mice compared to the controls. The MSF recovered the activities of hepatic glutathione reductase and glutathione S-transferase that decreased by the injection of sarcoma-180 cells. These results showed that MSF of Kimchi could suppress the growth of tumors, inhibiting lipid peroxide production and xanthine oxidase activity, in mice. We also suggested that Kimchi extract might play an important role in the prevention of cancer by enhancement of the glutathione level itself as well as via glutathione reductase and glutathione S-transferase.

• 한국식품영양과학회지
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• 제30권6호
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• pp.1266-1271
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• 2001

대두식품들로부터 추출한 지질분획들이 사람의 K562 백혈구암세포, mouse의 Yak1 백혈구암세포 및 S180 고형암세포에 미치는 세포독성 효과를 MTT assay법으로 조사하였다. 대두, 비지 및 된장의 총지질을 chloroform/methanol(2 : 1) 및 물포화 butanol로 추출하고 20배 용량의 acetone을 가하여 아세톤상층액(AS 획분) 및 아세톤침전물(AP 획분)을 얻었다 된장지질의 AS 획분 및 AP 획분이 실험에 사용한 K562, Yac1 및 S180암세포에 가장 강한 세포독성을 일으켰으며 비지 의 AS 및 AP 획분 역시 된장보다는 약하지만 세포독성을 나타냈으나 대두의 지질획분들은 세포독성효과를 나타내지 않았다. 된장지질의 AS 및 AP분획의 지질조성을 보면 대두 및 비지에 비하여 많은 양의 유리지방산이 함유되어 있었다. 또한 지질획 분들을 0.4 N KOH/methanol로 약알카리 분해하고 silica gel TLC로 분석한 결과, 된장의 지질획분에서는 대두 및 비지에서 보이지 않았던 알카리에 안정하고 ninhydrin에 양성인 물질들이 여러개 나타났으며 이들은 유리 sphingoid base 및 psycusin으로 추정되었다.

• 한국식품과학회지
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• 제30권3호
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• pp.702-708
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• 1998

연구는 버섯을 이용한 기능성식품 개발 및 버섯가공 산업 육성에 기초자료를 제공하고자 표고버섯 및 느타리버섯 자실체, 균사체 및 폐상의 조단백다당체 분말을 0, 5, 25 mg/kg 농도로 생리식염수에 용해시켜 마우스(DBA/2와 ICR)에 주사하여 i) 백혈병$(L_{1210})$, 간암$(H_{22}),\;mouser{\;}sarcoma180\;(S_{180})$에 대한 항암효과, ii) 면역기전에 관련된 장기중량변화, 용혈반 형성 세포수 변화 등 조단백다당이 면역에 미치는 영향, 그리고 in vitro 세포독성실험을 수행하였다. 본 실험에서 사용한 모든 조단백다당류는 백혈병에 대해 항암효과를 보였는데 그 중 표고버섯자실체 25 mg/kg 처리구가 가장 높은 저지율(86%)을 보였다. 간암$(H_{22})$에 대한 항암효과는 표고버섯균사체 5 mg/kg 처리구를 제외하고 모든 처리구에서 저지효과를 보였는데, 그 중 느타리버섯 폐상 25 mg/kg 처리구가 가장 높은 저지율(87.6%)을 보였으며, 다음은 표고버섯자실체 25 mg/kg 처리구(71%)였다. Sarcoma180에 대한 항암효과는 표고버섯균사체와 자실체 25 mg/kg 처리구에서 각각 30.9,와 33.9%의 저지율을 보였다. In vitro 세포독성검사에서 각 시료의 최종농도 $50,\;100,\;200,\;400\;{\mu}g/{\mu}L$에서 $L_{1210}$에 대한 유의적 세포사망률은 보이지 않았다. 면역효과 실험에서 간장과 비장중량은 농도증가에 따라 증가하는 추세이나 현저한 차이는 없었다. 표고버섯균사체와 자실체 처리시 항체생성능력을 지닌 용혈반 형성 세포수는 대조군에 비해 현저히 높게 나타났다.

• 동의생리병리학회지
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• 제24권4호
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• pp.602-609
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• 2010

This study was carried out to investigate the anti-cancer effects of Gunbibosinhangam-tang (GBHT I) and Gunbibosinhangam-tang-gamibang (GBHT II, GBHT III) on solid tumor and immune cells. The animals were divided into 4 groups ; Control, no treatment. GBHT I, treatment with GBHT itself. GBHT II, treatment with GBHT increased the quantity of Hedyotis Diffusae twice. GBHT III, treatment with GBHT increased the quantity of Hedyotis Diffusae four times. We investigated the effects of GBHT on proliferation of solid tumor cells (S-180), thymocytes, splenocytes in vitro in order to examine cytotoxicity for S-180 and immuno-stimulating activities. The experiments that is about solid tumor weight and survival rate in tumor bearing mice were performed also. As compared with the control group, treatments with GBHT II and GBHT III suppressed the proliferation of S-180 effectively. Treatments with all experimental groups accelerated the proliferation of thymocytes and splenocytes significantly. In addition, GBHT III was significantly decreased on solid tumor weight and increased on survival rate in tumor bearing mice. Based upon these results, we suggest that GBHT and GBHT-gamibang have both anti-cancer effects for S-180 and immuno-stimulating activities for thymocytes and splenocytes. Therefore, we conclude that GBHT and Hedyotis Diffusae is useful to treat the patients with cancer.

• 대한한방내과학회지
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• 제28권2호
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• pp.321-332
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• 2007

Objectives : Anticancer and immune-modulating effects of several Korean medical prescriptions including Yukgunja-tang, Bohwa-tang, Sogam-Won, and Kamiboa-tang were investigated. Methods : In vitro anti-cancer effects were measured by cytotoxicity MTT assay using SNU-1 gastric cancer cell lines, In vivo anti-cancer effects were measured by increased life span of S-180 sarcoma-injected ICR mouse. Immune-modulating effects were analyzed by measuring hemagglutinin titer, appearance of rosette forming cells, lymphocyte proliferation, and phagocytic index in methotrexate-pretreated mice. Results : In vitro assay showed that only Sogam-won showed cytotoxic effect with $IC_{50}$ of 87.9 ${\mu}g/ml$. All other prescriptions showed no cytotoxic effects against SNU-1 gastric cancer cell line. However, in vivo assay showed that Sogam-won showed lowest anti-cancer effects in contrast to its highest cytotoxic effects, Kamiboa-tang, which showed no cytotoxic effect, showed the highest in vivo anticancer effects, with increased life span of 140%. Kamiboa-tang showed significant immune-enhancing activities by significantly increasing rosette forming cells, lymphocyte proliferation, and phagocytic index in methotrexate-pretreated mice (P<0.05). Conclusion : The anticancer effect of Kamiboa-tang is not mediated by direct inhibition of cancer cells but is mediated by improving immune reactions against cancer cells.